旋毛虫重组成虫丝氨酸蛋白酶抑制剂对小鼠脓毒症急性肾损伤的保护作用

目的　探讨旋毛虫重组成虫丝氨酸蛋白酶抑制剂（TsadSPI）对小鼠脓毒症急性肾损伤的保护作用。方法 BALB/c雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、TsadSPI治疗组,每组6只,共18只。模型组和TsadSPI治疗组小鼠采用盲肠结扎穿孔术（CLP）构建脓毒症急性肾损伤模型,假手术组小鼠剖腹探查,不结扎、不穿孔盲肠。术后30 min,假手术组和模型组小鼠腹腔注射100 μL PBS溶液,TsadSPI治疗组小鼠腹腔注射100 μL含有2 μg TsadSPI蛋白的PBS溶液。造模后12 h,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）水平以评价肝肾功能,HE染色观察小鼠肾脏结构改变,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中肿瘤坏死因子（TNF）?α、白细胞介素（IL）?6、IL?10、转化生长因子（TGF）?β水平,采用免疫组化染色评估肾脏组织中髓样分化因子88（MyD88）、核因子?κB p65（NF?κB p65）表达水平。结果　术后12 h,3组小鼠血清ALT（F = 41.031,P < 0.001）、AST（F = 54.757,P < 0.001）、Cr（F = 24.142,P < 0.001）和BUN水平（F = 214.849,P < 0.001）差异均有统计学意义,模型组小鼠ALT、AST、Cr和BUN水平均显著高于假手术组（P < 0.001）,而TsadSPI治疗组小鼠ALT、AST、Cr和BUN水平均显著低于模型组（P < 0.001）。HE染色结果显示,小鼠CLP术后肾脏损伤严重,TsadSPI治疗后损伤明显缓解。ELISA检测结果表明,3组小鼠血清TNF?α（F = 47.502,P < 0.001）和IL?6水平（F = 222.061,P < 0.001）差异均有统计学意义,TsadSPI治疗组小鼠TNF?α、IL?6水平较模型组显著下降（P < 0.001）;3组小鼠血清IL?10（F = 16.227,P < 0.001）和TGF?β水平（F = 52.092,P < 0.001）差异均有统计学意义,TsadSPI治疗组小鼠血清IL?10、TGF?β水平较模型组均显著升高（P < 0.001）。免疫组化染色结果表明,模型组小鼠肾脏组织内MyD88表达水平及NF?κB p65核阳性率显著高于TsadSPI治疗组。结论　TsadSPI可减少小鼠肾脏组织内MyD88表达及NF?κB p65核阳性率,进而上调免疫调节因子、下调促炎因子水平,从而保护脓毒症造成的肾脏损伤。     

旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对脓毒症诱发的小鼠心肌损伤有保护作用

目的 观察旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白（Ts-MES）对脓毒症诱发的小鼠心肌损伤的保护作用。方法 80只雄性BALB/c小鼠随机分为4组,各组20只,分别为假手术组（A组）、心肌损伤模型组（B组）、Ts-MES治疗组（C组）和地塞米松对照组（D组）。B、C、D组采取盲肠结扎穿孔术构建脓毒症诱发的心肌损伤小鼠模型,A组只行开腹探寻,不结扎和穿刺盲肠。术后40 min,A、 B组腹腔注射150 μL PBS,C组腹腔注射含20 μg Ts-MES的等量PBS,D组腹腔注射含地塞米松（0.3 mg/kg）的等量PBS。术后12 h,每组随机抽取6只小鼠进行超声心动图检测,另抽取8只用于观察72 h生存率。剩余的6只小鼠通过HE染色评价心肌病理变化,ELISA法检测血清中NTPro-BNP和cTnI水平,ELISA法和qRT-PCR法分别检测血清和心肌组织中TNF-α、IL-6、IL-10、TGF-β的表达。结果 B组小鼠的心功能指标（LVEF、LVFS、E/A）及72 h生存率较A组显著下降（P<0.001）,心肌病理损伤评分及血清中NTPro-BNP和cTnI水平明显升高（P<0.01）;与B组相比,C、D两组小鼠的心功能指标和72 h生存率明显回升（P<0.05）,心肌病理损伤评分及血清中NTPro-BNP和cTnI水平明显降低（P<0.05）。小鼠血清和心肌组织中TNF-α和IL-6水平比较：B组小鼠血清和心肌组织中TNF-α和IL-6水平较A组显著升高（P<0.001）,C、D两组较B组显著下降（P<0.05）;IL-10和TGF-β水平：C组较B组显著升高（P<0.05）,D组较B组虽有增高但无统计学差异。结论 Ts-MES可抑制促炎细胞因子的表达并促进调节性细胞因子的表达,进而保护脓毒症诱发的小鼠心肌损伤。     

