HPV16的新型伪病毒对DNA特异性B细胞的靶向实验研究

目的:构建人乳头状病毒(human papilloma virus,HPV)16型的新型伪病毒,并检测其对DNA特异性B细胞(R4A)的靶向性。方法:利用昆虫杆状病毒表达系统表达病毒蛋白,在体外变性与复性过程中将病毒蛋白包装绿色荧蛋白EGFP表达型质粒,形成伪病毒。透射电镜观察病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的结构,并转染R4A细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测其转染效率。结果:透射电镜观察证实病毒蛋白可自我组装成VLP,在转染R4A细胞后,荧光显微镜和流式细胞仪成功检测到荧光的表达。结论:HPV16的新型伪病毒能成功转染R4A细胞,为系统性红斑狼疮(SLE)的靶向治疗提供了理想的策略。     

靶向DNA特异性B细胞在系统性红斑狼疮中的治疗研究进展

系统性红斑狼疮(SLE)主要是由多克隆自身反应性B细胞介导的自身免疫性疾病,其直接的致病因子是多克隆自身抗体,并以免疫复合物的形式造成多种组织器官损伤。SLE患者普遍性的特点是其血清中存在多种自身抗体。其中,抗双链DNA抗体不仅具有诊断学价值,而且是导致皮肤黏膜、关节和肾脏疾病的主要致病性抗体[1,2]。作为抗双链DNA抗体来源的DNA特     

循环内皮祖细胞及基质细胞衍生因子-1α对短暂性脑缺血发作的病情评估价值

【目的】探讨循环内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)和血装基质细胞衍生因子-1α(Stromal cell-derived factor-1,SDF-1α)对短暂性脑缺血发作(Transient ischemic attack,TIA)的病情风险评估价值。【方法】连续收集发病24 h以内的TIA患者153例,将其分为高危TIA组(83例)和非高危TIA组(70例)。收集患者临床资料,采用流式细胞仪测定循环EPCs数量,采用酶联免疫吸附法测定血浆SDF-1α和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)的浓度。选取15例健康志愿者为正常对照组(Nomal comroUNC),收集其循环EPCs。并按入院时间先后,收集高危TIA组和非高危TIA组前15名患者循环EPCs,MTT法测三组受试者循环EPCs增殖能力,Boyden小室测EPCs迁移能力。【结果】与非高危TIA组比较高危TIA组患者年龄更大,并且患有高血压和糖尿病的患者更多,外周血三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白也更高。而吸烟、体重指数、同型半胱氨酸两组之间的比较无显著性差异(P>0.05)。非高危TIA组循环EPCs、SDF-1α、VEGF均高于高危TIA组(P<0.05)。多因素回归分析结果显示:年龄、高血压、糖尿病、总胆固醇、SDF-1α为高危TIA危险因素,EPCs为高危TIA保护因素。分离培养72 h的EPCs,与NC组比较,高危TIA组和非高危TIA组细胞增殖迁移能力减弱(P<0.05)。与非高危T1A组比较,高危TIA组细胞增殖能力及迁移能力均下降(P<0.05)。【结论】循环EPCs和血浆SDF-1α水平可能作为评估TIA病情程度的指标,循环EPCs增殖能力及迁移能力下降可能导致高危TIA发生。     

苏州健康城市建设中公众参与问题研究

苏州是我国最早建设健康城市的城市之一,取得了令人瞩目的成就.为进一步推动苏州健康城市建设,加强公众参与工作,现在实地调查的基础上,对苏州公众参与健康城市建设问题加以探讨与分析.     

肺癌细胞株A549培养上清诱导CD4+CD25+调节性T细胞频率增高

目的研究肺癌细胞株A549培养上清是否能够诱导外周血CD4 CD25 调节性T细胞(简称:Treg细胞)频率增高。方法选择20例健康人并分离其外周血PBMC,设上清组和对照组,上清组用A549培养上清和用PHA(植物血球凝集素) A549培养上清分别诱导,对照组设空白和单用PHA诱导,用流式细胞仪技术检测两组PBMC不同诱导条件Treg细胞的频率变化。结果用A549培养上清诱导后,上清组Treg细胞的频率与对照组空白孔相比,差异有统计学意义(P<0.05);用PHA A549培养上清诱导后,上清组Treg细胞的频率与对照组PHA孔相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺癌细胞株A549培养上清能够诱导CD4 CD25 调节性T细胞频率增高。     

