新型甲型H1N1流感病毒深圳分离株HA基因的克隆与进化

目的 分析2009年新型甲型H1N1流感病毒深圳分离株A/Shenzhen/71/09血凝素(Hemagglufinin,HA)基因序列,探讨其基因变异与分子进化.方法 采用RT-PCR技术扩增A/Shenzhen/71/09 HA基因片段并进行测序,利用Cluster和Mega3.1软件对不同亚型毒株HA基因核苷酸序列进行分析,绘制发育进化树. 结果 A/Shenzhen/71/09毒株HA基因包含HA1和HA2两个片段,长度分别约为1 032bp和669bp,HA蛋白裂解位点为VPSIQSR↓ GLF,不含连续碱性氨基酸.进化分析表明该病毒株与其它亚型病毒株遗传距离较远,而与深圳地区同期分离的其它H1N1毒株高度同源,同源性在99.0％以上.结论 新型甲型H1N1流感病毒HA基因不具备高致病流感病毒序列特征,深圳地区同期分离的毒株变异率低,但仍需密切关注新型甲型流感的传播情况.     

澳大利亚John Murtagh全科病案研究(四十四)——病史复杂的患者

澳大利亚的研究表明,超过30%的全科医学诊所的患者有心理疾病。有些患者是医院或诊所的"常客",主诉各种奇怪的症状,要求做各种检查,然而体检和检查结果总是不能合理地解释患者的主诉或症状。有些医生把这种患者的病称为"厚病历综合征",也有医生称这类患者为"让人心沉的患者"或"难缠的患者"。Murtagh教授在本案例中介绍了一例未分化的躯体形式障碍,同时介绍了该病例与心理问题躯体化障碍的鉴别诊断。     

全科医学中的心理健康病案研究(四)——抑郁症

在全球范围内,抑郁症影响1.2亿人的健康。抑郁症也是中国的一个主要疾病负担,中国抑郁症发病率范围为2.7%～4.3%[1-3]。在澳大利亚6%的成人有情感障碍[4],20%以上的人一生中受过抑郁症的困扰,大多数人首先寻求全科医生的帮助。澳大利亚全科医学服务中26%的就诊与抑郁症诊治有关[5]。世界卫生组织认为,全科医学工作者可以准确地诊断和恰当地治疗抑郁症。在这个病案讨论中,Monash大学和Melbourne大学的教授们介绍了全科医生怎样在诊所管理和治疗抑郁症病人。     

澳大利亚John Murtagh全科病案研究(四十二)——糖尿病患者的并发症

John Murtagh,澳大利亚Monash大学全科医学系兼职教授和Melbourne大学的全科医学专家。1966年毕业于Monash大学,1986年担任《Australian Family Physician》杂志主编,1988年获得医学博士学位,1993年被Monash大学聘为教授。1995年,鉴于他在医学教育、研究和著作方面的卓越贡献,被授予澳大利亚勋章,他的著作《Murtagh’s General Practice》被奉为澳大利亚全科医生的"圣经"。其著作在中国也产生了巨大的影响。《Murtagh’sGeneral Practice》中译本已在2010年岁末出版发行。"澳大利亚John Murtagh全科病案研究"自2008年开始在《中国全科医学》杂志连续刊登以来,受到了广大中国全科医生的关注和好评。Murtagh教授每一个娓娓道来的病案都是他毕生宝贵工作经验的精华,是为《中国全科医学》杂志专门撰写,是中国的全科医生前进的导航和指引。本期John Murtagh教授与我们分享了两例糖尿病患者的并发症的病案。澳大利亚Monash大学杨辉教授对本文进行了翻译点评,以飨我国读者。在此衷心感谢Murtagh教授和担任本栏目翻译点评工作的杨辉教授对中国全科医学发展给予的大力支持和帮助!     

十二指肠隆起病变内镜手术的疗效分析

[目的]分析十二指肠隆起病变内镜下治疗多种方法的有效性与安全性.[方法]对经内镜治疗的十二指肠隆起病变患者的临床资料、病理特点、内镜手术方法、并发症和随访情况进行回顾性分析.[结果]117例中除1例十二指肠癌、1例类癌、1例＞2 cm的间质瘤转外科手术外,其余114例均行内镜治疗.114例中行氩气凝固术45例,圈套切除术27例,内镜黏膜切除术36例,3例十二指肠囊肿行开窗引流术,3例直径≤2cm的间质瘤行介入性超声内镜（EUS）随访;4例术中发生出血,均在内镜下用钛夹或者氩气刀止血成功.术后随访1～12个月总有效率100％.[结论]十二指肠壁较薄,操作空间相对较小,内镜治疗时尤需注意切除深度.对来源于固有肌层的直径＞2 cm的病变,不主张内镜下治疗;对≤2 cm的病变采用EUS随访为较适宜的选择.     

