医学遗传学临床实践性教学改革初探

探索基础医学教学与临床实践相结合的新型教学模式.通过在临床医学专业本科2002、2003级的医学遗传学基础医学课程授课中,有计划进行遗传病和相关知识的讲座,同时组织学生参与本科室再研课题和遗传病家系调查等实践活动.达到了使学生理论与实践相结合,将枯燥的遗传学理论变成生动鲜活的临床病例,极大地激发了医学生的自学能力、协作精神和探索创新能力,达到培养厚基础、重能力和高素质的实用性全科医学生目的.     

重组质粒对大肠杆菌 DH5_α 的转化

抗乙酰胆碱受体单克隆抗体重链可变区的基因与载体质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ构建的重组质粒对受体菌大肠杆菌ＤＨ５α进行了转化，并在选择培养基上筛选出转化子．     

PCR扩增抗乙酰胆碱受体单克隆抗体重链可变区基因的反应条件

应用多聚酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）扩增抗乙酰胆碱受体单抗重链可变区的基因，探讨了ＰＣＲ的反应条件和影响因素。     

一种适合序列分析的快速重组质粒DNA制备法

应用阳离子去垢剂十六烷基三甲基溴化铵沉淀重组质粒ＤＮＡ，得到的ＤＮＡ制剂纯度高，可直接用于双股ＤＮＡ序列分析，本法省时，ＤＮＡ序列分析重复性好。     

延边朝鲜族人群Ⅰ型胶原蛋白A2基因MspI多态性位点研究

[目的 ]了解中国朝鲜族人群的Ⅰ型胶原蛋白A 2基因MspI多态性位点的存在和等位基因频率 ,并与其它地区人群进行比较 .[方法 ]按酚 氯抽提法提取人类基因组DNA ,采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性方法对Ⅰ型胶原蛋白A 2基因MspI多态性位点进行检测 .[结果 ]12 0名个体中 ,无酶切位点的纯合个体为 89例 ,P-P-基因型频率为 74 2 % ;有酶切位点的杂合个体为 2 2例 ,P+ P-基因型频率为 18 3% ;有酶切位点的纯合个体为 9例 ,P+ P+ 基因型频率为 7 5 % ;2 4 0个等位基因中MspI酶切位点基因P+ 的频率为 16 7% .[结论 ]延边朝鲜族人群Ⅰ型胶原蛋白A 2基因存在多态性 ,Ⅰ型胶原蛋白A 2基因MspI多态性分布与其它地区人群的分布有所不同 ,可以作为朝鲜族的一个遗传标记 .     

乙酰胆碱受体单克隆抗体重链可变区PCR产物克隆的条件

聚合酶链反应扩增的乙酰胆碱受体单克隆抗体重链可变区基因经ＥｃｏＲ１和ＢａｍＨ１双酶切割后，与载体质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ连接，并经转化大肠杆菌ＤＨ５α而扩增，扩增后的重组质粒经酶切证实含有乙酰胆碱受体抗体的基因。为核苷酸序列分析准备了材料。     

先天性眼球震颤伴头震颤及感音性神经性耳聋一大家系

先证者(Ⅲ19)男,46岁.出生时发现患儿双眼球左右摆动,头不时也左右震颤;目前手有时也震颤,紧张时上述震颤加重.在16～17岁时发现视力下降,有进行性严重趋势;10年前发现听力下降;外观观察无贫血貌,行走正常,劳动能力和生活能力均正常.     

免疫印迹法测定乙酰胆碱受体单克隆抗体的精细特异性

为探讨重症肌无力的发病机理和乙酰胆碱受体抗体特异性与致病性的关系，用免疫印迹法测定了２株乙酰胆碱受体单克隆抗体的精细特异性．这２株抗体均能与硝酸纤维素膜上的乙酰胆碱受体γ和δ带结合，表明这２株抗体均不是抗致病性抗体识别的α亚单位主要免疫原区的抗体．这２株抗体对健康大鼠致病性的测定以及可变区的序列分析，将有助于揭示抗体的分子结构与致病性的关系     

PGC-1基因Thr394Thr多态性与Ⅱ型糖尿病关系的研究

[目的]探讨延边地区朝鲜族及汉族人群PGC-1基因Thr 394 Thr多态性与Ⅱ型糖尿病的相关性.[方法]采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法对104例糖耐量正常者和113例Ⅱ型糖尿病患者的PGC-1基因Thr 394 Thr多态性基因型进行对照研究.[结果]朝鲜族和汉族正常人PGC-1基因Thr 394 Thr多态性的A等位基因频率分别为23.3%,20.7%;糖耐量正常组及Ⅱ型糖尿病组人群的PGC-1基因Thr 394 Thr多态性的A等位基因频率均为22.1%.[结论]延边地区朝鲜族和汉族人群PGC-1基因Thr 394 Thr多态性间无显著性差异;PGC-1基因Thr 394 Thr多态性与Ⅱ型糖尿病发病无相关性.     

人源性抗乙酰胆碱受体自身抗体的构建及特异性鉴定

目的 用人抗乙酰胆碱受体(AchR)自身抗体的抗原结合片段(Fab)构建完整的抗人AchR自身抗体,为重症肌无力(MG)的实验研究提供人源性抗体材料. 方法 应用PCR技术从分离自MG患者胸腺的Fab637扩增重链Fd片段基因和轻链基因,并克隆至含有免疫球蛋白(IgG1)基因的载体pIgG1上,构建人源性抗AchR自身抗体哺乳类细胞表达的重组载体pIgG1-637.将pIgG1-637转染CHO-k1细胞,细胞培养上清液经斑点杂交试验检测抗体的表达,以放射免疫测定法测定表达的抗体与特异性人AchR结合的活性.结果 细胞培养24 h后能检测到抗体的分泌,表达的抗体能特异性地与抗原结合,且结合活性很高.结论 已成功地构建了具有与抗原特异性结合的人源性IgG1类抗人AchR自身抗体IgG1-637.