巢式序列特异性引物PCR方法检测HLA单倍体相合供受者间母胎微嵌合的临床应用研究

目的探索临床应用巢式序列特异性引物聚合酶链式反应（PCR-SSP）方法检测HLA单倍体相合供受者间母胎微嵌合状态的可行性。方法选取25对拟行HLA单倍体相合造血干细胞移植治疗的实体肿瘤患者及其供者,供受者为母子关系15例,父子关系10例。采集供受者外周血提取基因组DNA,采用巢式PCR-SSP方法检测患者外周血中供者来源的HLA-DRB1位点,并计算母胎微嵌合阳性率。随机选取经巢式PCR-SSP证实嵌合阳性和阴性且供受者性别不同的患者各4例,采用荧光原位杂交（FISH）技术进行重复检测,并与巢式PCR-SSP方法的检测阳性率进行比较,同时采用噻唑蓝法检测这8例患者分别与其亲缘供者和HLA完全不相合无关第3人之间的混合淋巴细胞增殖反应（MLR）,并计算增殖指数（SI）。结果巢式PCR-SSP方法灵敏度可高达0.001%,并具有较好的特异性。巢式PCR-SSP检测显示,在母子移植关系患者中母胎微嵌合阳性检出率为40%（6/15）,而在父子移植关系患者中母胎微嵌合阳性检出率为0。巢式PCR-SSP方法的检测灵敏度与FISH技术相比明显增高,其检测阳性率分别为50%（4/8）和12.5%（1/8）。MLR检测显示,嵌合阳性患者对其亲缘供者和无关第3人外周血单个核细胞（PBMC）的SI分别为（0.949±0.023）、（1.320±0.095）,嵌合阴性患者对其亲缘供者和无关第3人PBMC的SI分别为（1.133±0.036）、（1.245±0.069）;嵌合阳性患者对其亲缘供者PBMC的增殖反应强度与嵌合阴性患者相比明显降低（P=0.001）,并且也显著低于其对无关第3人PBMC的增殖反应强度（P=0.003）。结论巢式PCR-SSP方法灵敏度高、特异性好,适用于临床HLA单倍体相合供受者间母胎微嵌合状态的快速检测。     

颞骨内面神经垂直段的显微解剖及其临床意义

目的：研究颞骨内面神经垂直段及其毗邻结构的显微解剖,为临床应用提供解剖学资料。方法：通过模拟临床经乳突入路的方法,分层解剖20个成人湿性头颅标本（40侧颞骨）,显露并观测颞骨内面神经垂直段及其毗邻结构。结果：面神经垂直段的长度为（17.39±1.78）mm、直径为（2.13±0.13）mm,面神经垂直段与水平段的夹角（向前）为（115.5±6.89）°,面神经垂直段近端至外半规管隆突距离为（2.86±0.31）mm,鼓索神经自面神经发出点至茎乳孔距离为（5.99±0.74）mm,面神经垂直段与鼓索神经的夹角（向上）为（38.6±1.99）°,锥隆起尖到面神经垂直段垂直距离为（2.05±0.65）mm,后半规管至面神经垂直段最短距离为（2.89±0.36）mm。有5%（2/40侧）的面神经垂直段的近端位于外半规管隆突外侧。结论：外半规管、鼓索神经、茎乳孔、锥隆起、后半规管是手术中确定面神经垂直段的重要标志。熟悉颞骨内面神经垂直段与其周围结构的毗邻关系,有利于面神经垂直段相关手术的顺利进行。     

PDCA运用于医院管理的文献计量学分析

目的了解PDCA运用于我国医院管理的现况,找出问题并提出建议,以期为进一步研究提供参考。方法利用Excel和CiteSpace软件,对在中国学术期刊网络出版数据库检索到的1 764篇文献,从时间、期刊、作者、单位、关键词等方面进行文献计量学分析。结果相关研究大致分为初探期、缓慢发展期与迅速发展期三个阶段。文献共来源于370种期刊,包含4 417位作者,涉及1 228个研究单位。除“PDCA”外,关键词“医院感染管理”出现频次最高。研究总体上呈现出由点到面、宏观与微观相结合的发展趋势。结论发文量逐年递增,发文作者与单位数量众多但未形成合作团体,文献质量整体上有待进一步提高。研究主题范围广泛,但研究内容较单调。研究方法大致分为理论描述与实验研究两类,但不同研究的PDCA使用过程存在差异。相关研究领域学者应关注存在问题并持续改进。     

内镜超声检查术在良恶性胃溃疡鉴别诊断中的价值探讨

1998年11月至1999年12月,我院消化内科引进日本PENTAX上消化道超声内镜对300多名患者进行了检查。现将经病理证实的良恶性胃溃疡患者56例的内镜超声检查术(endoscopicultrasonography,EUS)资料进行分析研究,对EUS在良恶性胃溃疡中的诊断和鉴别诊断价值作一初步探讨。1　临床资料1.1　一般资料:本组56例胃溃疡患者,其中经病理证实为恶性者26例(男21例,女5例,平均年龄66.4岁)。良性者30例(男22例,女8例,平均年龄34.2岁)。所有患者EUS前均接受常规上消化道电子内镜检查及病理活检。1.2　方法:EUS操作技术参考SallyNorton等〔1〕。术前…     

