雌激素受体α上调前列腺癌细胞株LNCaP中L-Plastin启动子转录活性研究

目的鉴定雌激素受体在L-Plastin启动子上的结合位点，进一步阐明雌激素受体在激素依赖型前列腺癌中的作用机制。方法利用TFSEARCH软件分析L-Plastin启动子的序列，寻找可能调控L-Plastin表达的雌激素受体结合位点，利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子，检测切除该片段序列后荧光素酶活性，并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实雌激素受体是否结合于该位点，研究雌激素受体在激素依赖型前列腺癌中调控L-Plastin表达的作用。结果TF SEARCH软件分析表明，在L-Plastin启动子上距转录起始点-85～-70bp处，含有雌激素受体结合位点ATTTCACTGTGACCT，删除该结合位点后L-Plastin启动子荧光素酶活性明显下降。凝胶滞后实验和超滞后实验表明雌激素受体α是结合于该位点的转录因子。结论雌激素受体α具有促进L-plastin在激素依赖型前列腺癌中表达的作用。     

原发性精囊恶性肿瘤的诊断及治疗(附3例报告)

目的 探讨原发性精囊恶性肿瘤的诊断及治疗方法。方法 回顾分析了3例原发性精囊恶性肿瘤的症状、体征、检查结果及手术方案，并对患者进行随访，总结了原发性精囊恶性肿瘤诊断及治疗特点。结果 1例行双侧精囊连同膀胱、前列腺、直肠（全盆腔切除术）根治性切除术，2例行精囊肿瘤、膀胱部分、前列腺部分切除术，2例术后随访5年内无复发和转移，1例术后至今（3个月）未复发。结论 原发性精囊恶性肿瘤初期症状不明显，早期诊断困难，容易误诊，但是临床工作中注意该病的存在，可提高诊断率。手术是本病的基本治疗措施，可根据肿瘤的范围、周围器官受累情况选择手术范围。     

西地那非的脑动脉血管活性效应中K~+和Ca~(2+)离子流的作用

为了探讨磷酸二酯酶抑制剂西地那非在脑动脉血管活性效应中K^＋和Ca^2＋（离子）流的作用，Salom等做了一项相关研究，研究者使用离体兔子的脑基底动脉来评价西地那非诱导的血管扩张细胞外K^＋升高的效应，并且研究西地那非对K^＋、Ca^2＋离子膜通道选择性递质的药理作用。信使和蛋白的水平用来评估K^＋通道的亚基Kv1的表达。苯氮嘌呤酮作对照完成类似的实验。用KCL（50mmol／L）、     

13-MTD诱导膀胱癌细胞株T24凋亡的实验研究

目的观察饱和脂肪酸13-MTD对人膀胱癌细胞株T24体外诱导凋亡作用。方法用13-MTD处理人膀胱癌细胞株T24后,MTT法检测细胞生长情况。TUNEL、流式细胞仪检测13-MTD是否诱导凋亡,Western印迹法检测caspase酶底物裂解。结果35~145μg/ml的13-MTD以剂量及时间依赖方式明显抑制T24细胞生长。TUNEL示13-MTD引起T24凋亡细胞呈棕色或棕褐色形态学改变。70μg/ml的13-MTD显著抑制T24细胞增殖周期进程,2h出现sub-G1亚二倍体凋亡峰,48h后细胞凋亡率可以达到84.1%。同时13-MTD可以引起T24细胞的caspase酶的代谢底物(PARP、LaminB、RB)的裂解。结论13-MTD对T24细胞具有诱导凋亡的作用,诱导途径为Caspase酶依赖。     

改良单孔腹腔镜下根治性膀胱前列腺切除-原位回肠新膀胱术围手术期护理

目的报道12例经改良单孔腹腔镜下根治性膀胱前列腺切除-原位回肠新膀胱术的围手术期护理体会。方法 2008年11月至2010年10月,我科为12例男性膀胱癌患者行改良单孔腹腔镜下根治性膀胱前列腺切除-原位回肠新膀胱术,围手术期予及时疼痛护理,高质量管道护理、尿管牵引及新膀胱功能训练。结果 12例手术均顺利完成,无中转常规腹腔镜手术或开放手术。1例术后2d出现谵妄,1例术后3d出现不完全性肠梗阻,2例术后4d出现淋巴漏,经及时治疗治愈。结论在围手术期加强心理护理,重视肠道及脐部皮肤准备,高质量的管道护理及系统的新膀胱功能训练,对减少术后并发症、提高患者康复水平和生活质量有重要意义。     

肾盂炎性肌纤维母细胞瘤合并肾髓质间质细胞瘤1例报告

炎性肌纤维母细胞瘤是一种潜在或低度恶性的间叶组织肿瘤,临床少见;肾髓质间质细胞瘤是一种临床少见的肾良性肿瘤。同时合并这两种疾病者,尚未见文献报道,本文报道1例。患者因腰痛、血尿入院,术前MRI检查考虑肾盂癌可能性大。行机器人辅助腹腔镜根治性左肾输尿管切除术,术后病理示肾盂炎性肌纤维母细胞瘤合并肾髓质间质细胞瘤。术后随访...     

