激光共聚焦扫描显微镜动态观察体外培养大鼠皮层神经元受氯化亚铁作用时过氧化物水平及膜电位的变化

目的:建立外伤性癫痫的铁离子诱导细胞模型,观察N-乙酰半胱氨酸及德巴金预处理对受氯化亚铁作用的皮层神经元过氧化物及膜电位的影响。方法:实验于2004-10/2005-06在南方医科大学珠江医院神经外科实验室完成。①培养的新生SD大鼠神经元细胞,随机分为5组:对照组,模型组(1mmol/L),N-乙酰半胱氨酸预处理组(终浓度0.08g/L);丙戊酸钠(德巴金)预处理组(终浓度0.1g/L);N-乙酰半胱氨酸 德巴金预处理组(终浓度分别为0.08g/L及0.1g/L)。②采用荧光探剂DiBAC4(3)和乙酰乙酸盐2’,7’二氯氢化荧光素分别标记,激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)断层光切扫描动态观察体外培养的大鼠脑皮层神经元受氯化亚铁作用时的细胞膜电位和过氧化物水平变化。③免疫组织化学检测核因子-κB的表达情况。结果:①大鼠脑皮层神经元过氧化物水平:与对照组比较,模型组过氧化物的相对荧光强度值著性增高(3.39±1.21,18.95±16.26,P=0.038<0.05);N-乙酰半胱氨酸预处理组及N-乙酰半胱氨酸 德巴金预处理组相对荧光强度变化呈负值(-19.66±10.40,-14.84±5.08),与模型组比较差异有显著性(P<0.01);德巴金预处理组(22.89±0.91)相对荧光强度变化与模型组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。②各组细胞膜电位测定结果:德巴金预处理组及N-乙酰半胱氨酸 德巴金预处理组相对荧光强度值明显低于模型组(-11.18±3.12,4.45±1.69,25.15±8.84,P<0.01);而N-乙酰半胱氨酸预处理组相对荧光强度变化(23.13±18.92)与模型组差异无显著性意义(P>0.05)。③模型组较对照组核因子κB染色强度明显增加;N-乙酰半胱氨酸预处理组与N-乙酰半胱氨酸 德巴金预处理组较模型组染色强度明显降低。结论:氯化亚铁对皮层神经元的作用可导致过氧化物的生成,导致膜电位的改变,N-乙酰半胱氨酸预保护可减少其过氧化物等自由基的生成,德巴金可起到稳定皮层神经元膜电位的作用,两者共同预处理可显著减轻皮层神经元受氯化亚铁作用的损伤。抗氧化剂联合抗癫痫药可能有助于防治与铁剂诱发有关的癫痫发作。     

锁孔显微手术治疗颅内动脉瘤

目的探讨锁孔显微手术治疗颅内动脉瘤的可行性和临床疗效。方法回顾性分析391例共415个的动脉瘤病人的临床资料,均采用锁孔显微手术治疗。经眉弓锁孔入路127例,经翼点锁孔入路257例,经颞下锁孔入路2例,经纵裂锁孔入路5例。术中予以神经电生理监测103例,予以神经内镜辅助15例。结果术后随访2周～84个月,动脉瘤成功夹闭399个(96.1%),单纯包裹8个,孤立5个,孤立加切除3个。根据GOS评估标准,恢复良好366例(93.6%),12例(3.1%)有不同程度的残疾,死亡13例(3.3%)。结论锁孔显微手术是治疗颅内动脉瘤的理想方法,术中辅以神经电生理监测和神经内镜可增加手术成功率和安全性。     

高免疫原性胶质瘤细胞疫苗体外抗瘤时靶细胞超微结构变化

目的观察高免疫原性人多形性胶质母细胞瘤（GBM）U251细胞疫苗体外诱发产生效应细胞杀伤靶细胞的超微结构变化。方法以500U／mL干扰素-γ（IFN-γ）诱导48h＋热43℃休克2h诱导膜型热休克蛋白70（HSP70）及主要组织相容性抗原复合体Ⅰ类分子（MHC-Ⅰ）双高表达,经丝裂霉素（MMC）灭活制成高免疫原性细胞疫苗。体外刺激健康捐献者外周血单个核细胞（PBMCs）作为效应细胞（MHC—HSP—CTL）,进行肿瘤特异性杀伤试验;MTT比色法检测其杀伤活性;透射电镜观察靶细胞受攻击后情况。结果MHC-HSP-CTL对野生型U251细胞特异性的杀瘤活性明显高于HSP70分子单高表达的细胞疫苗刺激组（HSP-CTL）、MHC-I类分子单高表达的细胞疫苗刺激组（MHC-CTL）以及野生型对照组（W-CTL）（P〈0．05）,透射电镜显示靶细胞受到攻击后出现不同程度凋亡样坏死和胀亡样坏死,胀亡样坏死细胞在高免疫原性细胞疫苗刺激的效应细胞组较多。结论介导细胞胀亡是高免疫原性即膜型HSP70和MHC-Ⅰ类分子双高表达疫苗的U251细胞疫苗一种重要主动特异性抗瘤机制。     

