RT-PCR法测定牵拉性撕脱伤血管上P-选择素量的变化

目的 探讨牵拉性撕脱伤血管上的P-选择素的变化。方法 设定60、70、80及90g的牵拉力，利用血管损伤模型造成不同的血管损伤，用RT-PCR法测定损伤血管上P-选择素量的变化。结果 撕脱伤血管上P-选择素mRNA表达随牵拉力增加而升高，静脉的表达要高于动脉。结论 结合以前的相关实验，提示P-选择素与血栓形成关系密切。     

蛋白激酶C在TGF-β1刺激增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成中的介导作用

目的:研究蛋白激酶C(PKC)在TGF-β1刺激增生性瘢痕和正常人皮肤成纤维细胞(HS-FB和NS-FB)增殖和合成胶原中的信号转导作用。方法:利用32P掺入底物法测定PKC活性;MTT法测定增殖能力,3H-脯氨酸掺入法测定胶原合成能力。结果:TGF-β1刺激后NS-FB和HS-FB中PKC的活性逐渐升高,刺激120min时尚未恢复(30min后P<0.05),GF109可阻断TGF-β1活化PKC。TGF-β1和PKC活化剂(含磷脂酰丝氨酸、二酰基甘油和Ca2+)都可刺激NS-FB和HS-FB增殖和合成胶原(P<0.05);而GF109则有抑制作用(60min后P<0.05)且能部分阻断TGF-β1的刺激作用。结论:活化PKC能刺激NS-FB和HS-FB增殖和合成胶原,而抑制PKC活化仅部分阻止细胞增殖。TGF-β1的刺激作用部分经PKC通道转导。     

皮肤色素改变与整形美容外科

整形与美容外科经常会遇到皮肤色素沉着或色素脱失的病变或问题 ,我们就此综述如下。1　黑色素代谢[1]人的皮肤含有 4种色素 :黑素、胡萝卜素、氧合血红蛋白、还原血红蛋白。其中黑素是影响皮肤颜色和保护皮肤防止紫外线损害的决定成分 ,毛发的颜色也是由其决定。1 1　黑素细胞 (ＭＣ) [2 ] 　黑素细胞具有分泌黑素的功能 ,其前体是成黑素细胞 ,发源于胚胎的神经嵴。在热能或紫外线等刺激下 ,成黑素细胞就转变为黑素细胞 ,其占基底细胞总数的 10 %～ 2 0 %。人体皮肤内黑素细胞平均 15 0 0个 ｍｍ2 。黑素细胞呈圆形、椭圆形或纺缍形 ,也可…     

瘢痕防治讲座(六)

６．５建立增生性瘢痕动物实验模型的探索关于动物不产生病理性瘢痕的事实，国内外权威性的著作几乎都有相同的认可。“由于不明原因，瘢痕疙瘩和增生性瘢痕只发生于人类，企图建立病理性瘢痕的动物模型总是未能成功”；“在创伤修复的实验研究中存在的主要问题是缺乏异常瘢痕形成的动物模型，曾给动物创伤的创面注射可引起肥厚瘢痕的超剂量生长因子，但并未发生肥厚性瘢痕”。因此，至今尚未建立由动物自身产生的病理性瘢痕动物模型。这极大地影响了瘢痕研究的深入进行。动物实验模型是医学研究领域中不可缺少的重要工具和手段，多年来，国…     

人工磷脂双分子层模型的原子力显微镜研究

目的:通过原子力显微镜从纳米水平成像人工磷脂双分子层的结构细节。方法:采用囊泡融合法形成了单组份和多组份人工磷脂双分子层模型,通过原子力显微镜进行观察。结果:通过原子力显微镜在纳米水平观察到了人工磷脂双分子层和其流动性;同时进行磷脂双分子层高度测量。结论:原子力显微镜是进行人工磷脂双分子层模型研究的良好方法。为细胞膜的进一步研究打下基础。     

SMAD3在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达与分布

目的：研究SMAD3在瘢痕疙瘩成纤维细胞（Keloid fibroblast,KFB)和正常人皮肤成纤维细胞（Normal skin fibroblast,NFB)中的表达和分布。方法：采用Western蛋白印迹法和细胞内免疫荧光法测定SMAD3的表达和分布。结果：SMAD3在KFB和NFB两种细胞中的表达差别不大（P＞0．05），KFB核内的荧光强度强于NFB。结论：SMAD3在KF3细胞核内的分布高于NFB。     

TGF-β1或IFN-γ影响增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成中PTK的作用

目的探讨蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)在TGF-β1刺激或IFN-γ抑制增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblast,HS-FB)和正常人皮肤成纤维细胞(normal skin fibroblast,NS-FB)增殖和合成胶原中的作用.方法用TGF-β1或IFN-γ处理培养的HS-FB和NS-FB,用32P掺入底物法测定PTK活性,MTT法测定细胞增殖,放射免疫法测定胶原合成.结果TGF-β1不活化PTK但呈时间依赖性刺激HS-FB和NS-FB增殖和胶原合成,5,7,45-三羟(基)异黄酮(异黄酮)不影响TGF-β1的作用.短暂使用IFN-γ增加HS-FB和NS-FB增殖和胶原合成,伴有PTK活化,随后PTK活性恢复,细胞增殖和胶原合成也被抑制;异黄酮可逆转IFN-γ的作用.HS-FB的酶活性、增殖和合成胶原能力稍强于NS-FB,但P＞0.05.结论PTK不介导TGF-β1的信号,但部分介导IFN-γ短期升高FB增殖和胶原合成的效应,而PTK与IFN-γ的长期抑制效应无关.抑制或活化PTK可抑制或刺激FB增殖和合成胶原.     

TGF-β1对增生性瘢痕成纤维细胞中c-myc和c-fos表达及胶原分泌的影响

目的了解TGF-β1对增生性瘢痕成纤维细胞中癌基因c-myc和c-fos的表达及胶原分泌的影响,探讨瘢痕增生机制. 方法烧伤患者增生性瘢痕6例标本,通过细胞培养研究了TGF-β1对增生性瘢痕成纤维细胞癌基因c-myc和c-fos的表达(免疫组织化学和图像分析方法)及胶原分泌(3H-脯氨酸法)的影响. 结果 TGF-β1可显著提高增生性瘢痕成纤维细胞癌基因c-myc和c-fos的表达, 图像分析结果面密度(c-myc: 0.0687±0.0072 vs 0.0141±0.0016,P<0.01;c-fos: 0.0529±0.0048 vs 0.0223±0.0021,P<0.01);平均灰度(c-myc: 3340±462 vs 1120±232 ,P<0.01; c-fos: 1402±286 vs 605±79,P<0.01);积分吸光度[c-myc: 2.0±0.3 vs -(1.5±0.2), P<0.01; c-fos: 3.3±0.4 vs -(1.3±0.1), P<0.01]等指标经统计学处理与对照组有显著性差异;TGF-β1可促使增生性瘢痕成纤维细胞合成分泌胶原率提高2.0倍(P<0.01). 结论 TGF-β1可能是通过癌基因c-myc和c-fos的表达而促进增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成分泌增加.