瘦素对小鼠体外受精的影响

目的:观察瘦素(Leptin)对体外受精的影响。方法:采用小鼠卵母细胞体外受精的方法研究不同浓度瘦素对小鼠体外受精率的影响,仅受精时添加的瘦素对着床前各期胚胎发育率的影响。结果:①与对照组(0ng/mL组)相比,除100ng/mL组外,不同浓度瘦素对受精率均有显著影响(P<0.05)。②仅受精时添加不同浓度的瘦素对受精卵发育至4细胞胚、桑椹胚及囊胚的比率均无显著影响(P>0.05)。结论:①一定水平的瘦素可以显著提高小鼠的体外受精率,高水平瘦素反而对体外受精不利。②受精后至着床前各期胚胎的发育率与受精当时瘦素浓度无关。     

精子活动力对卵胞浆内单精子注射结局的影响

目的:探讨精子活动力与ICSI结局的关系。方法:对2001.12-2005.04在本中心完成ICSI治疗的139个周期进行分析。根据卵母细胞形态特征对928个MⅡ期卵进行分级(Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级),并分别用可获得的精子行显微穿刺。结果:用A级、B级和C级精子穿刺各级别的MⅡ期卵母细胞后,受精率在三者间无显著性差异,但高于D级精子行ICSI(P<0.05)。用A、B、C或D级精子行穿刺后一旦使卵受精,卵裂率无明显差异。卵母细胞为Ⅰ级或Ⅱ级时,用A级、B级和C级精子穿刺后,优质胚胎率在三者间无显著性差异,但高于D级精子行ICSI;卵母细胞为Ⅲ级时,用A、B级精子行ICSI后,优质胚胎率高于C、D级精子行ICSI(P<0.05)。结论:精子活动力不影响ICSI后卵裂率;不活动精子行ICSI后受精率和优质胚胎率,总体上较活动精子低。卵母细胞质量较差时,活动精子的活动力等级对优质率胚胎有一定影响。     

显微穿刺时机对卵胞浆内单精子注射结局的影响

目的:探讨寻找实施卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)最佳显微穿刺时机。方法:单纯因男方因素不孕接受ICSI治疗的146例患者的167个周期,在注射hCG后36～38h取卵。在注射hCG后37～40h行ICSI为A组,共576个卵,在注射hCG后41～48h行ICSI为B组,共449个卵。观察和比较受精率、卵裂率、优质胚胎形成率及胚胎种植率。结果:A组ICSI卵的受精率和卵裂率分别为79.51%和97.38%,与B组的受精率(80.85%)和卵裂率(97.52%)比较无显著性差异(P>0.05)。优质胚胎率在A组达76.91%,高于B组(70.06%),差异有显著性(P<0.05)。A组和B组的胚胎种植率分别为18.91%和19.11%,无显著性差异(P>0.05)。结论:注射hCG后37～48h期间行ICSI,穿刺时间不影响受精率和卵裂率。在注射hCG后37～40h行ICSI可提高优质胚胎率,但对胚胎种植率无明显影响。     

常规体外受精完全失败后补行卵胞浆内单精子注射的应用价值

目的：探讨IVF-ET周期中,对常规IVF完全受精失败的卵子补行卵胞浆内单精子注射精子（Rescue ICSI）的临床应用价值。方法：在常规IVF后18-22 h,对体外受精完全失败的12个周期、85个未受精MⅡ期卵行补行ICSI。以同时期进行ICSI的34个周期、226个MⅡ期卵为对照,比较ICSI结局。结果：补救ICSI组与对照组比较,基础内分泌指标,HCG日平均血清雌二醇和孕激素水平、子宫内膜厚度,获MⅡ期卵个数以及平均移植胚胎个数,无显著性差异。补救ICSI组受精率和卵裂率分别为78.82%、91.04%,与对照组（受精率为80.09%,卵裂率为95.58%）比较,差异无统计学意义。取卵后第3天,补救ICSI组卵裂球数≥5的优质胚胎比例占13.11%,低于对照ICSI组（73.99%）,差异有显著性（P〈0.05）。对照ICSI组妊娠率为38.24%,补救ICSI组无一例妊娠。结论：补行ICSI虽然可使常规IVF中未受精卵受精并获得胚胎,但是所得胚胎的发育潜能差,妊娠率极低,临床应用价值有限。     

