糖基化终末产物对体外诱导大鼠视网膜微血管内皮细胞血管形成的影响

目的 应用Matrigel建立大鼠视网膜微血管内皮细胞血管形成的体外培养体系,研究糖基化终末产物对诱导视网膜微血管内皮细胞血管形成的影响,从而探讨糖基化终末产物在糖尿病微血管病血管新生中的作用.方法 体外培养视网膜微血管内皮细胞,制备糖基化白蛋白.在Matrigel上建立血管形成的体外培养体系,实验分浓度效应组和时间效应组,并进行CD34免疫细胞化学染色.采用光镜下计数管腔数及计算机图像分析对结果进行测定和分析.结果 经分离培养的视网膜微血管内皮细胞在Matrigel上培养形成管腔样结构.糖基化白蛋白(糖基化终末产物)作用于培养的视网膜微血管内皮细胞后,可见管腔形成数目增加,且在一定范围内呈时间和剂量依赖效应(P<0.01).结论 糖基化终末产物可以促进Matrigel体外诱导视网膜微血管内皮细胞的血管形成.     

影响老年危重病念珠菌血症患者预后的多因素分析

Objective To evaluate the prognostic factors of elderly patients with noscomial Candidemia in intensive care unit. Methods A retrospective study was carried out in 75 elderly patients with noscomial Candidemia from 2001 to 2008. Multivariate logistic regression analysis was performed to find the correlations of prognosis with clinical and biochemical parameters. Results A total of 75 Candida strains were isolated from blood. The proportion of non-albicans species reached to 70.7%. Fluconazole-resistant candidiasis was increased. Overall mortality rate was 48.0%.Multivariate logistic regression analysis showed that septic shock, comorbid bacteremia, higher serum creatinine and sequential organ failure assessment (SOFA) score more than 10 were independent predictors for in-hospital mortality (Ward=6.34, 5.15, 8.04, 6.82, all P＞0.05). Conclusions Noscomical Candidemia in elderly critical illness patients leads a high mortality, the proportion of nonalbicans species and fluconazole-resistant candidiasis increase. The blood culture and drug sensitive test should be performed routinely to provide proper evidence for antifungal therapy. Monitoring the high risk factors, effective and reasonable therapeutics are the guarantee for reducing the mortality induced by Candidemia.     

P13K／Akt参与内皮祖细胞分化的体外观察

背景：内皮祖细胞分化为成熟内皮细胞的分子机制尚不清楚，要通过包括P13K／Akt信号通路在内的多个信号通路调节细胞内部多种基因的表达来完成。目的：分析P13K／Akt信号传导通路在内皮祖细胞分化中的作用。设计、时间及地点：分组对照体外实验，于2007—09／2008—03在中国医科大学附属盛京医院病理实验室完成。材料：4-6周龄Wistar大鼠，雌雄不限。方法：采用密度梯度离心法从大鼠骨髓分离内皮祖细胞，经差速取二次贴壁细胞接种于培养瓶内。收集培养5d的内皮祖细胞，用激光共聚焦显微镜鉴定，AC133和vWF双染阳性细胞为正在分化的内皮祖细胞。主要观察指标：应用Western blot和反转录一聚合酶链反应检测培养0，3，7，10，14d的内皮祖细胞中AC133，vWF，P13K，Akt蛋白和mRNA表达水平。结果：经Western blot和反转录-聚合酶链反应检测，AC133在培养0d表达最强，3d有弱表达，7，10，14d几乎没有表达（P〈0．05）；vWF在培养过程中表达强度没有明显变化（P〉0．05）；P13K和Akt在培养0d表达最强，3d表达稍弱，随着培养时间的延长，表达逐渐减弱。P13K／Akt与AC133表达趋势一致。结论：在内皮祖细胞分化为内皮细胞过程中，可能有信号传导通路P13K／Akt的参与。     

皮下浅刺法止痛效果观察

皮下浅刺法止痛效果观察秦廷武（邯郸市陶瓷公司医院０５６２００）杨向红（邯郸市中医院内三科０５６００１）在《灵枢·官针篇》中毛刺、扬刺、半刺等针法的启发下，运用皮下浅刺法治疗各种原因引起的疼痛，如内脏绞痛、局部肌痛、神经性头痛等取得了良好疗效。现将此法...     

