高表达蛋白hSav1对人胚肾HEK293增殖能力的影响

Objective To elucidate the effects of human Salvador 1 (hSav1 ) on cell proliferation of human embryonic kidney cell line HEK293. Methods The plasmid CFP-N1-hSav1 was constructed and transfected into HEK293 cells with lipofectamine 2000. The transfection efficiency was detected by fluorescent microscopy. The effects of hSav1 on cell proliferation were measured by MTT and BrdU incorporation. Results The transfection efficiency was about 70% -80%. The MTT results showed that the inhibition rate of cell proliferation in transfected group at the 12th, 24th, 36th, and 48th h was 2% , 5% , 15% , and 23% , respectively;while that in the control group was 2% , 3% , 2% , and 2% respectively. The BrdU incorporation revealed that the BrdU incorporation rate in transfected group (12. 9 ±5. 3)% was significantly lower than in control group (27.3±3.8)% (P<0.05). Conclusion hSav1 is a newly identified protein that can cause cell proliferation inhibition in HEK293 cells.     

枸杞多糖对大鼠小肠缺血再灌注氧化应激的抑制作用

目的:探讨枸杞多糖对大鼠小肠缺血再灌注氧化损伤的影响。方法:将30只Wistar大鼠随机分为3组(假手术组、模型组、枸杞多糖组),每组10只。枸杞多糖组:枸杞多糖按6 g.kg-1 ig,假手术组和模型组予同体积生理盐水,连续5 d后,检测各组大鼠小肠黏膜中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6水平(IL-6),以及小肠黏膜和血液中的抗氧化物酶活力和丙二醛(MDA)的含量。结果:模型组与假手术组比较,大鼠小肠黏膜中TNF-α,IL-6水平明显升高(P<0.01),小肠黏膜和血液中抗氧化酶活力明显下降(P<0.01),MDA水平明显升高(P<0.01);而枸杞多糖组与模型组比较,大鼠小肠黏膜中TNF-α,IL-6水平明显下降(P<0.01),抗氧化酶活力明显升高(P<0.01),MDA水平明显下降(P<0.01)。结论:枸杞多糖对大鼠小肠缺血再灌注氧化损伤有明显的保护作用。     

TAT-N24穿膜融合多肽的表达与鉴定

目的 表达并纯化TAT-N24穿膜融合多肽,初步探讨其生物学活性.方法 构建pTAT-HA-N24原核表达载体,在BL21大肠埃希菌中表达并纯化TAT-N24融合多肽,利用SDS凝胶电泳检测纯化蛋白的纯度,利用免疫细胞化学和流式细胞术检测TAT-N24融合蛋白的穿膜能力和生物学活性.结果 在原核表达系统中成功构建并表达纯化了TAT-N24穿膜融合多肽,其在6 mol/L尿素和DMSO中均具有较好的溶解性,纯化的融合多肽经SDS凝胶电泳分析未见明显杂蛋白混入,利用免疫细胞化学染色可见TAT-N24处理结肠HT29细胞12 h后90%以上的细胞中可检测到TAT-N24,流式细胞术检测细胞周期可见TAT-N24能够有效地诱导细胞周期阻滞,抑制结肠癌细胞生长.结论 TAT-N24具有高效的穿膜能力,并能有效抑制结肠癌细胞增殖,可望开发成为有效的肿瘤分子治疗药物.     

全反式维甲酸对急性前髓性白血病细胞HL60生长的影响

摘要目的观察全反式维甲酸（ATRA）对急性前髓性白血病细胞HL60生长的影响,探讨其抑制肿瘤生长的作用方式。方法建立急性前髓性白血病细胞HL60的裸鼠皮下实体瘤模型,经尾静脉隔日给予ATRA,第14天测量肿瘤大小;体外实验中,用免疫荧光法检测分化相关抗原CD11b的表达,观察ATRA对HL60分化水平的影响,用碘化丙啶（PI）染色法观察ATRA对HL60的细胞周期的影响。结果ATRA治疗14 d后,ATRA组瘤体体积为（0.5±0.6） cm3,对照组为（1.9±1.7） cm3（P＜0.05）;体外实验中,ATRA处理HL60细胞72 h后,细胞分化相关抗原CD11b的表达为（27.3±3.2）%,对照组（5.1±3.2）%（P＜0.01）;ATRA处理HL60细胞24 h后,检测细胞周期分布比例,ATRA处理组静止期（G0/G1期）细胞比例为（57.6±1.5）%,对照组（43.0±2.0）%（P＜0.01）。结论ATRA能够有效抑制HL60实体瘤的生长;体外实验证实,ATRA抑制HL60生长的作用机制是诱导细胞G0/G1期阻滞,诱导细胞分化。     

