离子对反相高效液相色谱法检测小鼠海马组织中ATP、ADP和AMP含量

目的：建立离子对反相高效液相色谱（RP-HPLC）同时检测小鼠海马组织中ATP、ADP和AMP含量的方法。方法高氯酸沉淀蛋白后,碳酸钾-甲醇溶液中和,-20℃冷冻保存样本;流动相：50 mmol/L磷酸盐缓冲液（缓冲液为K2HPO4-KH2PO4,pH=6.60,含22%甲醇和4 mmol/L四丁基硫酸氢铵）。C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）及相同填充材料的预柱,测定小鼠海马组织中ATP、ADP和AMP的含量;检测波长254 nm,流速0.6 ml/min;柱温为室温;进样量20μl。结果本法的日内和日间精密度分别为1.27%～3.42%和0.88%～3.52%,回收率为95.67%～104.05%。结论本研究建立的RP-HPLC法可同时测定小鼠海马ATP、ADP和AMP的含量,方法稳定、准确、可靠。     

补脾方药对脾虚大鼠壁细胞CaM及Ca2+/CaM-PK Ⅱ活性的影响

目的：观察大黄脾虚模型大鼠壁细胞内CaM及Ca^2＋／CaM-PKⅡ活性的变化以及补脾方药党参、白术、补中益气汤对其的作用。方法：EDTA-Pronase酶消化法及Percoll密度梯度离心分离和纯化大鼠胃壁细胞，根据的CaM的环核苷酸磷酸二酯酶检测法（PDE酶法）检测大鼠壁细胞内CaM活性；根据CaCa^＋／CaM—PKⅡ活性与激活底物磷酸化量成线性关系，测定其活性。结果：大黄脾虚模型大鼠壁细胞内CaM及Ca^2＋／CaM-PKⅡ活性均明显升高，补脾方药对其均有明显下调作用。结论：脾虚大鼠壁细胞处于高应激状态，党参、白术、补中益气汤等补脾方药可因对细胞内受体后信号传导物质的影响而调节细胞功能。     

溃结灵含药血清对Caco-2炎症细胞模型泛素系统E1、UBC5和E3RSIB蛋白表达的作用

目的:观察溃结灵含药血清对Caco-2炎症细胞模型泛素系统的E1、UBC5、E3RSI B蛋白表达的作用,进一步探讨中药复方溃结灵治疗溃疡性结肠炎的作用机理。方法:将生长融合至70-80%左右的Caco-2细胞分成六个组:正常组、模型组、阳性药组(SASP)、溃结灵高、中、低剂量组;加入对应药物孵育,除正常组外,其余各组加入IL-1β刺激细胞建立炎症细胞模型,收集细胞标本。采用Elisa方法检测Caco-2细胞E1、UBC5和E3RSI B蛋白含量。结果:IL-1β刺激的Caco-2炎症细胞模型中,模型组细胞E1蛋白表达明显高于正常组(P﹤0.05),溃结灵中(10%含药血清)、低剂量组(5%含药血清)E1蛋白表达量低于模型组(P﹤0.05);模型组细胞UBC5蛋白表达高于正常组,但无统计学意义(P﹥0.05),溃结灵高(20%含药血清)、中剂量组(10%含药血清)UBC5蛋白表达量低于模型组(P﹤0.01,P﹤0.05);模型组细胞E3RSI B蛋白表达明显高于正常组(P﹤0.05),溃结灵高(20%含药血清)、中剂量组(10%含药血清)、低剂量组(5%含药血清)E3RSI B蛋白表达量低于模型组(P﹤0.01,P﹤0.05)。结论:溃结灵含药血清对Caco-2炎症细胞模型的E1、UBC5、E3RSI B表达均有下调作用,其抗UC作用的机理可能为抑制泛素蛋白酶体系统来抑制I B的泛素化降解,进而抑制NF-B的活化,减轻溃疡性结肠炎的炎症反应。     

溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜Toll样受体2、4基因表达的影响

目的:观察溃结灵对溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型结肠粘膜Toll样受体(TLR)2、4基因表达的作用。方法:用三硝基苯磺酸(TNBS)法制备UC大鼠模型,将48只大鼠分为正常组、模型组、溃结灵低、中、高三个剂量组和柳氮磺胺吡啶(SASP)组,分别检测肠粘膜TLR2、TLR4基因表达水平。结果:模型组TLR2、TLR4基因相对表达量均明显高于正常组(P<0.01);溃结灵中、高剂量组TLR2相对表达量明显低于模型组(P<0.05);溃结灵高剂量组TLR4相对表达量明显低于模型组(P<0.05)。结论:UC大鼠结肠粘膜TLR2、TLR4基因高表达,溃结灵对TLR2、TLR4基因表达有抑制作用,这可能是其抗UC作用的机理之一。     