超排卵着床期小鼠子宫内膜LIF表达与雌孕激素的关系

目的 研究超排卵对围着床期小鼠子宫内膜UF表达的影响及其与雌孕激素的关系,探讨超排卵是否影响子宫内膜容受性的形成.方法 将实验动物随机分为超排卵妊娠组和正常妊娠对照组,分别选取动情周期当天、合笼后发现阴道栓第2天、第4天、第6天、第8夫共五个时间点取小鼠子宫内膜,用免疫组化和原位杂交法测定小鼠子宫内膜LIF的蛋白表达和LIF mRNA的表达.同时分别测定小鼠血清雌、孕激素水平.结果 正常妊娠组小鼠LIF蛋白在围着床期子宫内膜上的表达动情周期较低,在妊娠之后开始上升,在妊娠第4天(即小鼠孕卵着床当天)达到最高峰(P<0.05),继之在子宫内膜的表达下降.在妊娠第8天降到非孕期水平:超排卵组小鼠围着床期子宫内膜LIF蛋白随着妊娠天数而表达增加,在妊娠第2天达到最高峰(P<0.05),继之在子宫内膜的表达下降,在妊娠第8天降至非孕期水平.超排卵组与对照组相比较,其在妊娠第2天的表达明显高于对照组(P<0.05),在妊娠第4天的表达明显低于对照组(P<0.05);超排卵组和对照组小鼠血清雌、孕激素浓度均随妊娠天数的增加逐渐升高.在各时间点超排卵组的雌、孕激素水平明显高于对照组(P<0.05).小鼠子宫内膜LIF蛋白的表达与雌激素水平在一定范嗣内成正相关,超过一定临界水平后呈负相关(P<0.05),而与孕激素未发现有相关性(P>0.05).结论 超排卵可能对小鼠围着床期子宫内膜LIF蛋白的表达有影响,使其表达峰值提前,由此推测影响子宫内膜容受性的建立;体内雌激素水平与同着床期子宫内膜LIF蛋白的表达有相关性,但尚不能排除孕激素水平与其有相关性,说明LIF蛋白的表达与雌激素的调控有关,并且可能存在一定的数量关系.     

转化生长因子-β1在多囊卵巢综合征患者卵泡液中的表达及其对卵巢黄素化颗粒细胞miR-224表达水平的影响

目的通过检测多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)患者排卵前卵泡液TGF-β1的表达水平并研究TGF-β1在体外对PCOS患者卵巢黄素化颗粒细胞miR-224表达的影响,初步探讨TGF-β1在PCOS卵泡发育微环境中的作用机理。方法纳入接受IVF-ET治疗的PCOS患者及同时期卵巢反应性正常的非PCOS患者(对照)各16例,收集来自直径17mm以上卵泡、不含血液及冲洗培养基的卵泡穿刺液,采用ELISA方法检测上清液中TGF-β1水平。同时收集黄素化颗粒细胞进行分离、纯化和原代培养,用100ng/m L TGF-β1体外刺激颗粒细胞48h,采用实时定量PCR方法检测颗粒细胞miR-224的表达水平变化。结果不含卵子的卵泡液中TGF-β1浓度在PCOS组和对照组间无统计学差异[(206.67±16.19)mg/m L vs·(166.16±12.28)ng/m L,P>0.05)];含有卵子的卵泡液中TGF-β1浓度在PCOS组中显著低于对照组[(201.56±6.45)ng/m L vs·(404.90±51.29)ng/m L,P<0.01)]。TGF-β1在体外作用于卵巢黄素化颗粒细胞后,实时定量PCR检测结果显示PCOS组与对照组的miR-224的相对水平都较本组内不用TGF-β1刺激者增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PCOS患者卵巢颗粒细胞所处微环境中TGF-β1表达水平的异常可能通过影响颗粒细胞miR-224的表达、进一步干扰卵巢颗粒细胞的功能,其具体作用及机理还有待进一步研究探讨。     

