LBP对LPS刺激巨噬细胞分泌细胞因子的调节作用

目的 采用脂多糖结合蛋白(LBP)和脂多糖(LPS)以不同比例、不同方式刺激THP-1细胞分泌细胞因子,探讨LBP在LPS转运和活化过程中的调节作用,以及单核巨噬细胞受LPS活化后其炎性和负炎性因子分泌的平衡情况.方法 将THP-1细胞进行增殖和传代后,经PMA刺激,转化为巨噬细胞.实验分为4个组:LPS组(用不同浓度LPS单独刺激)、LBP组(用不同浓度LBP单独刺激)、LBP/LPS预孵育组(LBP和LPS以不同浓度比例混合,37℃孵育15min)、LBP/LPS不孵育组(先加一定浓度LPS,再以不同浓度比例加入LBP).分别培养4、12、24h后,吸出上清液,发光法检测TNF-α,IL-10和IL-6水平,并进行统计学分析.结果 THP-1细胞为悬浮生长,用PMA诱导转化后变为巨噬细胞,变为贴壁生长.分别用1、10、100、1000ng/ml LPS单独刺激巨噬细胞分泌TNF-α,1ng/ml和其他组间均有统计学差异(P<0.05),其余3组间无统计学差异(P>0.05).用LBP刺激巨噬细胞,LBP浓度为1000ng/ml时,TNF-α和IL-6分泌达到最高.LBP/LPS不孵育组中,TNF-α和IL-6分泌曲线在LBP/LPS为10出现最高峰.LBP/LPS预孵育组的TNF-α和IL-6分泌曲线较平缓,无明显分泌高峰.LPS浓度为1000ng/ml时IL-10为8±0pg/ml,其余组IL-10均小于5pg/ml.经析因分析,LPS和LBP之间有交互关系(F=3.425,P<0.01),两者是否预孵育和培养时间有交互作用(F=4.240,P=0.026),LBP浓度和是否预孵育之间有交互作用(F=4.896,P<0.01).LPS浓度和是否预孵育,LPS浓度和培养时间,LBP浓度和培养时间均无明显交互作用(P>0.05).结论 LPS是活化单核巨噬细胞的重要物质,LPS在高浓度时刺激巨噬细胞分泌细胞因子具有饱和现象.LBP本身在高浓度时具有刺激巨噬细胞的活性,低浓度的LBP能增强LPS对巨噬细胞的活化,高浓度LBP则起到负性调节作用.体外单核细胞经PMA分化成巨噬细胞后,再用LPS刺激,IL-10无明显分泌,引起炎性和负炎性因子的严重失衡.     

外排泵adeB基因高表达在鲍氏不动杆菌临床分离株产生泛耐药中的作用

目的探讨外排泵adeB基因高表达在鲍氏不动杆菌临床分离株产生泛耐药中的作用。方法 M-H琼脂稀释法检测临床分离的泛耐药鲍氏不动杆菌(PRABA)对常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)及羰氰氯苯腙(CCCP)处理前后MIC值的变化情况,聚合酶链反应(PCR)和实时荧光RT-PCR检测泛耐药株adeB基因及adeBmRNA量。结果 PRABA对环丙沙星、四环素、头孢噻肟较CCCP处理前其MIC下降两个折点;头孢西丁下降4个折点,1号与5号菌株庆大霉素下降6个折点,为原MIC值的1/64;10株PRABAadeB基因阳性,2株全敏感鲍氏不动杆菌(PSABA)未检测到adeB基因,PRABAadeB基因mRNA的表达量平均为(0.84E+3)拷贝。结论主动外排泵adeB基因高表达与鲍氏不动杆菌产生泛耐药相关。     

脂蛋白在脂多糖诱导THP-1细胞活化中的调节机制

目的 研究血清脂蛋白对脂多糖的影响机制,并对不同种类脂蛋白:高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL),抑制脂多糖的能力进行比较,为研究脂蛋白在治疗败血症中的应用提供理论基础.方法 通过检测经佛波醇酯刺激分化的THP-1细胞分泌的TNF-α间接反映脂蛋白对脂多糖的抑制作用.将不同浓度脂多糖与THP-1细胞在血清基质中混合孵育4 h,并与3种脂蛋白-脂多糖混合液与THP-1细胞混合孵育后TNF-α的分泌量进行对比,计算脂蛋白对脂多糖的抑制情况.结果 HDL、LDL和VLDL单独不能诱导分化的THP-1细胞分泌TNF-α(P＞0.05).当10 ng/mL脂多糖与0.05 mg/m以上浓度的脂蛋白(HDL、LDL和VLDL)混合时,TNF-α分泌量明显降低.当脂多糖浓度为100 ng/mL时,0.1 mg/mL的脂蛋白(HDL、LDL和VLDL)对其抑制效果较低,分别为(20.7±11.1)%、(8.9±2.8)%、(4.3±1.6)%;在脂多糖浓度为10 ng/mL抑制效果明显增强,抑制率分别为(69.3±3.7)%、(42.9±5.7)%、(42.7±4.5)%.HDL对各浓度脂多糖的抑制效果均强于LDL和VLDL(P＜0.05).结论 脂蛋白在血清中能抑制脂多糖活化巨噬细胞分泌细胞因子,但抑制效果在脂多糖浓度高时相比浓度低时差.HDL对脂多糖活化巨噬细胞的抑制作用比LDL和VLDL强.     