共转染CDK1、CDK2 siRNA对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响

目的 研究共转染CDK1、CDK2 siRNA同时抑制CDK1、CDK2蛋白表达对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响,探讨细胞周期主要调控分子在肿瘤细胞凋亡中的作用.方法 以人宫颈癌细胞株HeLa细胞为研究对象,用脂质体lipofectamine2000同时转染CDK1 和CDK2 siRNA.在转染后48、60 h收集细胞,用Western印迹检测CDK1、CDK2蛋白的表达,AnnexinV/PI检测转染细胞的凋亡,流式细胞术DNA含量检测分析细胞周期.转染细胞进行瑞氏-姬姆萨染色(Wright-Giemsa)后在显微镜下观察其形态变化.结果 共转染CDK1、CDK2 siRNA后48和60 h,Western 印迹结果显示CDK1和CDK2蛋白的表达都同时降低.共转染CDK1、CDK2 siRNA后,细胞周期S期和G2/M期比例与对照相比有明显增加;共转染细胞经瑞氏-姬姆萨染色后在显微镜下可见双核或多核细胞增多;AnnexinV/PI检测结果显示共转染CDK1、CDK2 siRNA的细胞在48和60 h细胞凋亡率与对照相比有显著的升高.结论 siRNA 干扰导致的CDK1、CDK2表达同时降低不仅导致细胞周期S期和G2/M期的阻滞,也诱导了肿瘤细胞的凋亡.     

桔梗叶醇提工艺优化及其不同部位镇咳祛痰活性研究

目的 优化桔梗叶醇提工艺并研究其醇提物不同萃取部位的镇咳祛痰活性。方法 在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、液料比、提取时间、提取温度为考察因素,综合评分（浸膏得率、总黄酮提取量、总皂苷提取量得分）为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优化桔梗叶醇提工艺,并验证。实验设空白组[A组,等体积0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）,模型组（B组,等体积0.5%CMC-Na）,强力枇杷露组（C组,5.65 mL/kg）,石油醚萃取部位组（D组,360 mg/kg）,二氯甲烷萃取部位组（E组,6.67 mg/kg）,乙酸乙酯萃取部位组（F组,228 mg/kg）,正丁醇萃取部位组（G组,106 mg/kg）,水萃取部位组（H组,449.54 mg/kg）。各组小鼠予相应药物或0.5%CMC-Na灌胃,每天1次,连续7 d。以氨水引咳法复制咳嗽小鼠模型,记录小鼠引咳后3 min内的咳嗽次数和咳嗽潜伏期;采用酚红法测定酚红排泌量;苏木素-伊红（HE）染色,观察小鼠肺组织病理形态。结果 桔梗叶最佳醇提工艺为,乙醇体积分数44%,液料比23∶1(mL/g),56℃提取2次,每次43 min;此...     

中药溻渍联合红外线治疗类风湿关节炎的疗效观察

目的 观察中药溻渍方联合红外线理疗灯治疗风寒湿痹证类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的疗效及预后。方法 选取2021年1月—2022年4月张家口市中医院收治的104例风寒湿痹证RA患者作为研究对象,按随机数字法分为对照组和治疗组各52例,对照组给予常规西药治疗,治疗组在对照组基础上给予自拟中药溻渍方联合红外线理疗灯治疗,比较两组临床疗效、临床症状改善情况、疼痛程度(VAS)评分、类风湿因子(rheumatoid factor, RF)、血沉(erythrocyte sedimentation rate, ESR)、D-二聚体(D-D)、炎症因子水平[C反应蛋白(C-reaction protein, CRP)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)]、疾病活动程度(DAS28)评分、简化疾病活动性指数(simplified disease activity index, SDAI)、健康评价问卷评分(health assessment q...     

沟通技巧在围手术期访视应用的探讨

目的 探讨研究沟通技巧在围手术期访视应用中的效果.方法 对手术室访视护士进行沟通预防的系统培训、实施和督导.对培训前后护理质量如访视率、患者产生焦虑和抑郁、患者整体满意度进行比较.结果 访视率明显提高(P＜0.01),患者产生焦虑和抑郁明显降低(P＜0.05),患者整体满意度明显提高(P＜0.05).结论 沟通技巧在围手术期访视的应用,可明显提高护理质量,具有积极的推广意义.     

沟通技巧在围手术期访视应用的探讨

目的 探讨研究沟通技巧在围手术期访视应用中的效果.方法 对手术室访视护士进行沟通预防的系统培训、实施和督导.对培训前后护理质量如访视率、患者产生焦虑和抑郁、患者整体满意度进行比较.结果 访视率明显提高(P＜0.01),患者产生焦虑和抑郁明显降低(P＜0.05),患者整体满意度明显提高(P＜0.05).结论 沟通技巧在围手术期访视的应用,可明显提高护理质量,具有积极的推广意义.     

胃炎灵治疗老年胆囊术后消化不良的疗效观察

[目的]观察胃炎灵治疗老年胆囊术后功能性消化不良的临床疗效。[方法]将128例患者随机分为治疗组64例,用自拟方胃炎灵治疗;对照组64例,用复方消化酶治疗,疗程均为4周。[结果]治疗组总有效率为93.8%,对照组为77.1%,治疗组优于对照组（P〈0.05）。[结论]胃炎灵治疗老年胆囊术后消化不良的临床疗效满意。