心肌再血管化机制的对比实验研究

目的观察研究钬激光和True-cut活检针心肌再血管化近、远期的机制和效果。方法利用经静脉注射造影剂对犬缺血心肌模型进行心肌超声微泡造影。结果部分结扎犬的冠状动脉前降支，建立缺血模型后，缺血区超声微泡密度明显降低，分别用2种方法再血管化后，2组犬缺血区超声微泡密度较缺血时均明显增加，接近其缺血前的微泡密度；再血管化区超声微泡较其他部位提前显影。远期超声微泡检查显示心肌灌注较急性缺血时也有一定改善。结合组织学方法发现，远期心肌灌注的改善得益于隧道周围新生循环结构如心肌窦和新生血管的增加。结论钬激光和True-cut活检针隧道均可即刻使缺血心肌灌注改善，并逐渐闭塞，新生循环结构使缺血区得到有限的灌注。应用新一代经静脉注射造影剂超声心肌微泡造影结合组织学方法可作为研究心肌再血管化机制的可靠手段。     

新型声学造影齐非损伤性估价正常心肌血流灌注的实验研究

本研究的目的是评定一种新型含有氟碳气体微泡的造影剂－ＦＸ４３０和ＦＸ５３０经静脉注射后能否产生心肌对比作用。在６条开胸犬分别注射经声振处理含有室内空气和氟碳气体的微泡造影剂。在每次注射后测量心肌视频密度峰值，并视觉观察心肌显影程度。静脉注射造影剂未产生血流动力学变化，未见有意义的副作用。每次静脉注射氟碳造影剂均可产生视觉可见的心肌显影，而空气微泡无一次注射产生心肌显影。定量分析显示，ＦＸ４３０和ＦＸ５３０产生较高的心肌视频密度（３９±１６比３±２，ｐ＜０．０００１）。结论：静脉注射ＦＸ４３０和ＦＸ５３０可产生恒定的心肌对比作用，且十分安全。     

睡眠节律紊乱与阿尔兹海默病研究进展

认知功能损害患者睡眠障碍患病率高,表现形式多样,主要包括：失眠、日间过度思睡、睡眠呼吸障碍、异态睡、不宁腿综合征、睡眠节律紊乱等。阿尔茨海默病(Alzheimer"s disease,AD)是最常见的认知损害类型,73%的中国汉族AD患者伴有睡眠障碍,其中53%伴有不同程度的睡眠节律紊乱。AD患者睡眠障碍在病程中后期较为突出,所以一直以来睡眠节律紊乱都被认为是AD相关神经退行性变的结果,例如“日落现象”,患者一到傍晚就焦虑不安、难以入睡,而白天则睡眠过多。但近期研究表明,睡眠节律紊乱很可能参与AD发生的始动环节。国外前瞻性的随访研究发现,睡眠节律紊乱的认知正常老年人群,在5-10年后更容易发生AD。目前,关于睡眠节律紊乱究竟通过何种途径促使神经系统退行性变发生的研究尚不深入,本文将回顾睡眠节律紊乱引发AD相关病理、生物标记物变化的研究报道。     

元通胶囊治疗血管性痴呆的实验研究

目的探讨元通胶囊治疗血管性痴呆(VD)的疗效及机理.方法采用反复结扎双侧颈总动脉,同时腹腔注射硝普钠的方法复制出缺血再灌注大鼠痴呆模型(I/R),分假手术组、模型组、西药对照组、中药治疗(高、中、低剂量)组.从4个方面观察了元通胶囊对实验性大鼠I/R模型的治疗作用.结果元通胶囊可减轻缺血再灌注损伤,改善学习和记忆障碍,具有抗脂质过氧化反应的能力.且呈一定的量效关系,剂量越大疗效越显著.结论证明元通胶囊具有显著的防治血管性痴呆(VD)作用.     

