HLA-G5-IgGFc融合蛋白真核表达载体的克隆及鉴定

目的构建人HLA-G5-IgGFc融合蛋白真核表达载体。方法经重组PCR将HLA-G5和IgGFc基因拼接并插入T载体。鉴定后,双酶切得到融合基因并插入真核表达载体pcDNA3.1。结果PCR、限制性内切酶酶切和序列分析表明已构建pcDNA3.1-HLA-G5表达载体。结论成功构建了HLA-G5-IgGFc段融合蛋白真核表达载体。     

限制性液体复苏治疗失血性休克的应用研究

目的探讨液体复苏对创伤失血性休克的救治效果。方法回顾性总结创伤失血性休克早期不同的液体复苏方法对救治效果和凝血功能的影响。结果在243例创伤失血性休克患者中,充分液体复苏组(127例)病死率37·80%(48例),限制液体复苏组(116例)病死率23·28%(27例),两组总病死率及1~2h病死率比较差异均具有统计学意义(P<0·05)。充分液体复苏组血浆凝血酶原时间(PT)长于和存活患者并发症的发生率高于限制性液体复苏组。结论限制性液体复苏能降低创伤失血性休克患者病死率,提高存活率,并降低存活患者并发症的发生率,改善预后。     

紫草素对大鼠佐剂性关节炎滑膜炎症的影响

目的：探讨紫草素对佐剂性关节炎大鼠滑膜炎症的影响。方法：SD大鼠分为4组（每组10只）：正常对照组,佐剂性关节炎组,甲氨蝶呤治疗组,紫草素治疗组。测量大鼠后肢关节肿胀程度,实验第二十一天杀死大鼠,分离右后肢关节滑膜,应用免疫组织化学方法结合病理学图像分析系统,研究滑膜组织中单核-巨噬细胞（CCR5阳性）的浸润情况。结果：甲氨蝶呤和紫草素均能减轻关节肿胀（P〈0.05）。甲氨蝶呤治疗组和紫草素治疗组关节滑膜CCR5阳性细胞明显减少,且紫草素治疗组更低。结论：紫草素减轻大鼠佐剂性关节炎的炎症反应,减轻关节肿胀和减少滑膜组织炎症细胞浸润,为紫草素治疗类风湿关节炎（RA）提供了实验依据。     

芦荟多糖软膏对浅Ⅱ度烫伤小鼠创面组织的促修复作用

目的 探讨芦荟多糖软膏治疗浅Ⅱ度烫伤小鼠的效果及对创面愈合过程中胶原合成、TNF-α水平和ALT活性的影响.方法 147只昆明种小鼠随机分为芦荟多糖软膏治疗组、基质治疗组和京万红治疗组,每组49只,采用将脱毛区置于70℃恒温水浴中6 s的方法制成10%体表面积浅Ⅱ度烫伤模型,伤情经病理切片证实.各组创面分别用芦荟多糖软膏纱布(1ml/cm2)、基质纱布(1 ml/cm2)、京万红纱布(1 ml/cm2)覆盖包扎固定后放回笼中饲养,换药1次/d,观察愈合时间,于伤后12 h,第1,3,5,7和9天,分别处死各组小鼠7只,取创面组织检测含水量、羟脯氨酸含量及TNF-α水平,取血检测ALT活性,另取7只做为正常对照.结果 ①创面愈合时间:芦荟多糖软膏组为(12.1±1.5)d、基质组为(15.2±3.2)d、京万红组为(12.5±1.9)d,芦荟多糖软膏组比基质组明显缩短(P<0.05).②创面含水量:伤后第1,3,5天芦荟多糖软膏组[(76.2±2.3)%、(65.7±3.1)%、(61.2±1.8)%]创面含水量显著低于基质组[(80.7±2.1)%、(70.8±3.1)%、(66.1±1.7)%(P<0.05)],伤后7～9 d,各组均基本恢复到正常水平.③创面羟脯氨酸含量:伤后3,5,7,9 d芦荟多糖软膏组羟脯氨酸含量显著高于基质组和京万红组(P<0.05).④创面组织TNF-α水平:伤后12h,1d TNF-α水平达高峰,随后下降,至伤后第5天仍高于正常对照组(P<0.05).伤后12h、1d,芦荟多糖软膏组和京万红组TNF-α水平明显低于基质组(P<0.05).⑤ALT活性:各组小鼠各时相点血中ALT活性与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05),芦荟多糖软膏组ALT水平与基质组和京万红组比较无显著性差异(P>0.05).结论 芦荟多糖软膏能有效减少烫伤后早期创面组织TNF-α释放,减少渗出和水肿,增强创面胶原合成来促进创面愈合.     

