CRKL活性与白血病细胞多药耐药的关系

 目的　探讨CRKL活性在白血病细胞多药耐药中的作用,发现与耐药相关的新因素。方法　应用流式细胞术比较CRKL在K562、HL-60及其耐药细胞中的活性变化;对敏感细胞用柔红霉素处理后,检测CRKL活性与化疗作用时间的关系以及撤药后CRKL活性的改变。结果　与K562、HL-60敏感细胞比较,在K562、HL-60耐药细胞株中,CRKL的磷酸化水平明显升高;在用柔红霉素处理72 h后,K562和HL-60细胞CRKL的磷酸化水平与化疗药物作用呈时间依赖性,未发现Jurkat细胞CRKL磷酸化水平的改变。结论　CRKL活性变化与白血病细胞多药耐药的形成有关,是白血病细胞多药耐药的又一个新的影响因素。     

外周血CK-20mRNA的表达与大肠癌诊断、分期及预后的研究

引言我们利用RT-PCR技术检测了126例大肠癌患者外周血单个核细胞CK-20mRNA的表达情况,研究CK-20mRNA的表达在大肠癌中的临床意义。1资料与方法1.1研究对象1.1.1大肠癌组经手术后病理证实的大肠癌患者126例,男75例,女51例,年龄38~73岁,平均57.4岁;按Duke’s分期:A期23例、B期34例、C期44例、D期25例。术前采集外周血。1.1.2正常对照组健康志愿者25例,男17例,女8例,年龄29~58岁,平均46.5岁。1.1.3细胞株组①HT29细胞株(结肠癌细胞株);②H740细胞株(肝癌细胞株);③2HTB-133(乳腺癌细胞株);④TPG5(肺癌细胞株);⑤K562细胞株(红白细胞病细胞株);⑥SGC7901(胃癌细胞株),常规细胞培养。1.1.4其他癌症组胃癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、食管癌各10例。1.2方法1.2.1样品的采集和保存(1)血标本的采集采取大肠癌患者及正常献血员外周静脉血10ml,放入20u/ml肝素处理的防凝试管内,分离出单个核细胞,放入-80℃冰箱保存备测。(2)实体瘤标本的来源大肠癌组织及其他癌症取自大肠癌和其他癌症病人手术后癌组织。标本30m...     

正常足月儿脐血血浆中GM—CSF和IL—3含量测定

目的 探讨脐血血浆中造血生长刺激因子的含量,以便了解胎儿造血的特点,并且可为临床应用脐血提供可靠的实验依据。方法 应用ＥＬＩＳＡ法对６４例正常足月儿脐血血浆中ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３进行了测定。结果 脐血血浆中ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３的含量分别是：１１８．７１±７４．５６ｐｇ／ｍｌ和７４．８９±４６．３２ｐｇ／ｍｌ,与正常组比较Ｐ〈０．０１。结论 脐血血浆中ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３的含量明显高于正常成人     

氯丙嗪对耐药细胞系K562／AO2多药耐药逆转作用的研究

目的：研究氯丙嗪对耐药细胞系K562/AO2多药耐药逆转作用。方法：应用免疫组化观察K562／AO2细胞系的耐药蛋白表达情况，用MTT法测定不同浓度的氯丙嗪对K562/AO2细胞系耐药逆转作用，用流式细胞术测定不同浓度的氯丙嗪与K562／AO2细胞作用后细胞内罗丹明的蓄积情况，用半定量RT—PCR法测定氯丙嗪对K562／AO2细胞多药耐药基因(mdr-1)mRNA表达的影响。结果：K562／AO2细胞不但P-gP表达阳性，而且肺耐药相关蛋白(lung resistanceelated protein．LRP)表达也阳性；氯丙嗪能增强多柔比星对K562／AO2细胞的杀伤作用(单用ADM组、氯丙嗪0．75μg／mL+ADM组、氯丙嗪1．5μg／mL+ADM组和氯丙嗪3μg／mL+ADM组对K562／AO2的抑制率分别为5．2％、25．9％、39．1％和74．8％)；增加K562／AO2细胞内罗丹明的蓄积(对照组、氯丙嗪0．75μg／mL组、氯丙嗪1．5μg/mL组和氯丙嗪3μg／mL组细胞内的荧光强度的均值分别为1．87、10．28、48．75和65．63)；对K562／AO2细胞mdr-1 mRNA表达无明显影响(对照组mdr-1和β-actin的面积比为0．41，氯丙嗪组为0．42)。结论：氯丙嗪对K562／AO2细胞的耐药有较强的逆转作用，并呈剂量依赖关系。     