输卵管积水抽液及输卵管结扎对体外受精-胚胎移植临床结局的影响

目的评价输卵管积水抽液及输卵管结扎对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)临床结局的影响。方法回顾性分析2010年8月至2011年8月在四川大学华西第二医院生殖中心因输卵管因素不孕症行IVF-ET治疗的患者资料201例,共237个周期。分为3组,A组:输卵管积水抽液组,共105个周期;B组:输卵管积水近端结扎组,共30个周期。C组:输卵管阻塞且无积水组,共102个周期。结果 3组患者超排天数、促性腺激素(Gn)总量、人绒毛膜促性腺激素(HCG)日内膜厚度、HCG日孕酮(P)水平、移植数、卵裂率、种植率、生化妊娠率、多胎妊娠率、流产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。A组HCG日雌二醇(E_2)水平、获卵数、获胚数均低于C组,组间差异有统计学意义(P<0.05),B、C组间差异无统计学意义(P>0.05);A组受精率、临床妊娠率小于B组及C组,差异有统计学意义(P<0.05),B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论输卵管积水行抽液术并未显著改善输卵管积水引起的低妊娠率,但可以降低流产率;输卵管结扎不影响卵巢功能,并能显著提高妊娠率,降低流产率。     

长方案中短效促性腺激素释放激素激动剂使用时间对临床结局的影响

目的 探讨短效曲普瑞林长方案中不同卵泡大小停用促性腺激素释放激素激动剂（GnRH-a）方案的临床效果。 方法 回顾性分析2012年11月－2013年1月期间,行体外受精/卵胞浆单精子注射助孕,年龄＜40岁妇女,排除卵巢储备功能低下、多囊卵巢综合征以及既往有卵巢手术和卵巢反应不良史者,共收集358个周期的临床资料,根据停用GnRH-a时主导卵泡大小分为＜14 mm和≥14 mm两组。 结果 早期停用GnRH-a组患者控制性促排卵（COH）中促性腺激素用量及使用时间高于晚期停用GnRH-a组（P＜0.05）;但两组患者HCG日雌二醇、孕酮、早发孕酮峰发生率及获卵数、优胚数、胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率和活产率等临床结局差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 对于接受短效GnRH-a长方案患者,COH过程中表现为卵巢慢反应者早期停用GnRH-a可有效维持垂体降调节,且不影响临床妊娠结局。     

胰岛素样生长因子及其结合蛋白在围着床期的作用

在人类女性生殖系统中 ,胰岛素样生长因子 (IGFs)和 IGF结合蛋白 (IGFBPs)通过自分泌、旁分泌机制在组织和细胞水平发挥作用。本文就其在围着床期的调节作用综述如下。1　 IGF系统概况胰岛素样生长因子 (IGF)系统包括 IGF- I和 IGF- II、IGF-BPs(IGFBP- 1到 - 6 )、IGF受体和 IGFBP水解酶。IGF- I和 IGF-II在局部发挥有丝分裂原作用 ,还可诱导细胞分化。二者大多数生物活性由 I型受体介导 [1 ] 。IGFBPs是一组同源结合蛋白 ,可竞争性结合 IGF受体 ,调节 IGF生理活性。一些因素如细胞表面联合、ECM联合、磷酸化…     

孕晚期小鼠脾脏巨噬细胞抗原提呈功能的改变

目的　研究孕晚期 Balb/ c小鼠脾脏巨噬细胞抗原提呈功能的改变。方法　分离孕晚期小鼠脾脏巨噬细胞 ,以动情期小鼠作为对照。通过诱导迟发超敏反应和体外淋巴细胞抗原特异性转化实验检测巨噬细胞使机体初始 T致敏的能力以及诱导致敏 T细胞增殖的能力。结果　将充分摄取和结合了抗原 HGG或 Pla- Ag的孕晚期小鼠脾脏巨噬细胞注射到动情期小鼠腹腔使之致敏 ,再用相同抗原注射到小鼠足底诱发的迟发超敏反应强度显著低于动情期小鼠 (P<0 .0 5 )。当孕晚期小鼠脾脏巨噬细胞被当作抗原提呈细胞时 ,体外用人γ球蛋白抗原或胎盘抗原诱导致敏的正常小鼠的 T细胞增殖强度也显著低于动情期小鼠 (P<0 .0 5 )。孕晚期小鼠脾脏巨噬细胞还能显著抑制动情期小鼠脾脏巨噬细胞刺激致敏 T细胞增殖的能力。结论　孕晚期 Balb/ c小鼠脾脏巨噬细胞的抗原提呈功能显著受到抑制