雄黄诱导MCF-7/ADM细胞凋亡及逆转其耐药性的研究

目的探讨雄黄诱导人乳腺癌MCF-7／ADM细胞凋亡及逆转其耐药性的调节机制。方法经MTT法探讨雄黄对人乳腺癌MCF-7／ADM细胞药物敏感性的影响;用透射电镜观察凋亡细胞形态改变;应用流式细胞术,探讨凋亡抑制基因bcl-2的编码蛋白Bcl-2的改变及凋亡百分率的改变;通过荧光分光光度法观察雄黄对细胞内化疗药物阿霉素积累的影响。结果雄黄对MCF-7／ADM的耐药性有明显的逆转作用,无毒剂量（15mg,L）及低毒剂量（25mg,L）雄黄作用后,逆转倍数分别为2．3倍及2．8倍;出现凋亡细胞,凋亡百分率由0．6％分别增至2．0％（P〈0．05）及3．4％（P〈0．01）;Bcl-2表达由90．2％分别降至63．6％（P〈0．01）及52．7％（P〈0．01）;MCF-7／ADM的细胞内阿霉素浓度明显增加（P〈0．01）。结论雄黄通过降低Bcl-2表达,促进细胞凋亡,增加耐药细胞内阿霉素积累量等耐药机制的调节,部分逆转了MCF-7／ADM细胞对阿霉素的耐药性。     

榄香烯对多药耐药人红白血病细胞株的影响

[目的]探讨抗肿瘤药β-榄香烯对多药耐药细胞系的影响。[方法]利用MTT,荧光染料Hoechst33342染色、透射电镜的方法观察β-榄香烯对多药耐药性(mdr)人红白血病细胞株K562/ADM细胞的生长和凋亡的影响。[结果]β-榄香烯对K562/ADM细胞的抑制作用在5~40μg/mL的药物浓度范围内呈上升趋势,加药组24~72 h范围内细胞凋亡率不断增加,浓度40μg/mL 72 h时达高峰62.73%±,二者呈现药物浓度和作用时间依赖性(P<0.05或P<0.01)。[结论]诱导细胞凋亡是β-榄香烯抗肿瘤细胞作用机制之一。     

β-连环蛋白与卵巢癌转移的相关性及调节机制

目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)与卵巢癌转移的相关性及其可能的调节机制. 方法 采用免疫荧光法、免疫印迹法及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测人卵巢浆液性囊腺癌高、低转移细胞系(HO-8910PM及HO-8910)中β-catenin基因的表达差异.为进一步探讨β-catenin调节卵巢癌转移的可能机制,将低转移卵巢癌HO-8910细胞经肝细胞生长因子(HGF)处理,应用上述方法检测β-catenin基因表达的改变;同时经Transwell小室法和划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力的改变. 结果 β-catenin在HO-8910细胞中为高表达,在HO-8910PM细胞中为低表达,差异具有显著性(P<0.05).HGF可明显降低HO-8910细胞中β-catenin基因的表达(P<0.05)并促进细胞侵袭(P<0.05)和迁移. 结论 卵巢癌细胞的侵袭、迁移等恶性行为可能与β-catenin基因表达下降有关.经由HGF/c-Met的信号很可能是β-catenin介导的黏附功能的重要调节者.     

组织块法培养人胃成纤维细胞及其结缔组织生长因子的表达

[目的]探索人胃成纤维细胞体外培养的技术方法及其结缔组织生长因子表达情况。[方法]采用组织块贴壁培养法进行人胃成纤维细胞体外培养并传代,倒置相差显微镜下观察成纤维细胞形态,并用免疫细胞化学法检测培养细胞的波形蛋白与角蛋白表达。用RT-PCR法检测人胃成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达,免疫细胞荧光染色法检测人胃成纤维细胞CTGF蛋白表达情况。[结果]人胃成纤维细胞培养成功传代,表现为长梭形或星形细胞,免疫细胞化学鉴定细胞波形蛋白阳性,角蛋白阴性。RT-PCR法与免疫细胞荧光染色法证实体外培养的人胃纤维细胞表达CTGF。[结论]组织块法培养的人胃成纤维细胞可在体外稳定培养、传代,人胃成纤维细胞能合成CTGF。