输尿管子宫内膜异位症（附6例报告）

目的:总结输尿管子宫内膜异位症的临床,病理特点及采用不同手术方法治疗的效果.方法:回顾分析6例输尿管子宫内膜异位症患者的临床资料、术后随访资料,并对这些结果进行对比分析.结果:6例患者均为单侧发病、均为下1/3段,3例术前病理确诊,行病变段切除、输尿管膀胱再植术,术后随访1～5年,均无复发梗阻;另外3例术前未确诊,行病变段冷刀内切开+双重双J管内引流2～3个月,拔管后随访过程中,1例失访,另外2例分别于6和11个月复发梗阻.改为病变段切除、输尿管膀胱再植术,再随访1～3年,未发现复发梗阻.6例术后2周始均结合药物内分泌治疗3～6个月,其中3例口服丹那唑0.2 g Bid,3例皮下注射康士得3.6mg 1次/月.结论:输尿管镜下冷刀内切开虽然创伤较小,但不能完全去除异位的子宫内膜,梗阻复发率较高,故临床上以采用病变段切除、输尿管膀胱再植术,结合内分泌治疗为妥.     

鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中上调L-plastin表达的转录因子

【目的】鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中调控L-plastin表达的转录因子，进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机制。【方法】在鉴定L-plastin启动子近3’端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上，利用TFSEARCH软件分析该片段的序列，寻找可能调控L-plastin表达的非甾体激素类转录因子，并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实结合于该片段的转录因子，利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子，并检测切除该片段序列后荧光素酶活性，研究该转录因子在非激素依赖型前列腺癌中调控L-plastin表达的作用。【结果】TFSEARCH软件分析表明在距转录起始点-199-194bp处含有AP-4转录因子结合位点CAGCTG，凝胶滞后实验和超滞后实验表明AP-4是结合于L-plastin启动子3’端序列CAGCTG的转录因子，删除AP-4结合位点后荧光素酶活性下降。【结论】AP-4是促进L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的重要调控因子。     

Bcl-2 siRNA表达载体的构建及生物活性鉴定

目的: 构建bcl-2特异性siRNA真核细胞表达载体，并初步观察其对膀胱癌细胞生长的影响。方法： 根据GenBank 提供的bcl-2 cDNA序列，设计双链小干扰RNA（siRNA），再转化为能表达其小发卡结构RNA（shRNA）的DNA 序列，并与含U6启动子的pGenesil-1质粒定向连接，构建真核表达载体pGenesil-1545、pGenesil-1555。经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定。转染T24细胞，采用半定量RT-PCR观察重组质粒对bcl-2 mRNA表达的影响；用MTT法观察重组质粒对T24细胞体外生长的抑制作用。结果: 构建了bcl-2 siRNA的真核表达载体pGenesil-1545、pGenesil-1555，并经限制性内切酶酶切和DNA 测序证实与设计完全一致。转染T24细胞72 h后，RT-PCR显示bcl〖STBX〗-2〖STBZ〗基因表达下调接近80％；MTT发现T24细胞的体外生长受到明显抑制。结论: bcl-2的特异性siRNA真核细胞表达载体成功构建，有效沉默 bcl-2在膀胱癌细胞中的表达，抑制了癌细胞的生长。     

不同手术方式治疗精索静脉曲张的并发症比较(附840例分析)

目的 比较高选择性精索静脉高位结扎术、经腹股沟管入路精索静脉结扎术和腹腔镜下改良的palomo术三种手术方法 的并发症发生情况,为精索静脉曲张手术方法 选择提供依据.方法 回顾性分析Ⅱ度以上原发性精索静脉曲张患者1286例,840例获随访.根据不同的手术方式分为3组:其中高选择性精索静脉高位结扎术组为A组,共384例;B组为经腹股沟管入路精索静脉结扎术组,共358例;C组为腹腔镜下改良的palomo术组,共98例.通过对比观察3组有无阴囊、精索水肿;睾丸、局部皮肤疼痛、麻木;睾丸萎缩;复发,等远、近期并发症来评价不同手术方式的治疗效果.结果 3组之间复发率A组明显低于B组,2组之间差异有统计学意义(P<0.05);术后3个月睾丸萎缩的发生率A组低于B组和C组(P<0.05),C组低于B组(P<0.05);鞘膜积液的发生率A组低于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05);A组术后阴囊水肿发生率低于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 高选择性精索静脉高位结扎术简单且术后阴囊水肿、鞘膜积液和睾丸萎缩的发生率低,值得临床推广.