排序方式: 共有19条查询结果,搜索用时 15 毫秒
11.
目的:构建带编码HA标签的hdac1基因真核表达载体,研究组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)对雌激素受体α和β(ERα和ERβ)蛋白水平的影响。方法:用提取的RNA产物进行逆转录合成cDNA,利用PCR技术扩增出hdac1基因完整编码区序列,通过DNA重组技术构建含编码hdac1 DNA片段的真核表达载体pcDNA3-HA—hdac1;利用GST沉降(pull-down)实验观察HDAC1是否能特异结合ERα或ERβ;又将pcDNA3—HA—hdac1重组质粒分别和ERα表达载体或ERβ表达载体质粒共转染293T细胞,观察HDAC1对ERα和ERβ蛋白水平的影响。结果:转染pcDNA3—HA—hdac1重组质粒的哺乳动物细胞表达了与预期相对分子质量大小一致的HDAC1蛋白;GST沉降实验表明,HDAC1蛋白与ERα和ERβ均结合;共转染实验观察到HDAC1可使ERα蛋白水平降低,而对ERβ没有影响。结论:HDAC1与ERα和ERβ均结合,但其对ERs的作用具有亚型特异性,ERα和ERβ蛋白水平可能受不同类型的组蛋白去乙酰化酶(HDACs)的调控。 相似文献
12.
抗肿瘤转移相关蛋白Memo抗体的制备及组织表达谱分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:制备抗Memo蛋白的特异性抗体,并鉴定其特异性,检测其在小鼠组织中的表达。方法:在大肠杆菌中表达GST-Memo融合蛋白,常规免疫小鼠制备抗体。构建了带有FLAG标签的真核表达载体pcDNA3-FLAG-Memo。用Westernblot检测抗体的特异性。结果:构建了Memo的真核表达载体pcDNA3-FLAG-Memo,制备的抗Memo抗体能特异性地识别Memo蛋白。Westernblot检测表明,Memo蛋白在不同的小鼠组织中都有一定程度的表达。结论:成功地获得抗Memo蛋白的特异性抗体并检测了其组织表达谱,为进一步研究其与恶性肿瘤的转移性、侵袭性的关系及其相关机理的研究提供了重要的制剂。 相似文献
13.
目的:制备METT11D1(methyltransferase 11 domain containing 1.简称其为GA9)(GenBank:AK024512)的多克隆抗体,并对其特异性进行鉴定.方法:融合表达GST-GA9(1-228aa)和GST-GA9(229-456aa)蛋白,利用包涵体纯化蛋白方法纯化蛋白,常规免疫小鼠,制备多克隆抗体.利用转染带有FLAG标签的FLAG-GA9真核表达载体的293T细胞裂解物,Western blot检测抗体的特异性.结果:获得了GST-GA9(1-228aa)和GST-GA9(229-456aa)融合蛋白;利用这些融合蛋白得到的多克隆抗体可特异识别FLAG-GA9蛋白.结论:成功得到可特异识别GA9的多克隆抗体,为进一步研究GA9的功能奠定了坚实的基础. 相似文献
14.
目的 研究λ噬菌体表达调控机理,阐明PL操纵了boxA及邻近序列突变对抗转录终止作用的影响。方法 利用体内同源重组技术,使大肠杆菌染色体DNA上携带了CI857,PL,nutL[boxA*(*代表不同的boxA及临近序列缺失突变),boxB],N-lacZ,ttt,galK单拷贝基因,构建了含boxA及邻近序列突变(boxA*)的一系列新菌株,模拟了λ噬菌体感染宿主菌后的生理状态,利用抗转录终止报道基因galK分析研究了boxA及临近序列突变对PL操纵子抗转录终止作用的影响。结果 证明在缺失了boxA及部分上游序列的情况下,大肠杆菌RNA聚合酶不能通读转录终止子。结论 λ噬菌体左向操纵子具有与右向操纵子不同的转录调控现象。 相似文献
15.
人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)cDNA的克隆和序列测定崔立斌,马清钧,张京生,李杰之,石成华,刘传暄(军事医学科学院生物工程研究所北京100850)用Ficoll-paque从正常中国人外周血中分离单个核细胞,在RPMI1640培养基(含10%小... 相似文献
16.
人前列腺癌相关基因pc—1表达产物在细胞内的定位研究 总被引:4,自引:1,他引:3
目的:研究pc-l基因表达产物在细胞内的定位。方法:采用巢式PCR技术,从原始克隆质粒中扩增出可编码蛋白分子的pc-l cDNA片段,分别将其克隆入含EGFP和MYC标签的真核表达载体中;用脂质体介导法将其转染入人前列腺癌细胞C4-2中;通过免疫细胞化学方法和激光共聚焦显微镜技术检测pc-l表达产物在细胞内的定位。结果与结论:pc-l表达产物定位于细胞质中,为进一步研究其生理、生化功能奠定了基础。 相似文献
17.
无菌小鼠、悉生小鼠、SPF 小鼠等在各单位之间运往期间,应有一种特定的运送装置以保证动物途中不受微生物污染。作者研制出一种装置,推荐试用,报告如下。材料、方法和结果运送器(图1):底面直径14 cm、高20 cm、口的直径9 cm。外层盖的孔径为0.5 cm,孔面积占每个盖面积的70%。 相似文献
18.
19.
目的:制备FHL1及其剪接体FHL1B、FHL1C的多克隆抗体,并对其特异性进行鉴定。方法:融合表达GST-FHL1蛋白,常规免疫小鼠,制备多克隆抗体。分别构建带有FLAG标签的FHL1-5、FHL1B、FHL1C以及FHL1N端和C端缺失突变体的真核表达载体。Westernblot检测抗体的特异性。结果:获得了FHL1-5、FHL1B、FHL1C及FHL1(1-169aa)和FHL1(168-280aa)的真核表达载体;得到的多克隆抗体可特异识别FHL1、FHL1B和FHL1C,而不识别FHL2-5;抗体与FHL1N端反应,而不与其C端反应。结论:成功得到可特异识别FHL1、FHL1B和FHL1C的多克隆抗体,为进一步研究FHL1及其剪接突变体的功能奠定了坚实的基础。 相似文献