源自日本血吸虫的半胱氨酸蛋白酶抑制剂对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎的影响

目的 探讨日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂（Schistosoma japonicum cysteine protease inhibitor,SjCystatin）对葡聚糖硫酸钠（Dextransulphate sodium,DSS）诱导的小鼠急性溃疡性结肠炎的抑制作用。方法 18只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组：A组为对照组,B组为肠炎组,C组为SjCystatin治疗组。A组给予蒸馏水,B、C组连续饮用3％DSS溶液7 d诱发肠炎;C组每天经腹腔注射10 μg SjCystatin,A和B组注射PBS。观察各组小鼠临床表现,进行临床疾病活动指数（Disease activity index,DAI）评分。第7天处死小鼠,观察结肠大体及组织病理改变。同时提取小鼠结肠组织匀浆,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定其上清中肿瘤坏死因子?α（TNF?α）、白细胞介素?4（IL?4）、IL?6及IL?10水平。结果 与A组[（[0.50±0.28]）分]相比,B组小鼠DAI评分[（[9.30±1.30]）分]明显增加,建模后小鼠结肠病理损伤显著,结肠组织匀浆上清中TNF?α为（321.33 ± 67.01） pg/mL,IL?6为（403.58 ± 180.51） pg/mL,均明显上升。C组小鼠DAI评分为（[6.67±1.57]）分,显著下降（F = 86.86,P < 0.01）;小鼠结肠大体及组织病理明显缓解,结肠组织匀浆上清中TNF?α为（188.14 ± 40.14） pg/mL,IL?6为（209.71 ± 48.47） pg/mL,均显著下降（F = 17.46、9.89, P < 0.01）。结论 SjCystatin对DSS诱导的C57BL/6小鼠急性溃疡性结肠炎有抑制效果。     

AcCystatin减轻卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎病变和促炎细胞因子分泌

目的 观察广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(AcCystatin)对卵清蛋白(OVA)诱导的变应性鼻炎小鼠的影响.方法 将24只8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、OVA变应性鼻炎致敏组和AcCystatin治疗组.OVA组以OVA为变应原,氢氧化铝为佐剂进行腹腔注射,第15天后OVA滴鼻建立小鼠AR模型;A...     

二烯丙基二硫对AD模型小鼠学习记忆能力和海马突触的影响

目的：探讨二烯丙基二硫（DADS）对阿尔茨海默病（AD）小鼠学习记忆能力及海马突触的影响。方法侧脑室立体定位术注射凝集态Aβ1-42制备AD模型小鼠,随机分成四组AD模型组,低中高DADS剂量组,分别灌服0、10、50和100 mg/kg/d的DADS。1个月后各组小鼠进行Morris水迷宫检测学习记忆能力、银染和电镜检测海马CA1区树突棘和突触的结构、蛋白印迹和RT-PCR检测海马内PSD95和SYP蛋白和基因的表达。结果与AD模型组相比,水迷宫检测显示中高剂量DADS组小鼠学习记忆能力增强,银染和电镜检测显示海马CA1区树突棘和突触增多,蛋白印迹和RT-PCR检测显示海马PSD95和SYP表达增多。结论随着DADS剂量的增加,AD小鼠的学习记忆能力得到改善,海马内树突棘和突触增多。     

脓毒症大鼠肾脏结构和功能的改变及核因子-κB的表达

目的:探讨脓毒症并发急性肾损伤时大鼠肾脏结构和功能的变化,以及核因子-κB(NF-κB)在肾脏组织中的表达。方法:雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组(Sham组)和盲肠结扎穿孔组(CLP组),各18只。CLP组大鼠采用盲肠结扎穿孔法建立脓毒症动物模型,Sham组除不结扎穿孔盲肠外,其余处理同脓毒症组。分别于造模后6、12和24 h观察各组心率(HR)、平均动脉压(MAP)、血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)的变化及肾脏组织的改变;免疫组织化学法检测肾脏组织中NF-κB的表达情况。结果:与相同时间点Sham组比较,CLP组6～12 h HR、MAP明显升高(P0.01和P0.05),24 h MAP降低(P0.01)。与相同时间点Sham组比较,CLP组6～24 h BUN均升高(P0.05～P0.01),24 h Cr明显升高(P0.01)。CLP各组大鼠肾小体中血管球淤血、皱缩,肾小囊腔扩大,且随病程延长,淤血、皱缩的血管球增多,且伴有肾小管上皮细胞肿胀和坏死。Sham组NF-κB位于细胞质中,着色浅;CLP组NF-κB移位进入细胞核,着色加深。结论:随脓毒症病程的延长,大鼠肾脏结构和功能损伤加重。NF-κB在细胞核内的高表达提示NF-κB的活化可能是促进肾脏结构和功能损伤的重要因素。     