TRPC5在结节性硬化症癫痫患者皮层致痫结节中的表达

目的 研究瞬时受体电位通道蛋白5 (transient receptor potential canonical channel 5,TRPC5)在结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)癫痫患者皮质中的表达与分布,探讨TRPC5在TSC癫痫发生中的可能机制.方法 收集新桥医院神经外科手术切除的TSC癫痫患者皮层致痫结节14例,与12例正常对照皮层(CTX)相比较,运用RT-PCR、western blot、免疫组织化学和免疫荧光等方法检测TRPC5在致痫灶中的表达分布.结果 TSC癫痫患者皮层致痫结节中,TRPC5在mRNA、蛋白表达水平较对照组明显升高(P＜0.05).免疫组化结果显示,在正常皮层中TRPC5弱至中等强度表达于神经元上,偶在胶质细胞上表达,而在TSC癫痫患者皮层致痫结节中强表达于神经元上,特别是巨型细胞和异形神经元上,胶质细胞表达强度也较CTX组增高,免疫染色强度明显高于正常皮层(染色强度值:2.77±0.43 vs 1.64±0.56;相对光密度值:64.72 ±9.56 vs 30.34 ±9.43;P ＜0.05).结论 TRPC5表达增高可能与TSC患者癫痫发病密切相关,可能成为治疗难治性癫痫的新药物靶点.     

应用果蝇S2细胞高效表达甲型H1N1流感病毒可溶性HA蛋白及其活性分析CSCD

目的应用果蝇s2细胞表达甲型H1Nl流感病毒可溶性HA蛋白,并评估其免疫活性。方法以甲型H1N1流感A／Shenzhen／7I／09病毒株作为模版,采用RT-PCR技术扩增HA基因,构建持续性表达载体pAC5．1-HA,协同筛选载体pCoblast共转染至s2细胞,通过Blasticindin抗生素筛选获得稳定转染的s2细胞株。利用WesternBlot技术鉴定细胞上清HA蛋白表达,使用Ni亲和柱纯化重组HA蛋白。使用HA免疫BALB／c小鼠3次,利用ELISA检测HA特异性抗体效价。结果成功克隆A／Shenzhen／7I／09HA基因,长度约1．7×10^3bp。将HA基因克隆入pAC5．1-V5／His载体,经过转染、抗生素筛选后获得稳定表达HA的s2细胞株,目的蛋白以分泌形式表达于上清,相对分子质量约75×10^3D。免疫小鼠后可诱导机体产生抗HA特异性抗体,免疫后10d、30d效价分别为1：1280、1：5120。结论获得可溶性表达的HA蛋白,并具有良好的免疫活性,为后期流感免疫诊断试剂的研制、亚单位疫苗的开发、单克隆抗体的制备奠定了基础。     

慢性乙型肝炎病毒感染对骨关节结核病患者实验室检测结果的影响

目的 探讨慢性乙肝病毒感染对骨关节结核病患者实验室检测的影响,为骨关节结核合并病毒感染患者的实验室检测结果的应用提供指导依据.方法 收集2008年6月至2012年6月期间曾在深圳市第三人民医院进行住院治疗并确诊为骨关节结核病的121例患者的临床资料,调查其合并慢性病毒感染情况,并分析合并病毒感染对结核病实验室检测结果的影响.结果 在121例骨关节结核患者中,有30例骨关节结核患者合并有HBV感染,2例骨关节结核患者合并HIV感染,1例骨关节结核患者同时合并感染HBV、HCV及HIV.与单纯的骨关节结核患者相比,合并慢性乙型肝炎病毒感染的骨关节结核患者在组织结核菌抗酸染色、组织结核菌培养、组织结核菌DNA、血清抗结核抗体、以及采用ELISPOT法检测的外周血结核菌特异性γ-干扰素的检出率的差别均无统计学意义;血沉、C反应蛋白、肝功能异常情况等感染相关指标检测结果的差别也不具有统计学意义.结论 慢性乙型肝炎病毒感染对骨关节结核病患者结核诊断实验室检查结果无明显影响,在评判相关实验室检查结果时可参照单纯骨关节结核.