HPLC法同时测定复方蜂胶喷雾剂中两组分的含量

目的 建立高效液相色谱法分离并测定复方蜂胶喷雾剂中两组分柯因和甘草酸单铵盐的含量,为该制剂质量标准提供科学依据.方法 采用Symmetry C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(66:34:0.4%),pH值1.7,检测波长为246nm,流速1.0ml/min.结果 柯因、甘草酸单铵盐的浓度线性范围分别为0.12～0.36、8.0～16.0mg·ml-1.平均回收率分别为99.1%、101.5%,RSD分别为1.45%、2.06%.结论 方法简便,结果准确,重现性好,可用于该制剂的质量控制.     

清热理气方对螺杆菌感染性胃炎的作用

为检验清热理气方（蒲公英６０ｇ,黄连１０ｇ,黄芩１０ｇ,枳壳１０ｇ,佛手１２ｇ,炙甘草６ｇ）对实验性猫胃螺杆菌胃炎的治疗作用。采用复制Ｂａｌｂ／ｃ猫有螺杆菌胃炎模型,以清热理气方大,中,小剂量９分别为２６．６ｇ／ｋｇ,１３．３ｇ／ｋｇ,６．６５ｇ／ｋｇ）给药,以三联疗法（灭滴灵２．６ｍｇ,四环素１．３ｍｇ,丽珠得乐１．３ｍｇ）为阳笥对照组,以生理气方作用不如三联疗法,给药４周,末次给药４周后观察结     

脂肪因子与妊娠糖尿病胰岛素抵抗的关系

随着我国经济的发展和生活水平的提高,妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）发病率有逐年增高的趋势。GDM的发病机制目前尚未阐明,可能类似于2型糖尿病,与胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）和胰岛素分泌受损有关,并且GDM孕妇存在比正常孕妇更强烈的IR。近来研究显示脂肪细胞分泌的多种细胞因子在IR和GDM的发生、发展中扮演着重要的角色,本文就脂肪细胞因子与GDM胰岛素抵抗之间的关系进行综述。     

消食饮对大鼠胃酸、胃蛋白酶的影响

目的:观察消食饮(XSY)对大鼠胃酸、胃蛋白酶分泌的影响。方法:SD大鼠40只,随机分4组:正常对照组、阳性对照组、XSY高、低剂量组。采用幽门结扎收集胃液,容积法测定胃液量;麦特(Mett)改良法观察其对胃蛋白酶活性的影响。结果:与正常对照组比较,XSY高剂量组可增加大鼠的胃蛋白酶含量,但对胃酸分泌无明显影响(P<0.05)。结论:XSY可促进大鼠胃蛋白酶的分泌。     

糖皮质激素及瘦素与胰岛素抵抗的关系

正胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)是指机体对一定量(一定浓度)胰岛素的生物效应降低,主要指机体胰岛素介导的葡萄糖摄取和代谢能力降低,包括胰岛素的敏感性和反应性下降。IR可发生于组织器官水平(骨骼肌、脂肪、肝脏和血管内皮),也可发生于亚细胞及分子水平(胰岛素受体前、受体及受体后)。糖皮质激素是重要的胰岛素拮抗激素,可通过抑制外     

改善胰岛素抵抗对中年男性2型糖尿病患者血清睾酮水平的影响

目的评价中年男性2型糖尿病(T2DM)患者血清性腺激素水平与胰岛素抵抗的相关性,以及改善胰岛素抵抗对血清睾酮水平的影响。方法选取86例30～65岁男性T2DM患者,测定其性腺激素水平及各项临床指标,分析血清总睾酮(TT)水平与各代谢指标的相关性。其中69例患者给予降糖及改善胰岛素抵抗治疗3个月,用配对t检验比较治疗前后患者的各项观察指标。结果 (1)相关分析显示:血清TT水平与体质指数(BMI)、腰臀比(WHR)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、空腹胰岛素(FINS)、空腹C肽(FCP)、三酰甘油(TG)呈负相关(P<0.05),与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈正相关(P<0.01)。睾酮分泌指数(TSI)与年龄、促卵泡生成素(FSH)、HOMA-IR、WHR、BMI、FINS呈负相关(P<0.05),与HDL-C呈正相关(P<0.05)。(2)69例患者治疗前后空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、TG、HDL-C、FINS、FCP、HOMA-IR、TT、TSI、促黄体生成素(LH)及WHR比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论胰岛素抵抗是影响中年男性T2DM患者睾酮水平的主要因素;而尽早开始降糖治疗,改善胰岛素抵抗,可提高中年男性T2DM患者的血清睾酮水平。