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人毛乳头细胞凝集性生长差异表达基因cDNA文库的构建 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 构建毛乳头细胞凝集性生长状态下差异表达基因的消减cDNA文库。方法 分别提取凝集性生长和非凝集性生长状态下毛乳头细胞中的总RNA,应用SMART cDNA合成技术和抑制性消减杂交技术分离毛乳头细胞凝集性生长状态下差异表达基因的cDNA片段并建立消减cDNA文库;利用PCR对随机挑选的100个白色菌落进行插入片段的验证,对其中证实有插入片段的30个克隆进行cDNA斑点杂交验证。结果 所构建的消减cDNA文库扩增后得到320个阳性克隆,随机挑选的100个阳性克隆中95%的均有长度在100—600bp的插入片段,cDNA斑点杂交验证显示27个(90.0%)克隆为阳性。结论 结合SMART cDNA合成技术,应用抑制性消减杂交成功地构建了毛乳头细胞凝集性生长差异表达基因消减cDNA文库,为进一步筛选和克隆毛乳头细胞凝集性生长相关基因奠定了基础。 相似文献
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报告2例隆突性皮肤纤维肉瘤。例1男,37岁,左侧肩部红色斑块20年;例2女,64岁,左侧腹股沟包块7年。皮损组织病理均示真皮全层大量的梭形肿瘤细胞,排列成席纹状或漩涡状,部分肿瘤细胞核大、深染,部分核分裂。均诊断为:隆突性皮肤纤维肉瘤。 相似文献
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UVB对角质形成细胞表达内皮素-1的调节作用 总被引:2,自引:0,他引:2
UV照射可引起黑素细胞 ( MC )的增殖及黑素产生增多,出现皮肤色素沉着。最近的研究表明角质形成细胞( KC)分泌的内皮素- 1( ET 1)对 MC具有明显的调节作用 [1]。本研究在基因水平及蛋白水平观察 UVB对培养 KC合成 ET- 1的调节作用; 将有助于阐明 UVB是否通过对 KC分泌 ET 1的调节而对黑素细胞进行间接调控。 一、材料和方法 1.KC培养:方法见文献 [2],采用原代细胞培养至 70%~ 80%融合时进行实验。 2.cDNA探针的制备:重组有 ET 1 cDNA的 pBOB质粒由瑞典 Aifred Wav Hahn惠赠。具体探针制备步骤见文献 … 相似文献
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