血管内皮细胞的活化或损伤诱导平滑肌细胞的增生和凋亡

一、材料与方法1.细胞培养 :采用改进的Ｊａｆｆｅ氏培养法 ,培养人脐带静脉内皮细胞。采用贴块法培养人脐动脉平滑肌细胞并传代。培养液均为含 2 0 %胎牛血清的ＤＭＥＭ培养液。2 .内皮细胞的脂质过氧化引发实验 :将培养达融合状态的内皮细胞分组 ,分别加入含不同浓度氢过氧化枯烯的培养液孵育后 ,测定脂质过氧化物的代谢终产物丙二醛 (ＭＤＡ)的含量。3.培养液中乳酸脱氢酶 (ＬＤＨ)活性的测定 :ＬＤＨ是细胞内的可溶性酶 ,当细胞膜被破坏时可漏出细胞外 ,可作为细胞损伤的早期检测指标。采取内皮细胞培养液 ,以Ｓｉｇｍａ公司的ＬＤＨ测…     

脂质过氧化损伤的内皮细胞对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的研究脂质过氧化损伤的内皮细胞(endothelial cell,EC)对血管平滑肌细胞(vessel smooth musclecells,VSMC)凋亡的影响.方法以氢过氧化枯烯为诱发剂引发培养的血管EC的脂质过氧化反应,将制备的内皮细胞条件培养液(endothelial cell conditional medium,     

骨肉瘤组织中Survivin基因表达及其与细胞周期蛋白D1表达的关系

目的 :探讨骨肉瘤中抗凋亡基因Survivin的表达状态及其与细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达的关系。方法 :采用原位杂交、免疫组织化学技术、DNA原位末端标记 (TUNEL)法检测 3 8例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、5例正常骨组织中SurvivinmRNA表达及骨肉瘤组织中cyclinD1表达和细胞凋亡情况 ,比较SurvivinmRNA表达与骨肉瘤临床病理参数及cyclinD1表达的关系。结果 :SurvivinmRNA在正常骨和骨软骨瘤组织无明显表达 ,但显著表达于骨肉瘤中 65 8% ( 2 5 /3 8) ,其表达率与骨肉瘤组织学分级无关 ,与WHO分型及转移有关 ,P <0 0 5 ;骨肉瘤细胞凋亡指数(AI)均值为 8 3 % ( 0～ 17% ) ,Survivin阴性组AI值显著高于阳性组 ,P <0 0 1;骨肉瘤中cyclinD1过度表达 ( 71 1% ,2 7/3 8) ,其与Survivin表达正相关 ,rs=0 3 70 ,P <0 0 5。结论 :Survivin选择性表达于骨肉瘤组织 ,通过抑制细胞凋亡 ,并与cyclinD1协同作用参与骨肉瘤的发生发展 ,Sur vivin可能是评价骨肉瘤预后的重要参考指标     

胫腓骨骨折胫骨交锁髓内钉内固定的手术配合

近年来国内外流行胫骨交锁髓内钉,较其它髓内固定方式优点是能更好地控制骨折端的旋转、短缩、分离、也可进行微创闭合复位内固定,术后能早期活动加速骨折愈合减少“骨折病”。由于该手术的操作步骤严格,所需器械较多且价格昂贵,因此配合护士必须全面了解手术过程,熟悉各种器械的性能及用途,了解术中可能出现的并发症,确保手术的顺利完成。1临床资料本组病例中胫腓骨骨折35例,单纯胫骨骨折2例,合并其他部位骨折10例;男41例,女6例;年龄19～62岁,平均36.9岁,其中闭合复位32例,开放复位15例。2手术配合2.1术前的配合2.1.1术前访视术前1d器械、…     

TNP-470与IL-2对肺癌细胞诱导的血管内皮细胞增殖的抑制作用

目的：应用体外细胞培养法,探讨TNP-470对肺癌细胞诱导的血管内皮细胞增殖的影响及其机制,以及TNP-470与IL-2联合用药的效应。方法：用免疫细胞化学方法检测血管内皮细胞PCNA、VEGFR-2／Flk-1、FGFR的表达,采用阳性细胞计数法及图像分析法对结果进行分析：用流式细胞分析仪对血管内皮细胞的细胞周期进行分析。结果：TNP-470以剂量依赖方式抑制肺癌细胞条件培养液或细胞粉碎液诱导的血管内皮细胞PCNA、Flk-1、FGFR的表达（与对照组比较P〈0．05）。TNP-470与IL-2均可抑制血管内皮细胞进入S期．但两者联合应用时,其效应与各自单独应用无差异（P〉0．05）。结论：TNP-470通过降低内皮细胞表面Flk-1、FGFR的表达,抑制内皮细胞进入S期,使内皮细胞阻滞于G0／G1期途径,发挥其抑制血管内皮细胞增殖的效应：而IL-2则通过对内皮细胞的毒性或诱导凋亡作用而发挥其抑制内皮细胞增殖的效应．     

Src激酶在胃癌细胞来源的exosome促进肿瘤细胞增殖中的作用

目的:研究胃癌细胞来源的外泌体(exosome)对肿瘤细胞增殖的影响,初步探讨Src蛋白激酶在此过程中的作用.方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度超速离心的方法从胃癌SGC7901细胞的上清液中分离出胃癌细胞来源的exosome.透射电子显微镜下观察exosome形态.MTT法检测细胞增殖能力,Western blot检测...