自身免疫性疾病噬菌体抗体库的构建和初步鉴定

目的构建系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）、强直性脊柱炎、干燥综合症（SS）、原发性胆汁性肝硬化（PBC）等自身免疫性疾病的噬菌体抗体库。方法从多例确诊的高滴度自身免疫病患者外周血淋巴细胞中抽提总RNA,用RT—PCR方法分别扩增免疫球蛋白分子轻链κ、λ基因及重链Fd基因。经SacI和XbaI限制性双酶切后,在T4连接酶的作用下,将轻链基因片段克隆入同样双酶切的pComb3Hss载体中以构建轻链文库,随后将重链Fd段PCR产物经XhoI和SpeI双酶切后载入同样处理的κ/λpComb3Hss载体,然后将重组质粒κ/λ—Fd-pComb3Hss转化大肠杆菌XL1-Blue。用辅助噬菌体M13K07感染XL1-Blue,则可在噬菌体表面表达出随机的重组抗体库。结果提取的淋巴细胞总RNA及合成的cDNA质量好,PCR扩增了长度为660bp的轻链κ、λ基因及重链Fd基因,成功构建了库容为4×10^4的轻链抗体库和库容为6×10^4的Fab片段噬菌体抗体库,酶切及PCR鉴定均正确无误。结论成功构建了自身免疫性疾病的噬菌体抗体库,为进-步筛选出高亲和力抗体打下了基础。     

自身免疫性疾病发病机制研究进展

自身免疫性疾病(AID)是指机体免疫系统对自身成分的免疫耐受被打破,引起自身组织损伤的疾病,其病因和发病机制至今不明.在此从遗传、环境、免疫调节和受损靶细胞的作用等方面对AID最新发病机制研究进展进行阐述,以进一步加深对AID发病机制的认识,为AID诊断和治疗提供新的思路.     

原发性胆汁性胆管炎患者血清游离TAM受体家族分子的水平及临床意义

目的探讨血清游离TAM受体家族分子在原发性胆汁性胆管炎(PBC)中的水平变化及其临床意义。方法收集PBC患者64例和健康人对照57例。用ELISA法检测血清Gas6、蛋白S、s Tyro-3、s Axl和s Mer的水平,在PBC患者和健康人对照间进行结果比较,在PBC中分析这些分子与肝功能生化指标的相关性。结果 PBC患者血清蛋白S水平明显低于健康人对照(P0.001),而s Mer和s Tyro-3水平明显高于健康人对照(P0.001),Gas6和s Axl水平在两组之间差异无统计学意义。在PBC患者中,血清s Mer和s Tyro-3与碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、总胆汁酸(TBA)之间呈正相关,相关性有统计学意义(P0.05),但Gas6、蛋白S和s Axl与肝功能生化指标之间无相关性。结论血清蛋白S、s Mer和s Tyro-3水平在PBC中明显改变,s Mer和s Tyro-3可能反映PBC病情,而血清Gas6和s Axl在PBC中无明显改变。     

强直性脊柱炎和类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中Toll样受体4基因的表达及临床意义

目的探讨Toll样受体4(TLR4)mRNA在强直性脊柱炎(AS)、类风湿关节炎(RA)患者以及健康个体外周血单个核细胞(PBMC)中的表达差异及其临床意义。方法应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测2006年3月至10月第二军医大学附属长征医院60例AS患者、20例RA患者及30例健康对照PBMC中TLR4 mRNA的表达水平;应用ESR自动化分析仪和特定蛋白电泳仪分别测定红细胞沉降率(ESR)和血浆C-反应蛋白(CRP)。结果AS和RA患者PBMCTLR4 mRNA的表达水平明显高于对照组,但两疾病组之间差异并无显著性意义;人类白细胞抗原(HLA-B27)阳性和阴性AS患者均显著高于健康对照组,且HLA-B27阳性AS患者显著高于RA组,但两组AS患者以及HLA-B27阴性AS与RA患者之间,TLR4 mRNA差异无显著性意义;在HLA-B27阳性AS患者中,TLR4 mRNA的表达与ESR及CRP呈显著相关性,但在HLA-B27阴性AS患者中则无这种相关性。在RA患者中,TLR4 mRNA与CRP呈显著相关性。结论AS和RA患者PBMCTLR4 mRNA的表达均上调,AS患者上调与HLA-B27阳性与否无关,但HLA-B27阳性AS患者比RA上调更明显,且HLA-B27抗原影响AS患者TLR4 mRNA与ESR及CRP的相关性。TLR4的异常表达可能在AS和RA的发生和发展中起作用。     