山楂叶原花青素对血管内皮细胞钙活化作用的研究

山楂叶具有活血化瘀,理气通脉,化浊降脂的功效。原花青素是其主要活性成分之一,具有调节血管活性的重要作用。以往研究表明,原花青素的调节作用与其诱导血管内皮细胞分泌一氧化氮有关,且这一作用还依赖于细胞外钙的存在,提示血管内皮细胞内部钙离子的浓度变化可能在此过程中发挥关键作用。然而,迄今为止,对于这一问题还缺乏研究。该实验探讨山楂叶原花青素(hawthorn leaf procyanidins,HLP)对血管内皮细胞钙浓度的影响,从而推测HLP血管活性的可能机制。体外培养人脐静脉内皮细胞;使用Fura-2作为探针,HLP加入细胞孵育液,以活细胞工作站观察胞内钙离子浓度30 min。6.25~50 mg·L-1HLP浓度依赖地升高细胞内钙离子浓度,其中25,50 mg·L-1HLP组较正常组,差异明显。使用无钙孵育液、在孵育液内加入钙螯合剂EGTA或使用钠钙交换体的抑制剂,均可以显著抑制HLP的作用;而抑制胞内钙库释放钙离子,也可显著抑制HLP的作用。综上,该实验首次观察了HLP对血管内皮细胞钙离子浓度的影响;结果提示,HLP具有血管内皮细胞钙活化的作用,这可能是其血管活性作用的机制之一;这一钙活化作用与HLP促进血管内皮细胞胞外钙内流和胞内钙释放有关,而前者又可能与激活胞膜上钠钙交换体的逆向转运有关。     

健脾祛湿和络方含药血清对足细胞标志蛋白Nephrin、Podocalyxin及mTOR表达的影响

目的探讨健脾祛湿和络方(Jianpi Qushi Heluo Formula,JQHF)含药血清对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的小鼠足细胞损伤模型标志蛋白Nephrin、Podocalyxin及mTOR相关自噬因子表达的影响。方法以体外培养小鼠足细胞为研究对象,除空白组外均以PAN(100μ/mL)体外诱导足细胞,根据含药血清细胞培养基的不同分为空白组(10%空白血清),模型组(10%空白血清+PAN),JQHF低剂量组(10%低剂量JQHF含药血清+PAN),JQHF中剂量组(10%中剂量JQHF含药血清+PAN),JQHF高剂量组(10%高剂量JQHF含药血清+PAN),替米沙坦(TMST)组(10%TMST含药血清+PAN),醋酸泼尼松(PRE)组(10%PRE含药血清+PAN),雷帕霉素(RAP)组(100μg/L RAP+10%空白组血清+PAN)。CCK-8法检测足细胞损伤模型在各组血清作用后的活性变化;Western blot法检测各组足细胞标志蛋白Nephrin、Podocalyxin及细胞内mTOR相关自噬蛋白表达水平。结果 (1)与空白组比较,模型组细胞活力显著下降(P0.01),与模型组比较,JQHF高剂量、TMST、PRE及RAP组足细胞活力上升(P0.05);(2)与模型组比较,除JQHF低剂量组Podocalyxin表达外,其余各药物干预组Nephrin、Podocalyxin表达均增多(P0.05,P0.01);与JQHF低剂量组比较,JQHF高剂量、TMST、PRE及RAP组Nephrin表达增多(P0.05);与JQHF中剂量组比较,JQHF高剂量、TMST、PRE及RAP组Nephrin表达增多(P0.05),TMST、PRE、RAP组Podocalyxin表达亦增多(P0.05);与JQHF高剂量组比较,TMST、PRE、RAP组Podocalyxin表达增多(P0.05)。(3)与模型组比较,各药物干预组LC3-Ⅱ表达均增多(P0.05,P0.01),JQHF高剂量组、TMST组、PRE组、RAP组P-mTOR、P-4EBP1表达均减少(P0.05),JQHF高剂量组、TMST组、RAP组P-P70S6K表达减少(P0.01)。结论 JQHF可以改善细胞内自噬水平,修复PAN诱导损伤足细胞,与上调细胞内Nephrin、Podocalyxin及LC3-Ⅱ的表达,减少mTOR及相关因子合成有关。     

