基于双重PCR技术的鹿茸及其伪品DNA指纹特征和鉴定

目的：分析鹿茸线粒体细胞色素b （Cytb）和细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）基因特异性,建立双重PCR技术鉴别鹿茸真伪的分子指纹特征。方法：利用碱变性法提取梅花鹿茸、马鹿茸、驯鹿茸和新西兰鹿茸的基因组DNA,应用引物设计软件Premier 5.0针对Cytb和COⅠ分别设计特异性引物（分别为Cytb1、2和COⅠ1、2、3）,采用单一及双重引物分别进行PCR扩增,筛选特异性强的引物,确定最佳PCR反应条件。结果：采用碱变性法提取的鹿茸基因组DNA片段长度为23 000bp,DNA纯度即A （260）/A （280）为1.80±0.02;应用单一引物进行PCR扩增无法鉴定鹿茸的真伪,而引物Cytb 1和COⅠ1组合后,解链温度为58℃时,梅花鹿茸（吉林、安徽）、马鹿茸均能扩增出395和525bp大小的2个片段,而驯鹿茸和新西兰鹿茸均未能扩增出相应片段;采用该提取方法及最优化的PCR反应条件,对市售样品进行检测,检测结果与实际情况完全一致。结论：双重PCR技术可从分子水平鉴别鹿茸的真伪,该方法特异性高、实用性强,且简便快捷,在鹿茸真伪鉴别方面具有较高的应用价值。     

640例呼吸系统感染患儿呼吸道葡萄球菌分离情况及耐药性分析

采集640例呼吸系统感染患儿的呼吸道标本,常规分离培养葡萄球菌并行K—B法药敏试验。结果250例未应用抗生素及390例应用抗生素者分别分离出葡萄球菌49株和83株,其对青霉素、苯唑西林、头孢呋辛、红霉素、克林霉素、环丙沙星、四环素、新诺明耐药率均〉50％,对头孢唑林、头孢哌酮、庆大霉素、万古霉素耐药率低。认为本地区儿科呼吸道感染患者耐甲氧西林葡萄球菌分离率高,且对β内酰胺类抗生素具有较高的耐药性。     

不同来源产志贺毒素大肠埃希菌分布特征

目的探讨不同标本中产志贺样毒素大肠埃希菌（STEC）的分布特征。方法采集动物粪便、肉类食品和排污口污泥样品，常规分离大肠埃希菌，血清学分型，PCR鉴定产志贺样毒素（stx1，stx2）菌株。结果293份标本中鉴定出8株STEC，1株为产志贺毒素O157：H7型，2株为不产志贺毒素O157：H7型，5株为产志贺毒素非O157：H7型。结论STEC存在于不同来源的标本中，菌株表型与毒力因子存在一定差异。     

吉林地区女性尖锐湿疣疣体HPV基因型的研究

目的探讨吉林地区女性尖锐湿疣疣体中感染的人乳头瘤病毒基因类型及分布。方法收集女性生殖器肉眼可见的疣体112例,采用免疫组化法和DNA扩增技术检测疣体中感染HPV基因类型。结果在112例标本中,疣体感染HPV6型48.3%(54/112)、HPV11型17.2%(19/112)、HPV16型14.3%(16/112)、HPV18型11.4%(13/112)、HPV42型8.8%(10/112)。3.5%(4/112)为HPV6型和HPV11型混合感染。结论本地区女性尖锐湿疣以低危型HPV6、HPV11型为主,少数为高危型,并且出现了两种型别的混合感染。     

貂组织线粒体DNA及细胞色素b鉴定及特征

目的:探讨貂组织线粒体DNA（mtDNA）及细胞色素b(Cytb)的特征。方法:采用碱变性方法提取新鲜的貂心及肝组织中mtDNA,PCR技术扩增细胞色素b(Cytb)基因部分序列片段并直接测序。结果:新鲜的貂心和肝组织提取出16 800 bp的mtDNA,并能扩增出310 bp大小的Cytb基因,测序结果显示貂心Cytb基因与美洲貂(GenBank AB026109.1)同源性为99%。 结论:貂组织含有完整的mtDNA,Cytb部分基因可以作为貂心物种鉴定及检测的分子标记。     

生大黄灌肠治疗毒蕈致急性肾功能衰竭10例

1996年8月-2001年8月,我院收治误食毒蕈致急性肾功能衰竭(ARF)患者10例,在征得患者本人和家属同意后,采用生大黄水口服或灌胃方法试治,都取得满意的效果,报告如下.     

