激光共聚焦显微术在检测脑胶质瘤蛋白共表达中的应用

目的 了解ephrinB2及其受体EphB4蛋白在脑胶质瘤中的表达规律，并评价激光共聚焦显微术在检测脑胶质瘤组织和细胞蛋白共表达中的应用性。方法 利用双标免疫荧光分别检测EphB4/ephrinB2蛋白与GFAP或CD34蛋白在35例脑胶质瘤新鲜标本及人脑胶质瘤细胞系CHG-5、SHG-44中的共表达状况，以Leica SP2激光共聚焦显微镜观察、摄像并分析。结果 EphB4或ephrinB2蛋白与CD34蛋白可共表达于部分间质血管，EphB4和ephrinB2在肿瘤血管的表达主要定位于血管内皮细胞。在瘤组织内肿瘤细胞及两种细胞系，亦可见EphB4或ephrinB2蛋白与GFAP的共表达。SHG-44细胞中EphB4或ephrinB2红色荧光强度强于CHG-5细胞，而CHG-5细胞GFAP绿色荧光强度较之SHG-44细胞则明显增强。结论 (1)脑胶质瘤间质可能存在不同免疫表型的血管内皮，提示肿瘤血管的不同属性；(2)EphB4/ephrinB2蛋白表达可能与肿瘤细胞的分化程度有关；(3)双标免疫组化结合激光共聚焦显微术是一种可用于观测肿瘤蛋白共表达的良好方法。     

pSilence APE1抑制骨肉瘤生长的实验研究

的观察脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶（APE1）siRNA表达载体pSilence APE1对骨肉瘤裸鼠移植瘤生长的抑制作用,探讨APE1与骨肉瘤发生、发展的关系。方法人骨肉瘤细胞9901荷瘤裸鼠20只随机分为2组：脂质体对照组（n=10）和pSilence APE1治疗组（n=10）。在实验第12天处死动物,计算抑瘤率。免疫组化SP法检测骨肉瘤细胞APE1蛋白的表达和肿瘤微血管密度、增殖指数变化;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡的变化。结果pSilence APE1处理组肿瘤细胞APE1表达显著降低,抑瘤率为38．23％,肿瘤微血管密度和增殖指数明显低于对照组,而肿瘤凋亡显著增加。结论靶向敲低APE1表达能显著抑制骨肉瘤的生长。     

原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的分析***

背景：近年来,有观点认为原发性肝癌的发生机制可能为肝干细胞分化不全或分化异常所致。目前,肝干细胞研究正处于起步阶段,对人原发性肝癌的“干细胞起源”学说尚需进一步验证。 目的：观察原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的活化、分布、来源和免疫表达特征。 设计：观察对比实验。 单位：解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心。 对象： 实验于2003-09/2004-07在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心完成,选用94例肝细胞癌和12例肝内胆管细胞癌和10例混合型肝癌石蜡包埋组织,同时选用5例肝硬化和4例正常肝组织作为实验对照,均取自病理科存档资料。肝癌组织均为患者首次肝癌切除手术时采取,包括肿瘤组织和癌旁组织,患者均无化疗和放射治疗史,并对受检项目知情同意。实验主要抗体均购自Santa Cruz公司。 方法： 采用苏木精-伊红染色、免疫组织化学SP方法（检测的免疫标志有鼠抗人细胞角蛋白19单克隆抗体、鼠抗人细胞角蛋白7单克隆抗体、鼠抗人细胞角蛋白8&18单克隆抗体、鼠抗人c-kit单克隆抗体、鼠抗人Thy-1单克隆抗体、鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体）观察各病变类型肝干细胞免疫标志表达情况。 主要观察指标：各病变类型肝干细胞免疫标志表达情况。 结果：在原发性肝癌不同病理组织类型中干细胞免疫标志均有不同程度的表达,均可观察到肝干细胞向肝癌细胞的转化,以混合型肝细胞癌中肝干细胞免疫表型表达率最高(P < 0.05)。正常组和肝硬化组干细胞免疫表型特征为阴性。　 结论：不同病理组织类型的肝癌组织中均存在不同分化状态和不同来源的肝干细胞。     

多肿瘤标志物蛋白芯片检测中f-PSA及PSA在恶性肿瘤中的诊断价值

目的:探讨多肿瘤标志物蛋白芯片中游离前列腺特异性抗原(f-PSA)及前列腺特异性抗原(PSA)在各组人群中的表达及与其它指标的伴随情况及其临床意义。方法:收集我院可供分析的25076例多肿瘤蛋白芯片检测结果,分析f-PSA、PSA在各种人群、各种肿瘤患者升高情况,以及f-PSA、PSA升高伴随其他检测指标升高和在肿瘤中的分布。结果:f-PSA、PSA在恶性肿瘤患者中明显升高,且前列腺癌最高(56.02%),其次为大肠癌(6.03%);f-PSA、PSA伴随升高指标以CEA最为常见,其次为CA125、CA199、CA242,f-PSA;PSA/CEA伴随最常见于肺癌(44.77%),其次为胃癌(43.75%),f-PSA、PSA/CA125伴随最常见于胰腺癌(66.67%)和肝癌(45.95%)。结论:f-PSA、PSA单项升高对前列腺癌的诊断具有较高价值,f-PSA,PSA伴随或联合CEA、CA125升高更常见于肺癌及胰腺癌。     