体外诱导扩增大鼠树突状细胞及其特性鉴定

目的: 体外诱导和扩增大鼠骨髓树突状细胞 (DC)的方法, 并进行生物学特性鉴定。方法: 将大鼠骨髓细胞培养 48h后, 去除悬浮细胞, 加入IL- 4和GM- CSF培养 2wk。在光镜和透射电镜下观察培养的DC的形态学特征。应用流式细胞仪检测DC表面分子MHC-Ⅱ类分子、B7 -1、B7- 2的表达水平。将DC与同种异体T细胞混合培养, 采用MTT比色法测定不同细胞密度的DC刺激同种T细胞增殖的能力。结果: 培养的DC胞浆突起大而长, 呈树突状, 具有DC的典型形态。培养 2wk的DC表面MHC -Ⅱ类分子表达的阳性率为 74. 2%, B7- 1、B7 -2分别为 81%、76%。培养的DC具有明显刺激同种异体T细胞增殖的能力。结论: 将大鼠骨髓细胞经贴壁去除悬浮的细胞, 加入IL -4和GM -CSF培养, 可获得足量、较高纯度的DC, 为研究DC的功能奠定了基础。     

兔心肺复苏后全身炎症反应综合征的动态变化

目的 探讨心搏骤停心肺复苏后全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)的变化规律,为临床防治提供理论依据。方法 将日本大耳白兔40只随机（随机数字法）分为假手术组和心搏骤停4,5,6 min组,每组10只。假手术组仅进行麻醉和逆行气管插管、动脉血压监测,不进行气管夹闭窒息;心搏骤停组采用气管夹闭窒息法致使心脏骤停,分别于心搏骤停后4,5,6 min进行复苏,分别在0,24,48,72,96,120 h6个时点观察动物生理参数,取血样测定炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)和白细胞的水平。多时点资料比较采用重复测定方差分析。结果 复苏组心肺复苏后24h均呈现SIRS,TNF-α,CRP的表达明显升高,与心搏骤停前基础值相比差异具有统计学意义(P＜0.01)。心搏骤停4 min复苏组,SIRS水平以24～48 h较高,于复苏后72 h基本消失。心搏骤停5,6 min组,SIRS水平以24 ～72 h较高,持续至复苏后96h。结论心搏骤停4 min,SIRS较轻,容易恢复。心搏骤停5 min以上,SIRS严重。心搏骤停复苏后血清TNF-α是反映SIRS程度的敏感指标,可作为SIRS的辅助诊断指标,并指导临床早期诊断、早期治疗。     

PBL结合早期接触临床的免疫学教学实践

PBL结合早期接触临床理念贯穿免疫学教学全过程。把握联系临床实践恰当的切入点,加强基础与临床知识间的互相渗透与结合。激发学习兴趣,培养学生初步临床思维和主动获取知识能力,有助于创新型人才培养。提高免疫学教学质量。该模式是适应基础医学具体教学内容与要求的教学形式;也是PBL教学在免疫学教学活动中的一种具体体现,切实可行。     

心脏骤停复苏后肾脏功能变化的研究

目的:探讨心脏骤停心肺复苏后肾脏功能的变化规律。方法:将30只兔随机分为假手术组、心脏骤停即刻复苏组和心脏骤停5min组,每组10只。假手术组仅进行麻醉和逆行气管插管、血管穿刺,不进行气管夹闭窒息,心脏骤停组用气管夹闭窒息法致使心跳骤停,分别于心跳骤停后0、5min进行复苏,分别在0、24、48、72h和96h5个时间点取血样,测定血肌酐、胱抑素C的变化,对动物肾脏功能进行评估。结果:即刻复苏组与假手术组比较,各时间点血肌酐轻度升高,但差异无统计学意义;复苏后24h血胱抑素C表达明显增高,然后逐渐降低,复苏后120h血胱抑素C再次升高;各时间点胱抑素C与假手术组比较差异有统计学意义。心跳骤停5min组复苏后各时间点血肌酐、胱抑素C表达明显升高,与假手术组比较差异有统计学意义(P0.01)。心跳骤停5min组血肌酐以复苏后48h最高,然后逐渐降低,而胱抑素C在复苏后24h即显著升高,持续至复苏后120h仍然处于较高水平。结论:心脏骤停心肺复苏后,肾功能损害出现早,持续时间长,在复苏后120h可能再次出现肾功能损害。     

黄柏对大鼠口腔溃疡的作用及其对TNF-α水平的影响

目的：探讨黄柏对大鼠口腔溃疡的治疗效果及其作用机制。方法：采用90％苯酚灼烧的方法制备大鼠口腔溃疡模型,观察不同浓度黄柏的治疗效果。采用ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子（TNF-α）的含量。结果：黄柏可明显缩短口腔溃疡病程。口腔溃疡造模后大鼠血清TNF-α含量明显升高,与正常对照组相比,有显著性差异（P〈0．01）;黄柏治疗后,高、低剂量组大鼠血清TNF-α含量明显降低,尤以高剂量组TNF-α的含量降低明显,低于模型对照组（P〈0．05）。结论：黄柏可降低血清TNF-α含量,减轻炎症损伤,这可能是黄柏治疗口腔溃疡的机制之一。     

浅谈医学免疫学实验内容的改进

实验课教学作为医学教育不可分割的一个重要组成部分,不仅对提高学生学习理论课的兴趣、加深对理论的理解和记忆等有极大的促进作用,而且与培养学生基本操作技能,提高其分析问题和解决问题的能力、树立严谨的科学态度等息息相关。然而,在医学免疫学迅猛发展的今天,免疫学实验教学整体水平却越来越落后于理论教学,更严重滞后于临