基于慢病毒介导RNA干扰技术的人PARP-1基因沉默细胞株构建

目的利用慢病毒介导的RNA干扰技术构建人淋巴母细胞TK6细胞的PARP-1基因沉默细胞株,为后续PARP-1基因功能和表观遗传学调控机制的研究提供有效的工具细胞。方法利用瞬时转染方法筛选最佳干扰效果的shRNA片段,与慢病毒载体pLVX-shRNA1连接,形成重组质粒,DNA测序鉴定后进行病毒包装,转导TK6细胞,利用嘌呤霉素筛选得到稳定表达PARP-1siRNA的PARP-1沉默细胞株,并用定量PCR和Western blotting鉴定所构建的细胞株。结果转染shRNA1、shRNA2、shRNA3、shRNA4细胞的PARP-1相对表达量分别为0.289、0.538、0.375和0.474,故选择shRNA1作为干扰PARP-1基因最佳片段。用0.5μg/ml的嘌呤霉素成功筛选出PARP-1沉默细胞株和空载体对照细胞株,并从mRNA、蛋白质、细胞表型来检测PARP-1基因的干扰效率,抑制效率超过80%。结论成功构建PARP-1的siRNA慢病毒干扰载体,并筛选出PARP-1基因沉默的TK6细胞株,携带shRNA的慢病毒稳定、高效干扰PARP-1基因表达。     

原发性胆汁性胆管炎患者血清核因子相关因子2、血红素加氧酶1的含量与熊去氧胆酸短期应答的相关性

目的观察核因子相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)在原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者治疗前后血清中的水平变化,并探讨二者与熊去氧胆酸(UDCA)短期疗效的相关性。方法纳入山西医科大学第一医院PBC患者及健康对照者各80例。收集PBC患者治疗前后的临床资料及血清样本,采用ELISA法检测样本中Nrf2及HO-1的含量,硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法分别检测丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的含量,并进一步分析UDCA治疗前后PBC患者血清中Nrf2、HO-1的水平变化及临床意义。结果治疗前PBC患者血清Nrf2、HO-1含量分别为(626.07±103.95)U/L、(16.62±5.06)U/L显著高于健康对照者[分别为(164.45±35.12)U/L、(11.74±2.0)U/L],差异均有统计学意义(P均<0.001);与治疗前比较,UDCA治疗后1个月PBC患者血清中Nrf2[(754.30±104.36)U/L]、HO-1[(22.60±5.51)U/L]含量显著增加(P均<0.001),肝功能各项指标也得到改善(P均<0.001)。患者治疗前血清中Nrf2水平(r=0.751,P=0.012)、HO-1水平(r=0.621,P=0.038)与治疗效果均呈正相关。以治疗前Nrf2=586.17 U/L作为阈值,预测的UDCA短期疗效的敏感度为84.6%,特异度为77.5%,曲线下面积为0.824(P<0.05);以治疗前HO-1=14.92 U/L作为阈值,预测的UDCA短期疗效的敏感度为88.5%,特异度为75.0%,曲线下面积为0.861(P<0.05)。结论Nrf2、HO-1在PBC患者疾病过程中发挥重要作用,二者在血清中的基线水平及动态变化同UDCA疗效相关,可以提示PBC患者对UDCA短期治疗的应答情况。     

个案管理模式在慢性心力衰竭患者中的应用效果

目的:观察分析个案管理模式在慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者中的临床应用效果。方法:选取同济大学附属上海市第十人民医院心内科住院患者为研究对象,其中2017年7月至10月的20例患者作为对照组,2017年11月至2018年2月的20例患者作为实验组,其中对照组接受常规护理进行管理,实验组应用个案管理模式管理,比较两组CHF患者管理结果的差异性。结果:干预前两组患者的焦虑自评量表(Self-rating Anxiety Scale,SAS)和抑郁自评量表(Self-rating Depression Scale,SDS)评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。干预后两组患者的SAS,SDS评分均有所降低,与干预前比较,差异有统计学意义(P<0.05);实验组患者干预后SAS,SDS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组患者生活质量评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者干预后住院时间和住院费用的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:个案管理模式能够有效改善CHF患者的生活质量和心理状态,建议临床推广使用。     

改良侧卧位在经输尿管镜碎石手术中的应用

[目的]探讨在传统侧卧位和截石位基础上进行改良的侧卧位在经输尿管镜肾盂及输尿管上段碎石手术中的优势.[方法]将改良侧卧位应用于经输尿管镜输尿管上段和肾盂结石的碎石手术,与其他体位下同类手术在结石清除率、手术时间、手术成本和安全性等方面进行对比.[结果]该体位下结石不易脱离术者视野,不需二次变换体位,明显缩短手术时间和病人住院时间,结石一次性清除率达97%以上.[结论]改良侧卧位可帮助提高手术成功率,减少了病人住院时间和费用,避免术中变换体位带来的人员、时间、材料消耗,有显见的社会效益和经济价值.     

食管癌根治术后非计划性拔除胃管的原因分析及护理对策

<正>非计划性拔管(UEX)是指为患者治疗需要而留置在患者体内的各种导管无意被拔除。其中既有患者未经医护人员同意将插管拔除,也包括医护人员操作不当引起[1]。范河谷等[2]认为:意外脱管的概率:胃管>气管插管>静脉插管>尿管>引流管。食管吻合口瘘是食管癌     

川牛膝的HPLC指纹图谱研究

目的:采用HPLC法构建川牛膝药材的化学指纹图谱。方法:采用Waters2695高效液相色谱仪,色谱柱为Symmetry(C18(5μm,4.6×250mm,Waters公司);流动相为甲醇-水二元梯度洗脱;流速为0.9ml/min;柱温为35℃;检测波长为266nm。结果:测定基地产及市场上流通的样品共18批次,标示了11个共有峰,其指纹图谱相似度均在0.9以上,指纹图谱整体面貌基本一致。结论:该方法简便、快速、准确、重现性好,为川牛膝药材的定性鉴别和药材内在质量评价提供了依据。     

医药分开政策实施的现状及其影响因素——武汉市北湖模式的调查分析

居民看病贵，看病难的原因之一就是医药价格虚高。解决医药价格虚高的政策很多，其中最有效的当属“医药分开”。武汉市江汉区2005年推行了医药分开试点政策，“北湖模式”应运而生。本文主要探讨了北湖模式成功的原因和不足，并提出了相关的建设意见。     

促红细胞生成素与缺血性脑血管病

缺血性脑血管病具有发病率高、病死率高、复发率高等特点，且有发病率逐年增加的趋势。脑血管病是老年人三大主要死因之一，其中缺血性脑血管病占65％。防治缺血性脑血管病的研究已成为社会和医学界关注的重要课题，其中研究最多的是神经保护。较多的体内实验和体外实验发现并证实，促红细胞生成素（EPO）具有神经保护作用，外源性EPO对多种脑损伤模型有脑保护作用。因此，EPO的脑保护作用倍受关注。本文结合近年来的文献，就EPO的分子结构、作用机制、临床应用前景等作一综述。