探条扩张治疗食管贲门狭窄52例临床分析

1992年2月～2003年10月，我院内镜室在无X线辅助下，采用国产硅胶扩张器在内镜下对52例食管贲门部狭窄进行了86次扩张治疗，疗效满意。现将临床治疗体会回顾分析如下。     

产志贺毒素大肠埃希菌中国分离株第1类整合子-基因盒的特征

目的：探讨产志贺毒素大肠埃希菌中国分离株携带第1类整合子的特征及所含基因盒的种类。方法：采用纸片扩散法对8株产志贺毒素大肠埃希菌中国分离株进行抗生素耐药性监测;制备细菌转接合子,采用PCR技术鉴定第1类整合子,并对PCR产物测序及结果分析。结果：4株产志贺毒素大肠埃希菌对复合磺胺、四环素、氨苄西林、环丙沙星表现多重耐药,其中2株同时对链霉素和壮观霉素耐药。PCR检测第1类整合子1 000 bp 2株,PCR产物测序1 000 bp整合子携带腺苷酰基转移酶(aadA1)基因盒并存在于7 800 bp可接合质粒上,与sul 1和qacEΔ1基因连锁,分别传递着对链霉素、壮观霉素、复合磺胺和季胺盐类消毒剂的耐药性。结论: 产志贺毒素大肠埃希菌中国分离株可接合质粒上第1类整合子携带的aadA1耐药基因盒是该菌株对氨基糖苷类抗生素耐药产生和扩散的重要原因。     

左氧氟沙星的不良反应

左氧氟沙星 (左克 ,利复星 ,来立信 )为氧氟沙星的左旋体 ,其抗菌活性约为氧氟沙星的 2倍。主要作用机制为抑制细菌DNA旋转酶活性 ,抑制细菌 DNA复制。具有抗菌谱广 ,抗菌作用强的特点。适用于革兰氏阳性和革兰氏阴性敏感菌株引起的各系统感染 ,临床应用日趋广泛。近年来 ,由于该药的广泛应用 ,引起的不良反应文献不断报道 ,现综述如下。1　尿路感染据冯世 [1 ]栋等报道 ,患者因尿路感染给予左氧氟沙星 1片 ,2次 / d,未服用其他药物。服用 4d后 ,患者尿量由原来 1 0 0 0 ml/d,减少到 40 0 ml/ d。 7d后腹胀 ,眼睑和面部水肿。尿常规检查 …     

应用PCR-RFLP方法鉴定梅花鹿茸与马鹿茸

目的 建立一种应用限制性片段长度多态性技术鉴别梅花鹿茸与马鹿茸的方法。方法 提取各种鹿茸样品的基因组DNA,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对正品鹿茸的特异性片段进行扩增,鉴别鹿茸的真伪,然后对正品鹿茸利用动物通用引物进行PCR扩增,并通过限制性片段长度多态性分析进一步对正品鹿茸的种属来源进行确证。结果 通过对特异性片段的PCR扩增,可将梅花鹿茸及马鹿茸与驯鹿、麋鹿、新西兰鹿等伪品鹿茸加以区分,通过对限制性内切酶Msp I 进行酶切后的片段长度进行分析,可进一步区分梅花鹿茸与马鹿茸。结论 本实验建立了一种基于限制性片段长度多态性技术快速、准确的鉴别鹿茸真伪及种属鉴定的方法,为解决中药易混品种难以鉴定的问题提供了又一个新方法。