舌癌永生化细胞系细胞淋巴道转移裸鼠模型的建立

目的:建立人舌癌细胞Tca8113-Ml裸鼠淋巴结转移模型,研究分析其转移的特性,为舌癌转移的研究提供动物模型.方法:4～6周龄裸鼠随机分为生理盐水对照组、TcaS113-Ml组、Tca8113组,通过足垫注射舌癌细胞,建立淋巴道转移模型.观察各组裸鼠淋巴结转移情况,进行H-E染色、上皮膜抗原(EMA)免疫组织化学显色及淋巴结舌癌细胞纯化培养.结果;淋巴结有散在或灶性鳞状上皮细胞转移,体外纯化培养的癌细胞呈上皮样生长.Tca8113-Ml组淋巴结转移率为88％,Tca8113组仅为60％.结论:足垫注射舌癌永生化细胞系Tca8113-Ml细胞系细胞建立淋巴道转移模型具有简单、稳定、转移率高等特点,为舌癌淋巴道转移的机制研究提供了一个良好动物模型.     

组织学与胚胎学的教学艺术

怎样提高组织学与胚胎学课堂教学效果,增强学生的学习积极性,是教师的一项重要任务.通过教学实践,采用比喻联想教学艺术、设问解疑教学艺术、肢体语言教学艺术等教学手段,充分培养学生的思维和认知能力,有效提高了教学质量.     

旋毛虫成虫排泄分泌蛋白抗CLP诱导的小鼠脓毒症的观察

目的 目的 探讨旋毛虫成虫排泄分泌蛋白 （AES） 对盲肠结扎穿孔术 （CLP） 诱导的小鼠脓毒症的抑制作用。方法 方法 将48只BALB/c小鼠随机分为3组, 即假手术对照组 （PBS + sham组, A组）、 脓毒症组 （PBS + CLP组, B组）、 AES蛋白治疗 组 （AES + CLP组, C组）。A组和B组于CLP术后经腹腔注射200 μl PBS, C组术后经腹腔注射含25 μg AES蛋白的等量 PBS。每组随机抽取8只, 建模后观察各组小鼠的一般情况及96 h生存率; 每组其余8只小鼠于建模后12 h取肝、 肺、 肾, HE染色观察病理改变; 以酶联免疫吸附试验 （ELISA） 检测小鼠血清中TNF?α、 IL?1β、 IL?6、 IL?10及TGF?β细胞因子水平 的变化。结果 结果 3组小鼠96 h生存率差异有统计学意义 （χ2 = 21.16, P < 0.05）; 与A组 （100%） 相比, B组小鼠生存率 （0） 降低 （P < 0.05）, 且肺、 肝及肾脏损伤明显加重; 经AES治疗后, C组存活率 （75%） 明显增加 （P < 0.05）, 小鼠肺脏、 肝脏及 肾脏病理损伤亦显著缓解。3组小鼠血清中的促炎因子TNF?α （F = 27.11, P < 0.05）、 IL?1β （F = 18.75, P < 0.05） 及IL?6 （F = 100.93, P < 0.05） 水平差异均有统计学意义; B组小鼠的促炎因子水平均高于A组 （P均< 0.05）; 经AES治疗后, C组 小鼠上述3种促炎因子水平较B组均显著下降 （P均< 0.05）。3组小鼠血清中的调节性细胞因子IL?10 （F = 10.88, P < 0.05） 及TGF?β （F = 11.37, P < 0.05） 水平差异亦有统计学意义; 经AES治疗后, C组小鼠IL?10及TGF?β分泌水平较B组亦 明显增加 （P < 0.05）。结论 结论 旋毛虫AES对CLP诱导的BALB/c小鼠脓毒症有显著的缓解作用。     

链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病肾病模型的建立及肾脏病理结构改变

目的:探讨糖尿病大鼠肾脏结构的变化,建立糖尿病肾病大鼠模型。方法:雄性清洁SD大鼠48只,随机分为实验组(DM组,n=24)和对照组(NC组,n=24)。DM组大鼠一次足量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病动物模型,NC组给予等量的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液。分别于注射后1、4、8和12周,检测体重、血糖、24 h尿量、24 h尿蛋白、肾重指数(肾脏重量/体重)和肾脏病理结构的变化。结果:与NC组相比,DM组大鼠血糖明显升高,肾重指数增加(P<0.01);随着病程的延长,24 h尿量、24 h尿蛋白量均持续升高(P<0.01)。病理切片显示,DM组大鼠肾脏重量增加、肾小体肿胀、肾小囊腔缩小、血管球内皮细胞排列紊乱和肾小体基膜增厚等。结论:STZ可诱导糖尿病大鼠肾脏结构和功能受损,成功制备糖尿病肾病大鼠模型。