甲状腺球蛋白抗体、微粒体抗体及过氧化物酶抗体检测在诊断甲状腺疾病中的价值

目的探讨甲状腺球蛋白抗体（TG-Ab）、甲状腺微粒体抗体（TM-Ab）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）诊断甲状腺疾病的临床价值。方法应用电化学发光法检测92例甲状腺疾病及66例其他疾病患者血清TPO-Ab浓度,应用问接免疫荧光法检测TG-Ab及TM-Ab阳性率。结果三者阳性率在甲状腺疾病组与非甲状腺疾病组间差异有统计学意义（P〈0．01）;TPO-Ab诊断甲状腺疾病的特异性、准确性、阳性预测值及阳性似然比分别为93％、69．6％、90．7％及7．6;TPO-Ab与TM-Ab在甲状腺疾病组间呈显著相关（r=0．6,P〈0．01）。结论TPO-Ab在甲状腺疾病中的诊断价值相对较高;TG-Ab和TPO-Ab联合检测是自身免疫性甲状腺疾病诊断的有效组合。     

膜结合型TRAIL在原发性胆汁性肝硬化患者外周血白细胞的表达及临床意义

目的检测膜结合型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(mTRAIL)在不同人群外周血白细胞的表达,探讨其与原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)疾病进展的相关性。方法应用流式细胞仪检测PBC患者、乙肝后肝硬化患者及健康对照外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞mTRAIL蛋白的表达,同时检测其血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α),γ-谷氨酰转肽酶(GGT)及碱性磷酸酶(ALP)浓度,并作相关性分析。结果mTRAIL在健康人外周血白细胞表达很低,而PBC及乙肝后肝硬化患者外周血淋巴细胞、单核细胞及中性粒细胞mTRAIL的阳性表达率均较正常对照组明显升高(P<0.01),尤以单核细胞表达为主,但两组肝硬化患者之间并无显著差异。PBC患者单核细胞TRAIL阳性表达率与血浆TNF-α、GGT及ALP浓度呈显著正相关(P<0.05)。结论PBC及乙肝后肝硬化患者外周血各群细胞mTRAIL表达明显上调,且PBC患者单核细胞mTRAIL阳性表达率与血浆TNF-α、GGT、ALP浓度显著相关,提示TRAIL信号异常在PBC发病及疾病进展中具有一定作用。     

苏联核电站事故对贵阳地区的影响

我们从5月10日～6月29日对苏联切尔诺贝利核电站事故进行了监测。监测的项目:沉降灰、白菜、湖水中总口和¹³¹I活度,空气气溶胶总夕和牛奶中¹³¹I活度。     

原发性胆汁性肝硬化一例评析

患者，女，75岁，上海人，因乏力10d，尿黄6d，于2006年5月24日入住本院。     

IL-8及其受体CXCR1、CXCR2与肝癌关系的研究进展

摘要: 白介素-8（IL-8）是一种具有趋化作用的炎性细胞因子,属于CXC（C为半胱氨酸,X为任意氨基酸）趋化因子家族,与其相应受体白介素-8受体1（CXCR1）、CXCR2结合后,通过G蛋白信号传递链引起生物学效应,诱导中性粒细胞、淋巴细胞等聚集到损伤部位,促进肿瘤细胞的增殖、分化和转移,肿瘤部位血管生成,并与肿瘤细胞耐药密切相关。阻断IL-8信号通路或将成为治疗肿瘤的新措施。本文主要综述了IL-8及其受体CXCR1/2与肝癌的关系。