尿菌直接计数法在诊断尿路感染中的意义

尿路感染是常见病 ,其诊断主要依靠尿菌定量培养 ,该法虽然准确 ,但费时 ,不能及时为医生提供资料。为使尿菌检测简便、快速 ,指导临床早期针对性治疗 ,我们在国内率先应用位相显微镜及尿沉渣定量计数板作尿菌快速计数来诊断尿感 ,并与尿菌培养法相比较 ,现报告如下。1　材料与方法1.1　实验材料　①尼康Ｅ - 40 0位相显微镜 (日本产 ) ;②ＦａｓｔＲｅａｄ - 10尿沉渣定量计数板 (意大利产 )。1.2　标本来源　随机留取肾内科门诊拟诊尿路感染患者132例的 134份清洁、中段尿标本 ,分别留于 2个无菌试管内 ,1管作尿菌直接计数 ,另 1管作尿菌…     

一种酸式滴定管的改进方法（摘要）

酸式滴定管是化学滴定分析实验中常用的玻璃仪器之一 ,用其进行滴定分析终点不易控制 ,当滴定接近终点时 ,需要加入微量的标准溶液至指示剂恰好变色。由于学生操作不熟练 ,常常滴过量。造成这一现象的主要原因是开启活塞的旋转角度不易控制 ,旋转角度太小 ,液体流不出来 ;旋转角度太大 ,液体流出的速度太快 ,流出量大。针对这一问题 ,我们对酸式滴定管的活塞进行了改造 ,使其在旋转角度较小时就能滴出微量的液体 ,从而准确地控制滴定终点。具体做法如下 :取下滴定管的活塞 ,用锉刀在塞孔的一端锉一条长1.7ｍｍ ,深 1.0ｍｍ由孔向外逐渐变浅…     

一例原发垂体脓肿的护理

<正> 原发性垂体脓肿甚为罕见,术前临床症状难与垂体瘤鉴别,一般术中才能确诊。1997年5月我科成功为1例原发垂体脓肿患者进行了垂体脓肿摘除术,术后随访2年.效果良好.现报告如下。1.病例介绍 患者,女45岁.主因头痛闭经泌乳2年.多饮多尿1年.双眼视物不清2月.于1997年5月8日入院.查体:体型肥胖.腋毛阴毛稀少,泌乳.尿量4000-6000毫升/日,视力左0.8.右0.4。视野左正常.右颞侧偏盲。头颅CT增强及冠状扫描病变位于鞍内,呈均匀低     

恶性腹膜间皮瘤6例报告

腹膜间皮瘤临床上比较少见 ,目前有逐渐增加的趋势。本文总括 15年来本院经治的 6例本病患者的临床特点 ,就其诊断、治疗问题进行探讨。1　临床资料间皮瘤的临床症状无特异性 ,以腹胀、腹部包块、乏力和腹泻为主 ,体征多为腹水 ,其中 2例合并胸水。Ｂ超多有阳性提示 ,如腹膜和 (或 )网膜不规则增厚 ,粘连成团或“网膜饼”样改变等。 1例无异常所见者 ,腹腔镜证实为限局性肠系膜改变。除 1例经腹水脱落细胞学诊断并由免疫组化证实外 ,其余均经腹腔镜或手术后病理证实。详见表 1。表 1　 6例恶性腹膜间皮瘤临床资料例性别年龄 (岁 )主要症状腹…     

中西医结合治疗肝移植患者合并新型冠状病毒感染（重型）1例

肝移植患者术后需终身接受免疫疗法,若合并新型冠状病毒感染则患者机体免疫功能将面临双重打击。报告在“寒湿疫”辨治体系指导下采取中西医结合方法治疗肝移植合并重型新型冠状病毒肺炎患者1例,治疗方案为西医治疗采取抗病毒、免疫抑制等疗法,重在维持患者体内免疫平衡状态;中医治疗则在此基础上正确辨识患者所处的证候阶段,针对核心病机,运用宣畅气机、清热化湿、泻肺平喘等治法,治疗后患者临床症状及肝功能明显改善,且及时阻止了病情进一步发展并缩短了康复时间。     

宽叶山蒿与艾饮片及其叶绒的特异性PCR鉴别北大核心CSCD

宽叶山蒿为艾的近源种,两者饮片或叶绒混在一起很难鉴别。该研究旨在从分子层面建立一种快速鉴别宽叶山蒿与艾的方法。根据宽叶山蒿与艾的ITS2基因测序结果,使用DNAMAN软件进行序列比对,分析得到在ITS2基因202位存在C/T单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphism,SNP);并依据此SNP位点设计特异性引物,建立并优化特异性PCR方法,以此方法进行混样检测验证可行性与稳定性。在特异性PCR条件下,使用特异性引物JNC-F与通用引物ITS3R,艾可以扩增出1条218 bp的特异条带,而宽叶山蒿不能扩增;使用特异性引物KY-F与通用引物ITS3R,宽叶山蒿可以扩增出218 bp特异条带,而艾不能扩增。建立的方法同时可以用于检测饮片及加工品叶绒,使用JNC-F/ITS3R体系可以检测宽叶山蒿中是否混有艾,艾饮片及叶绒的最低检测限均为3%;使用KY-F/ITS3R体系可以检测艾中是否混有宽叶山蒿,宽叶山蒿饮片及叶绒的最低检测限均为5%。模板检出限考察中2个体系对模板的检出限均为5 ng。构建方法可为两者质量控制提供依据,准确检测和判定市场上2种药材是否混用。