痰热清注射液联合阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎的疗效分析

目的：探讨痰热清注射液辅助阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎的临床效果。方法：选择我院2014年8月～2015年8月收治的108例支原体肺炎患儿的临床资料进行回顾性分析,并按治疗方式分为两组。其中,对照组单独给予阿奇霉素进行治疗,观察组给予痰热清注射液联合阿奇霉素治疗。观察两组发热、咳嗽、喘息等症状恢复正常时间,比较两种治疗方法下的临床总有效率及不良反应发生率。结果：观察组发热、咳嗽、喘息等症状恢复正常时间明显短于对照组;观察组的临床治疗总有效率为96.36%（53/55）,不良反应发生率为7.27%（4/55）,均显著优于对照组的79.25%（42/53）、24.53%（13/53）,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：痰热清注射液联合阿奇霉素应用于小儿支原体肺炎的治疗,可显著缓解患儿症状,其效果优于单纯阿奇霉素治疗,安全性高,值得在临床上推广。     

2015-2018年杭州地区手足口病流行病学特点及与气象的相关性研究

目的探讨2015-2018年杭州地区手足口病(HFMD)的流行病学特征、病原学特点以及HFDM发病率与气象因素的关系。方法回顾性统计2015-2018年杭州地区HFMD的临床病例进行流行病学特点分析;利用实时荧光定量聚合酶链反应检测病毒核酸;多元线性回归对HFMD阳性率与气象因素进行相关性分析。结果2015-2018年共临床诊断HFMD通用型阳性病例2652例,其中柯萨奇病毒A16型(CA16)8例,阳性率为0.30%,未检出肠道病毒71型(EV71)。HFMD发病时间聚集以5~7月份为高峰,平均年龄(2.45±1.66)岁,男女比例为1.6∶1。多元线性回归分析显示,肠道病毒阳性率与平均气温、相对湿度、降雨均呈正相关(P<0.05);与日照时数无明显相关性(P=0.203)。结论杭州地区2015-2018年HFMD仍以1~3岁散居男童为主,病原学以肠道病毒通用型为主;HFMD发病率与平均气温、相对湿度、降雨量密切相关,与日照时数无明显相关性。     

人猪链球菌病42例

目的 了解江苏省部分地区1998年以来夏秋流行人猪链球菌病的临床特点、诊断、治疗及预后.方法 分析1998至2005年42例人猪链球菌病患者流行病学调查及临床观察结果,并对分离菌株进行生化特征鉴定、流行菌株同源性比较.结果 42例患者均有畏寒、发热、头痛、头晕、全身不适等急性感染性中毒症状;以链球菌中毒性休克综合征或脑膜炎综合征为主要表现;普通型占7.1%,休克型占38.1%,脑膜炎型占54.7%,10例死亡患者均为休克型,余32例经治疗后痊愈.分离病原菌API-Strep鉴定为猪链球菌Ⅱ型,生化反应编码为0641473,鉴定百分率为99.9%,分离自患者和病猪猪链球菌Ⅱ型菌株经基因指纹图分析具有较高同源性.联合应用青霉素、头孢曲松抗感染治疗有效.结论 人猪链球菌病是由猪链球菌Ⅱ型所致人畜共患病,临床表现多样化,休克型来势凶猛,病死率高,普通型、脑膜炎型预后较好,经有效抗感染治疗后多能康复.     

做好基层医疗单位教育训练工作的体会

基层门诊医疗单位,如何跟上现代医学科学的发展,如何适应社会服务的需求,近年已成为基层医疗单位业务训练的重要课题。我们根据门诊医疗的特定条件,结合自身实际,经过多年的实践,摸索出一套基层医疗单位抓医学再教育和进行业务训练的实施方案,使我单位群体素质、服务质量及医疗质量不断提高,收到了较好的社会效益和经济效益。现介绍如下。     

原发性肝癌化疗栓塞术后不良反应观察

本文分析报告６８例各型肝癌化疗栓塞术后不良反应的发生情况：总发生率９７．０％，肝区疼痛６７．６％，发热６０．２％，恶心呕吐４１．２％，腹胀３８．２％，腹水形成２０．６％，黄疸１７．６％，呃逆１３．２％，上消化道出血８．８％，本文讨论了肝癌化疗栓塞的病理生理改变，化疗栓塞术后不良反应发生机理及临床对症处理方法。     

甘露糖结合凝集素清除HBV的相关机制研究

目的 探讨甘露糖结合凝集素(MBL)清除HBV的相关作用机制.方法 应用ELISA法检测甘露糖结合凝集素与HBsAg的结合及补体C2、C4在MBL-HBsAg复合物上的沉积.结果 不同浓度MBL重组蛋白相互作用后,MBL与HBsAg的结合呈剂量依赖性增加,MBL处理组显著高于空白对照组(P< 0.01);而在用BSA替代HBsAg包被的阴性对照组中补体水平未增加.分别用HBSS/Ca2+,HBSS/EDTA和含2 mg/ml聚甘露糖的HBSS/Ca2+溶液稀释MBL(终浓度为10 μg/ml)作用后,与HBSS/Ca2+组相比,HBSS/EDTA组和含2 mg/ml聚甘露糖的HBSS/Ca2+组中MBL与HBsAg的结合显著减少,差异具有统计学意义(P< 0.01).不同浓度MBL重组蛋白作用后,随着MBL与HBsAg的结合增加,MBL-HBsAg复合物上沉积的补体C2、C4水平也显著增加(P< 0.01),而平行对照组中未增加.结论 MBL以Ca2+依赖方式通过糖基识别区直接结合HBsAg,并激活补体系统,从而参与HBV的抑制与清除.