针刺对脊髓全横断SD大鼠BDNF基因表达的影响

目的探讨电针刺对脊髓全横断成年SD大鼠脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic fac-tor,BDNF)mRNA在横断脊髓上端、下端、大脑皮质和比目鱼肌中的表达及变化的影响。方法建立40只SD大鼠脊髓全横断损伤模型,雌雄不限,随机分为针刺1d、3d、7d、14d和手术1d、3d、7d、14d组,每组5只,选"足三里 悬钟"及"三阴交 伏兔"2组穴位隔天交替针刺。采用RT-PCR技术检测各时间段脊髓横断上、下端、大脑皮质、比目鱼肌四部位中BDNF mRNA的表达。结果针刺14d组比目鱼肌中BDNF mRNA较手术14d组显著增加(P<0.05)。结论电针刺可促进BDNF在损伤部位所支配的肌肉-靶组织中的表达。     

人胚胎脊髓神经干细胞生长及分化过程中BDNF的作用研究

目的研究脑源性神经营养因子对人胚胎脊髓神经干细胞生长和分化的影响。方法孕20周水囊引产胎儿标本经家属同意捐赠,分离培养脊髓神经干细胞,分为正常对照组、BDNF蛋白组、BDNF抗体封闭组,计数神经球数目并以MTT法检测细胞活力,免疫组织化学检测NeuN和GFAP的表达情况并进行计数。结果与对照组相比,BDNF蛋白组神经球数目或MTT值均无明显变化,BDNF抗体封闭组的神经球数目和MTT值有明显减少(P<0.05);BDNF蛋白组NeuN阳性细胞数明显多于对照组(P<0.05),GFAP阳性细胞数与对照组相比有明显减少(P<0.05),BDNF抗体封闭组NeuN或GFAP阳性细胞数均少于对照组(P<0.05)。结论外源性BDNF可促进人胚胎脊髓神经干细胞向神经元样细胞分化;内源性BDNF在人胚胎脊髓神经干细胞的增殖分化过程中发挥重要作用。     

小肠缺血时间与GRP78表达的相关性研究及意义

目的 研究不同缺血时间下小肠组织细胞凋亡程度与GRP78表达量之间的关系。 方法 选用4周龄雌性SD大鼠,随机分为对照组,损伤组（缺血20、40、60、80和100 min）,于再灌注6 h后处死,检测血清中DAO的表达水平,取小肠组织检测细胞凋亡情况以及GRP78表达情况,并观察大鼠两周内的存活情况。 结果 与对照组相比,损伤组GRP78的表达量随着缺血时间的延长逐渐升高,在80 min时达到峰值;与损伤组缺血80 min时相比,在100 min时GRP78 mRNA表达水平显著下降;与损伤组缺血80 min时相比,在100 min时GRP78蛋白表达水平略有下降;与对照组相比损伤组随着缺血时间的增加,细胞凋亡程度逐渐增加;与对照组相比,缺血时间越长大鼠的两周存活率越低。 结论 随着缺血时间的延长,大鼠小肠组织细胞绒毛层及粘膜层的细胞凋亡程度逐渐增加;在80 min之前随着大鼠小肠缺血时间的延长,GRP78表达水平逐渐升高,100 min时虽然小肠组织损伤程度较80 min时增大,但GRP78表达水平较80 min时降低,GRP78的表达水平与不同缺血时间小肠组织细胞凋亡程度密切相关。     

消化道内的NKA和NKB

神经激肽A(neurokinin A，NKA)又名神经介素L(neuromedine L)、K物质(substance K，SK)，神经激肽B(neurokinin B，NKB)又名神经介素K(neuromedine K)，是Kimuna等于1983年首先从猪脊髓中分离出来的两种含10个氨基酸的神经肽，属于速激肽家族的成员。自发现以来，许多学者对它们的生物学活性、药理学特征、生物合成、     