急性脑卒中患者血清氧化应激指标测定及临床意义

目的:分析急性脑卒中患者氧化应激指标水平变化及其临床意义。方法:采用生物化学方法检测90例急性脑卒中患者(病例组)和50例健康体检者(对照组)血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平和总抗氧化能力(T-AOC),并将病例组进一步分为脑出血组和脑梗死组,比较两组氧化应激指标的差异。结果:病例组血清SOD和T-AOC水平明显降低,MDA水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与脑梗死组相比,脑出血组血清SOD水平显著降低(P<0.05),MDA水平明显升高(P<0.05),T-AOC水平变化无明显差异(P>0.05)。结论:急性脑卒中患者抗氧化能力明显降低,氧化损伤作用增强。     

基于HPV16的新型伪病毒治疗MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的实验研究

目的 构建基于人乳头状病毒（human papilloma virus,HPV）16型的新型伪病毒,探讨对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的治疗作用,为临床治疗系统性红斑狼疮提供实验依据。方法 将12只3月龄MRL/lpr狼疮小鼠随机均分为治疗组和对照组,治疗前后测定尿蛋白、血清尿素氮、肌酐及抗ds-DNA抗体滴度。结果 治疗组小鼠治疗后的尿蛋白、血清尿素氮、肌酐及抗ds-DNA抗体均下降,与治疗前有显著性差异（P〈0.05）,而对照组治疗前后无显著性差异（P〉0.05）,并且治疗组小鼠的平均生存期比对照组明显延长（P〈0.05）。结论 基于人乳头状病毒16型的新型伪病毒可显著改善MRL/lpr小鼠的免疫状况和肾脏功能,提高平均生存期。该研究结果 为临床治疗系统性红斑狼疮提供了新的启示。     

免疫磁珠负性分离纯化小鼠脾脏CD8+ T细胞

目的 探讨小鼠脾脏CD8 T细胞的免疫磁珠负性分选方法,并对分选后所得细胞进行纯度、活力及功能检测.方法 以免疫磁珠负性分选法从小鼠脾脏细胞中分离CD8 T细胞,流式细胞术检测所得细胞的纯度,台盼蓝检测细胞活力并用ConA刺激检测增殖能力. 结果 经过流式细胞仪测定免疫磁珠负性分选后的小鼠脾脏CD8 T细胞纯度达到(91.6±3.6)%,台盼兰染色细胞活力为(94.9±3.2)%,ConA刺激72 h后有(56.3±1.7)%的细胞增殖.结论 免疫磁珠负性分选法能够分选出高纯度的CD8 T细胞,并且不影响分选靶细胞的细胞活力和功能.     

基于survivin的"模拟病毒"瘤苗对结肠癌免疫治疗的作用

背景与目的：结肠癌的免疫治疗在肿瘤的综合治疗中发挥了重要作用。本研究以结肠癌的survivin为靶分子，构建基于survivin的“模拟病毒”瘤苗，并探讨该瘤苗对结肠癌的免疫治疗作用。方法：制备基于survivin的“模拟病毒”瘤苗，用扫描电镜和免疫印迹（Western blot）进行鉴定。酶联免疫斑点试验（Enzyme linked immunospot assay,ELISPOT）和标准^51Cr释放试验分别检测瘤苗所诱导的特异性CTL活性，并对Babl／c小鼠荷瘤模型进行免疫学效应评价。结果：扫描电镜和免疫印迹证实“模拟病毒”瘤苗制备成功，并能有效介导“模拟病毒”瘤苗所携带基因的表达。ELISPOT和标准^51Cr释放试验显示体内有效激发抗原特异性CTL效应，可诱导CTL产生IFN-γ等细胞因子，对结肠癌细胞系CT26有明显的杀伤毒性，杀伤率为56．4％；肿瘤治疗实验证实“模拟病毒”瘤苗能有效抑制肿瘤的生长速度，提高荷瘤动物的生存率，与对照组相比差异显著（P〈0．05）。结论：基于survivin的“模拟病毒”瘤苗能有效激发出特异性CTL应答，并在荷瘤动物模型中有效抑制结肠癌细胞CT26的生长，提高荷瘤动物的生存率，为新型结肠癌治疗性疫苗的设计提供了新思路。