SLE患者外周血中CD23+、CD19+细胞表达状况的研究

目的研究外周血中CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞的异常表达在SLE发病及病情进展中的意义。方法应用流式细胞术检测活动期与稳定期SLE患者外周血中CD19 、CD23 及CD23 /CD19 细胞的表达率;同时应用流式直方图分析细胞表面CD19,CD23分子的表达密度。结果活动期SLE患者组CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞表达率均高于稳定期SLE患者组及正常对照组,差异均有显著性意义;稳定期SLE患者组CD23 及CD23 /CD19 与正常对照组比较无显著性差异;稳定期SLE患者组CD19 细胞表达率高于正常对照组,但差异无显著性意义。且CD19 、CD23 及CD23 /CD19 细胞的表达率与病情积分及ANA均成正相关。活动期SLE患者组CD23的平均荧光强度与对照组及稳定期SLE组比较均有显著性差异;活动期SLE患者组CD19的平均荧光强度与对照组、稳定期SLE组比较及稳定期SLE患者组CD19、CD23的平均荧光强度与对照组比较均无显著性差异。结论外周血中CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞的异常表达在SLE发病机理及病情进展中起重要作用,检测CD23 、CD19 及CD23 /CD19 细胞的表达情况对SLE病情监控具有一定的应用价值。     

涎腺腺癌中VEGF表达与微血管密度及预后的关系

目的　研究微血管密度 (MVD)和血管内皮生长因子 (VEGF)在涎腺腺癌中的表达 ,探讨其与预后关系。方法　采用SABC免疫组织化学染色方法检测 4 3例涎腺腺癌中MVD和VEGF的表达 ,采用SPSS软件行统计分析。结果　 6 5 .12 %的涎腺腺癌组织呈VEGF阳性表达。VEGF表达阳性的涎腺腺癌组织MVD显著高于VEGF表达阴性者 (P <0 .0 5 )。VEGF表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关 ,而与肿瘤的临床分期无关。VEGF阴性表达的病人术后 5年生存率较阳性表达者高。结论　涎腺腺癌组织VEGF表达与微血管密度有明显的相关性 ,是涎腺腺癌主要的新生血管诱导因子之一 ,VEGF可做为涎腺腺癌预后的一个有效指标。     

成年大鼠嗅球成鞘细胞的分离培养及形态学研究

目的：探讨大鼠嗅球成鞘细胞(olfactory ensheathing cells OECs)的分离培养方法并观察其形态。方法：采用差时贴壁和阿糖胞苷(Ara—c)抑制相结合的方法培养嗅鞘细胞,并在不同阶段进行观察和行NGFRp75和GFAP免疫组化染色鉴定。结果：成功培养出高纯度的嗅鞘细胞,胞体呈梭形、多突起形及油煎蛋形3种类型,突起细长编织成网状。结论：差时贴壁和Ara—c抑制相结合的纯化培养方法是一种简单而又有实效的嗅鞘细胞培养方法。     

改良MTT法检测胃肠癌体外化疗药物敏感性

目的 探讨胃肠癌对常用化疗药物的敏感性。方法 应用改良MTT法进行了化疗药物的体外药敏试验。结果 不同病例对同一药物的敏感性不同，有其各自的耐药谱。结论 根据体外药敏试验实行个体化用药方案，可提高临床化疗疗效。     

食管癌淋巴结微转移的研究

目的探讨食管癌术后常规病理检查无转移性淋巴结微转移的发生率、类型及临床意义。方法选择食管癌术后≥3年的患者,常规病理检查淋巴结转移阴性患者68例,采用抗角蛋白抗体免疫组化染色查找癌细胞,免疫组化染色阳性癌细胞每个视野不超过5个就确定为微转移。结果16例患者22个淋巴结检出微转移1.8%(22/1246)存在微转移的患者术后复发率为50.0%(8/16),不存在微转移的复发率为11.5%(6/52),两者差异有统计学意义,P=0.008;存在微转移的患者术后生存率低于无微转移的患者,P<0.05。结论检测淋巴结微转移对于常规病理检查阴性患者的治疗及预后具有重要的临床意义。     

p53和 bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达

目的：研究p53,bcl-2基因在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达，探讨p53,bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡中的作用。方法：应用免疫组织化学方法，对30例老年性白内障及10例正常透明晶状体上皮细胞进行p53,bcl-2基因蛋白表达的检测，计算p53,bcl-2基因蛋白表达阳性细胞百分率，结果：p53在正常晶状体上皮细胞中无蛋白表达，在老年性白内障晶状体上皮细胞中蛋白表达率为16．9％－19．1％，bcl-2在2组中均无蛋白表达，结论：p53在老年性白内障晶状体上皮细胞中蛋白高表达，p53可能促进了老年性白内障中晶状体上皮细胞的凋亡。