神经激肽A在大鼠胃发育中的定性定量分析

本研究用免疫组织化学PAP法和图像分析系统研究大鼠胚胎13d至成年胃中神经激肽A(NKA)的表达及变化。结果显示:胚胎14d,胃的肌间丛出现NKA免疫阳性反应,随发育相继在环肌、纵肌、粘膜下层、固有膜、粘膜肌及粘膜丛内出现NKA的表达,生后30d时NKA在胃的表达已具备成年鼠的分布特征。结果提示, (1)NKA在胃的表达变化主要在生前1周~生后4周内,其表达变化有两个关键时期,即生前1周~生后1周和生后1月末; (2)NKA对大鼠胃的发育可能具有重要的作用,可能与胃功能的建立密切相关。     

NGF在人胚胎脊髓中的表达及变化

目的探讨神经生长因子(NGF)在人胚胎脊髓胸段中的表达及变化.方法从各时间段(6周、8周、10周、3月、4月、5月、6月流产胚胎中取出脊髓后,用免疫组织化学和RT-PCR方法检测NGF的抗原和mRNA表达情况及变化规律.结果免疫组织化学检测到在胸段脊髓的灰质处有NGF-IR的分布;RT-PCR均检测到NGF的mRNA在胸段脊髓表达,从6周开始上调,在8周有一个高峰,10周~6月整体趋于稳定.结论在人早、中期胚胎脊髓中NGF均有表达,说明胚胎脊髓发育和NGF存在一定的关系.     

中、重度负重游泳运动训练对肾上腺Cyclin D1表达的影响

目的研究长期游泳训练后大鼠肾上腺Cyclin D1的表达变化。方法成年SD大鼠分为中度负重(占体重3%)和重度负重(占体重5%)游泳训练2组。大鼠在水槽内进行6周训练,每天1h。6周时,取肾上腺用RT-PCR检测Cyclin D1表达水平,用t检验进行统计分析。结果重度负重导致肾上腺Cyclin D1表达上调,与中度负重组比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论重度游泳训练明显上调肾上腺Cyclin D1水平,提示Cyclin D1在游泳训练的肾上腺发挥有作用。     

pcDNA3/BDNF真核表达载体的构建☆

背景：脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)作用广泛,但属于生物大分子,不能通过血脑屏障。基因治疗是目前解决脑源性神经营养因子给药途径最有希望的方案。 目的：拟构建大鼠脑源性神经营养因子基因真核表达载体。 方法：采用反转录聚合酶链式反应技术从SD大鼠脑组织提取总RNA,扩增脑源性神经营养因子基因cDNA序列,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3中,分别取10 g质粒pcDNA3和纯化的目的基因分别进行EcoR Ⅰ、xho Ⅰ双酶切。将目的基因片段和pcDNA3载体连接,转入感受态DH5α细胞中,经酶切鉴定后送上海博亚生物技术有限公司测序。 结果与结论：RT-PCR产物为749 bp的特异片段,重组质粒pcDNA3/BDNF酶切后产生 749 bp和5 446 bp的片段,DNA测序证实749 bp片段的碱基序列与大鼠脑源性神经营养因子基因序列完全一致,成功构建了pcDNA3/BDNF重组质粒。     

脊髓全横断大鼠模型的构建☆

背景：脊髓全横断模型在造模时常难以保证神经纤维的完全离断。 目的：构建大鼠脊髓全横断损伤模型。 方法：将大鼠随机分为模型组和假手术组。模型组构建脊髓T10节段全横断模型;假手术组动物仅打开椎管与硬脊膜而后缝合,但不损伤脊髓。建模后1,3,5,7 d分别进行BBB评分以评估后肢运动功能,检测其体感诱发电位和运动诱发电位来评估神经传导通路的完整性,并行形态学观察来评估脊髓肉眼观病理形态。 结果与结论：与假手术组相比,模型组大鼠在建模后1,3,5,7 d时,其BBB评分降低(P < 0.01),未检测出体感和运动诱发电位。形态学观察结果显示模型组大鼠脊髓完全横断,而假手术组脊髓形态完整。结果提示实验成功构建了大鼠脊髓全横断模型。