CT诊断肾神经节瘤一例

患者女,19岁,因体检发现左肾肿瘤6d入院。患者无明显腰腹部疼痛,无肉眼血尿,血常规RBC、WBC正常,查体腹部未触及包块,超声检查提示左肾占位,肿瘤可能性大。患者于入院24h后行CT检查,提示平扫时左侧肾脏前上方巨大低密度肿块影,大小约12.0cm×9.0cm×10.5cm,CT值约29HU,与左肾关系密切,左肾明显受压,左侧肾上腺、胰腺受压上移(图1);     

多发脊髓血管母细胞瘤一例

患者男,23岁。因"双上肢麻木、左下肢疼痛1年"入院。专科检查示:左侧上平胸骨柄、下平脐感觉减退。神经电生理检查:双侧BAEP正常;右侧正中神经、尺神经刺激SEP均异常(右侧N20波幅较左侧明显下降);右侧腓总神经刺激SEP异常(右侧P1波幅较左侧明显下降)。MRI扫描(图1,2)提示:全段脊髓增粗,四脑室正中孔区域及全段脊髓呈囊状长T1长T2信号改变,其内可见细线状分隔,颈段脊髓内可见血管流空信号,增强见囊壁多发结节状明显均匀强化影,以正中孔最明显。     

RAI16基因真核表达载体的构建及在HepG2中的表达

72 h后,RAI16基凶在蛋白水平的表达逐渐增高,而AFP的表达逐渐下调.结论 成功构建了真核表达载体pEGFP-C1-RAI16,并在HepG2细胞中进行了表达.     

肝细胞肝癌DNA损伤修复基因MGMT的表达及其与p53的关系

目的 探讨原发性肝细胞肝癌（HCC）中O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O^6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT）的表达与临床病理特征以及突变型p53（mutant p53,mtp53）表达的关系。方法 应用免疫组化S-P二步法分别检测10例正常肝组织，40例结节性肝硬化组织和103例人原发性肝细胞性肝癌组织中MGMT和mtp53表达情况。结果 MGMT在正常肝组织，肝硬化和HCC组织中均可表达，正常组表达显著高于肝硬化组（P〈0.01）和HCC组（P〈0.05），同时HCC组的平均得分又明显高于肝硬化组（P〈0.05）。在HCC组织中MGMT表达与mtp53呈显著负相关（P〈0.01）。结论 MGMT表达的改变与P53基因突变存在密切联系，对于HCC的发生，发展可能有重要作用，MGMT在肝组织中表达的改变可能作为肝肿瘤易感性标志物。     

APE1RNA干扰提高骨肉瘤中子放疗敏感性的研究

目的应用pSilence APE1“敲低”HOS细胞APE1的表达，观察pSilence APE1联合中子放疗对HOS细胞生长抑制的协同作用并探讨其机制。方法用脂质体将pSilence APEI质粒导人HOS细胞，“敲低”HOS细胞中APE1的表达，同时给予^252Cf中子射线照射，MTT法绘出细胞存活曲线，克隆形成分析测算D37值和剂量修饰系数（DMF），彗星分析法检测照射后细胞的DNA损伤情况，并用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果由克隆形成分析得到对照质粒与转染pSilence APE1质粒的HOS细胞经^257Cf中子照射后的D37值为3．02和2．42，DMF值为1．43。以上2组HOS细胞以200、500和1000cGy3个剂量^252Cf子射线照射后，碱性彗星尾力矩分别是6．146±0．741、19．918±1．574、31．885±1．192和7．997±0．542、25．238±1．185、39．191±1．052（P〈0．01）；细胞凋亡率是4．00、5．91、9．63和5．68、7．55、13．51（P〈0．05）。结论pSilence APE1能显著提高HOS细胞对中子射线的敏感性，促进DNA损伤和细胞凋亡。pSilence APE1基因联合中子放疗可能成为今后骨肉瘤治疗的新方法。     

骨肉瘤P-糖蛋白表达及其与预后的研究

人体多种肿瘤均有Ｐ ｇｐ的高表达 ,Ｐ ｇｐ介导的多药耐药性(即经典多药耐药性 ) [1,2 ] 可能是肿瘤化疗不敏感的重要原因 ,也是影响预后的重要因素。因此我们用ＳＰ法检测 80例骨肉瘤中Ｐ ｇｐ的表达 ,以期探讨其与骨肉瘤临床病理及预后的关系。1　材料与方法1.1　临床资料　　选取我院 196 8～ 1993年间长骨中央型骨肉瘤 80例 ,其中男性 5 2例 ,女性 2 8例 ,男女比约为 2∶1,年龄 11～ 6 8岁 ,平均 2 3岁 ;肿瘤大小 5～ 2 5ｃｍ ,平均 10ｃｍ ,其中手术切除标本 75例 ,活检标本 5例 ,均为术前未化疗标本。组织学分级参照Ｐｒｉｃｅ三级法…