应用环磷酰胺构建C57BL/6J小鼠免疫抑制模型

背景：在免疫增强剂的研究中,常用到免疫抑制模型,如何建立免疫抑制模型成为免疫增强剂作用评价的关键。目的：应用环磷酰胺构建C57BL/6J小鼠免疫抑制模型。方法：将小鼠随机分为正常对照组、环磷酰胺50mg/kg5d组,环磷酰胺80mg/kg3d组,环磷酰胺80mg/kg5d组,环磷酰胺100mg/kg5d组和环磷酰胺100mg/kg隔天给药组。正常对照组小鼠腹腔注射生理盐水0.1mL,连续5d。环磷酰胺50mg/kg5d组,环磷酰胺80mg/kg3d组,环磷酰胺80mg/kg5d组和环磷酰胺100mg/kg5d组小鼠分别以环磷酰胺50,80,80,100mg/kg腹腔注射连续5,3,5,5d。环磷酰胺100mg/kg隔天给药组小鼠腹腔注射100mg/kg环磷酰胺,隔天1次,共注射3次。结果与结论：与正常对照组比较,腹腔注射环磷酰胺可导致小鼠外周血中CD3＋T,CD3＋CD4＋T及CD3＋CD8＋T细胞明显下降（P〈0.05）;谷丙转氨酶（除环磷酰胺50mg/kg5d、80mg/kg3d组）、谷草转氨酶、尿素显著升高（P〈0.05）,其中环磷酰胺80mg/kg5d组、环磷酰胺100mg/kg5d组和环磷酰胺100mg/kg隔天给药组对肝肾功能的影响更为明显。提示腹腔注射环磷酰胺可建立CD3＋T,CD3＋CD4＋T及CD3＋CD8＋T细胞明显下降的免疫抑制模型,其中以环磷酰胺50mg/kg5d和80mg/kg3d方式对肝肾功能的损伤较小。     

食管癌淋巴结微转移的研究

目的探讨食管癌术后常规病理检查无转移性淋巴结微转移的发生率、类型及临床意义。方法选择食管癌术后≥3年的患者,常规病理检查淋巴结转移阴性患者68例,采用抗角蛋白抗体免疫组化染色查找癌细胞,免疫组化染色阳性癌细胞每个视野不超过5个就确定为微转移。结果16例患者22个淋巴结检出微转移1.8%(22/1246)存在微转移的患者术后复发率为50.0%(8/16),不存在微转移的复发率为11.5%(6/52),两者差异有统计学意义,P=0.008;存在微转移的患者术后生存率低于无微转移的患者,P<0.05。结论检测淋巴结微转移对于常规病理检查阴性患者的治疗及预后具有重要的临床意义。     

p53和 bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达

目的：研究p53,bcl-2基因在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达，探讨p53,bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡中的作用。方法：应用免疫组织化学方法，对30例老年性白内障及10例正常透明晶状体上皮细胞进行p53,bcl-2基因蛋白表达的检测，计算p53,bcl-2基因蛋白表达阳性细胞百分率，结果：p53在正常晶状体上皮细胞中无蛋白表达，在老年性白内障晶状体上皮细胞中蛋白表达率为16．9％－19．1％，bcl-2在2组中均无蛋白表达，结论：p53在老年性白内障晶状体上皮细胞中蛋白高表达，p53可能促进了老年性白内障中晶状体上皮细胞的凋亡。     

氯丙嗪对耐药细胞系K562／AO2多药耐药逆转作用的研究

目的：研究氯丙嗪对耐药细胞系K562/AO2多药耐药逆转作用。方法：应用免疫组化观察K562／AO2细胞系的耐药蛋白表达情况，用MTT法测定不同浓度的氯丙嗪对K562/AO2细胞系耐药逆转作用，用流式细胞术测定不同浓度的氯丙嗪与K562／AO2细胞作用后细胞内罗丹明的蓄积情况，用半定量RT—PCR法测定氯丙嗪对K562／AO2细胞多药耐药基因(mdr-1)mRNA表达的影响。结果：K562／AO2细胞不但P-gP表达阳性，而且肺耐药相关蛋白(lung resistanceelated protein．LRP)表达也阳性；氯丙嗪能增强多柔比星对K562／AO2细胞的杀伤作用(单用ADM组、氯丙嗪0．75μg／mL+ADM组、氯丙嗪1．5μg／mL+ADM组和氯丙嗪3μg／mL+ADM组对K562／AO2的抑制率分别为5．2％、25．9％、39．1％和74．8％)；增加K562／AO2细胞内罗丹明的蓄积(对照组、氯丙嗪0．75μg／mL组、氯丙嗪1．5μg/mL组和氯丙嗪3μg／mL组细胞内的荧光强度的均值分别为1．87、10．28、48．75和65．63)；对K562／AO2细胞mdr-1 mRNA表达无明显影响(对照组mdr-1和β-actin的面积比为0．41，氯丙嗪组为0．42)。结论：氯丙嗪对K562／AO2细胞的耐药有较强的逆转作用，并呈剂量依赖关系。