损伤性癫痫模型大鼠海马和额叶突触蛋白的动态表达

Objective To observe the time course of changes in synaptophysin (P38) expression in the cortex and hippocampus of rats with posttraumatic epilepsy (PTE), and explore the role of synaptic plasticity in the epileptogenesis of PTE. Methods Thirty-seven male Sprague-Dawley rats were randomized into normal control group (n=5), sham-operated group (n=12) with intracortical saline injection, and PTE model group (n=20) with stereotactic FeCl<,2> injection (0.1 mol/L, 10 μ1) into the motor cortex. The expression of P38 in the brain cortex and hippocampus of the rats was detected immunohistochemically at 1 h and 7, 14 and 30 days after the injections. Results Most of the rats with FeCl<,2> injection developed isolated epileptiform discharges soon alter the injection. Compared with the sham-operated groups, the rats in PTE group showed significantly decreased P38 expression in the right frontal cortex at all the time points of measurement (P<0.05). At 1 h after FeCl<,2> injection, P38 expression in the polymorphic layer, stratum lacunosum and stratum radiatum of the right hippocampai CA3 area and DG molecular layer underwent no significant changes (P>05), but at 7 days, the expression increased significantly in all the stratum regions of the right hippocampal CA3 area, and this high expression level was maintained till 30 days after the injection. Conclusion Synaptic plasticity alterations in relation to P38 expression changes in the cortex and hippocampus may play an important role in the epileptogenesis of PTE in this rat model.     

癫痫灶中凋亡调控基因Bcl-2和Bax的表达

目的研究难治性癫痫患者癞痫灶脑组织中Bcl-2、Bax的表达情况、以探讨癫痫与细胞凋亡调节基因之间的关系。方法采用免疫组化染色法(二步法)检测30例癫痫灶及10例周边脑组织中Bcl-2、Bax的表达，并进行统计学处理。结果Bcl-2、Bax在癫痫灶及周边脑组织均有一定的表达、癫痫灶中Bcl-2的表达明显增多(P=0．003)：而癫痫灶及周边脑组织中Bax的表达比较差别无统计学意义(P=0．198)。结论 癫痫灶中存在细胞凋亡现象，且Bcl-2基因家族对此细胞凋亡起重要调控作用，Bax的表达与周边脑组织比较，差别无统计学意义、估计其作用有其他因素参与。     

颅脑CT表现为小型低密度病灶的顽固性癫痫病理所见及手术治疗

目的：探讨颅脑CT表现为小型低密度灶的顽固性癫痫临床表现、病理所见及手术治疗。方法：回顾性研究自1992年以来24例临床资料。结果：术中皮层电图均可监测出尖波或棘波。病灶病理多样，占多数的是小胶质瘤、胶质细胞增生、炎症或囊性病变、小型脑血管畸形及寄生虫。痫灶主要病理变化为神经元变性、坏死，不同程度丧失，树突棘脱失；噬节及胶质细胞增生；脱髓鞘；小血管增生。结论：颅内小型低密度灶并非罕见病变，是顽固性癫痫的一个重要的CT影像学表现。对此类患要采取积极手术治疗，既要注重病灶切除，更要注重痫灶切除。     

15例小脑出血的外科治疗

１５例小脑出血的外科治疗福建医学院附属第一医院神经外科林元相，张义成小脑出血约占脑内出血的５～１３％，自ＣＴ应用以来改变了小脑出血诊断困难的局面，但若未能及时恰当治疗，常造成不可逆的脑损害。为此，就我科近期收治的１５例报告如下。一、临床资料（一）一般...     

颅脑术后清醒病人出现非癫痫性意识障碍的因素分析

目的 探讨颅脑术后清醒病人出现非癫痫性意识障碍的时间窗及原因。方法 对1989年以来共28例非癫痫所致的颅脑术后清醒病人再出现意识障碍的因素进行回顾性分析。结果 ①意识障碍原因：硬膜外血肿引起的8例；术腔血肿、急性梗阻性脑积水所致的各有5例；尿崩致休克及水电解质紊乱、内分泌失调、肺部感染伴高热各2例；颅内感染伴气颅、吸气困难、脑肿胀、颅底修补物肿胀各1例；②意识障碍的时间窗：术后12h内出现11例；13—24h内1例；25-48h内5例；49-72h内4例；73—96h内6例；术后第7d出现1例。结论 颅脑术后清醒病人出现意识障碍原因复杂，但以术后颅内血肿和急性梗阻性脑积水多见(18／28)，且多在术后72h内出现。术中彻底止血和术后防止急性梗阻性脑积水及术后72h内加强监护是预防术后清醒病人出现意识障碍的关键措施。     

颈2背根神经节脉冲射频治疗颈源性头痛效果探讨

目的分析颈2背根神经节脉冲射频治疗颈源性头痛（cEH）的有效性及安全性。方法16名确诊为CEH患者行颈2背根神经节脉冲射频术治疗,利用视觉模拟评分法（VAS）、Hamilton焦虑评分（HADA）和Hamilton抑郁评分（HADD）进行治疗前后疗效评定,并记录手术并发症。结果与术前相比,术后1周及术后半年的VAS、HADD和HADA评分明显降低。无颈髓损伤、无椎动脉损伤及感染等并发症发生。结论对于CEH,颈2背根神经节脉冲射频术是一种安全、有效的选择。