丹皮酚、芍药苷及二者配伍对体外培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响

目的观察丹皮酚、芍药苷及二者配伍对体外培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法用体外细胞培养方法,培养乳鼠心肌细胞,复制心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。分别在缺氧和复氧阶段将细胞培养液换成含药培养液以进行药物干预,研究丹皮酚和芍药苷的作用时,各设100、75、50和25mg/L4个剂量组,研究二者配伍作用时设芍药苷40mg/L和20mg/L组、丹皮酚40mg/L和20mg/L组、以及芍药苷20mg/L+丹皮酚20mg/L5个剂量组,模型组只造模不进行药物干预,而正常对照组则不造模。分别测定缺氧2.5～5h后及复氧2h后细胞培养上清液中的肌酸肌酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)漏出量,计算缺氧/复氧过程中各指标总漏出量及漏出抑制率。结果与正常对照组比较,模型组缺氧2.5h后MDA漏出量增加,缺氧3、5h后、复氧2h后CK、LDH和MDA漏出量、漏出总量均增加,各指标漏出抑制率均降低,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,丹皮酚高剂量组及芍药苷高、中剂量组缺氧后LDH、MDA漏出量及复氧2h后各指标漏出量、漏出总量均减少(P<0.01,P<0.05),各指标漏出抑制率均升高(P<0.01,P<0.05);而丹皮酚低、极低剂量组仅复氧2h后CK漏出量及漏出总量减少(P<0.01,P<0.05),CK漏出抑制率升高(P<0.01)。芍药苷极低剂量组仅复氧2h后LDH漏出量及漏出总量均减少(P<0.01),LDH漏出抑制率升高(P<0.01)。配伍组各指标与丹皮酚、芍药苷各组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论丹皮酚、芍药苷及二者配伍对体外培养大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤均具有保护作用,二者配伍作用强度与同剂量单味药物作用强度相当,未见显著配伍增效作用。     

治疗后慢性乙型肝炎病毒感染者中低病毒血症人群外周血淋巴细胞状态分析

目的评估治疗后慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染者中低病毒血症人群外周血T、B、NK淋巴细胞情况, 为解决低病毒血症提供思路。方法回顾性收集344例治疗后慢性HBV感染者的基本情况、生化、凝血、HBV DNA、外周血淋巴细胞计数、T淋巴细胞PD1及CD28、NK淋巴细胞穿孔素及颗粒酶B等数据, 分为低病毒血症(low-level viremia, LLV)组与完全病毒学应答(complete virological response, CVR)组, 比较两组外周血淋巴细胞计数、T淋巴细胞PD1及CD28表达、NK淋巴细胞穿孔素及颗粒酶B表达, 倾向性评分匹配分析, 验证结果的准确性。结果对162例LLV者和182例CVR者进行疾病诊断、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)、白蛋白(albumin, ALB)水平比较, 差异无统计学意义(P>0.05), 性别和年龄差异有统计学意义(P<0.05);两组外周血CD3+、CD4+、C...     

心脉灵注射液对内毒素刺激人脐静脉内皮细胞ET-1和NO分泌的影响

目的观察心脉灵注射液(XML)对内毒素(LPS)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)的影响.方法体外培养人脐静脉内皮细胞,根据剂量效应实验结果,使用最适浓度的XML与内毒素100μg/L刺激的HUVEC分别孵育不同的时间,应用MTT法、放免测定法、硝酸还原酶法测定内皮细胞的活力以及培养上清液内ET-1、总硝酸根离子(Nox)的含量.结果与模型组比较,XML浓度为320g/L时,内皮细胞的活力最高(P<0.01),孵育的每个时间点,治疗组培养液中的ET-1的含量都显著降低(P<0.01),Nox的浓度有所增加(在2,4,6h时间点P<0.01).结论XML对内毒素导致的HUVEC损伤有保护作用,能够调节ET-1/NO血管舒缩因子的分泌.