原核细胞表达抗CD_3工程抗体

用RT—PCR方法 ,从分泌抗人CD3抗体的杂交瘤细胞中扩增抗体的重链和轻链可变区基因 ,并运用重叠延伸拼接法 (SOE)将其连接成单链抗体 (ScFv)基因 ,并克隆于带有Tac启动子的原核表达载体中 ,用斑点杂交方法筛选出阳性克隆。重组子在E .coilB1 2 1 (DE3)中获得高效表达且具有活性的单链抗体。     

基于Web of Science和CNKI数据库的废水中新冠病毒检测文献计量分析

目的 为清晰客观了解废水中新冠病毒检测相关领域的研究现状。方法 基于文献计量与图谱可视化等方法,以Web of Science和CNKI数据库中2001-2022年共计390篇中外文文献为来源,对新冠病毒在废水中检测的相关文献进行梳理分析。结果 (1)相关研究主要集中于2020-2022年,即全球COVID-19病毒爆发后;(2)我国在该领域发文数量最多,处于世界领先水平,其次为美国、印度等国家;(3)相关领域科研团队交流强度较小,作者发文量整体不高,作者合作群较少,研究机构中,中国科学院、清华大学、东华大学、中国科学院大学等贡献较大;(4)高频关键词分析显示,目前关于废水中新冠病毒的检测热点主要集中在病毒的环境影响及其迁移转化。结论 研究宏观角度揭示了该领域的研究现状,展示研究热点以及未来的发展趋势,为废水新冠病毒检测相关领域研究提供了文献支持。     

泌尿生殖道中阴道毛滴虫的检测

目的:探讨适合于检测男、女两性泌尿生殖道中阴道毛滴虫(TV)的取材方式和检验方法,以提高TV的阳性检出率。方法:对211例患者的尿道(阴道)分泌物和尿液采用湿片观察、培养法和湿片+培养法分别进行TV的对照检测。结果:在138例男性患者中泌尿生殖道共检出TV 18例(13.0％),在73例女性患者中泌尿生殖道共检出TV 49例(67.1％)。男性患者尿液和尿道分泌物培养法对TV的检出率差异无显著性(x2=133,P>0.05);女性患者阴道分泌物培养后TV检出率显著高于尿液的TV检出率(x2=19.4,P<0.005)。培养法、湿片+培养法与湿片观察相比,女性阴道分泌物中TV的检出率差异均有显著性(x2=4.17,P<0.05;x2=5.14,P<0.05)。女性尿液培养检测TV的敏感性和特异性最低(48.9％,96.2％)。结论:男性滴虫性尿道炎可采用尿液检测TV,在女性患者检测TV可采用湿片+培养法,该方法可作为性传播性疾病(STD)高危人群筛检TV感染的方法。     

梅克尔憩室并发症101例临床分析

目的 总结梅克尔憩室并发症临床特点,提高对该病并发症的诊治水平.方法 回顾性分析我院近3年收治的101例梅克尔憩室并发症手术患儿诊疗经过,对其症状、检查、手术情况等进行统计学分析.结果 并发症中出血50例、肠梗阻37例、憩室炎7例、穿孔7例,比例约为7:5:1:1.本组梅克尔憩室99mTc检查敏感度92％,全部病例痊愈出院.结论 患儿中出血最常见,并发梗阻、炎症及穿孔术前不易确诊.99m Tc检查可以诊断梅克尔憩室,其准确率与和异位组织相关,受憩室炎症影响;与性别、年龄、病程、憩室距回盲部距离无相关性.     

毒鼠强中毒并发MODS6例治疗体会

目的 通过运用综合治疗措施探讨治疗重症毒民强中毒的最佳方法。方法 运用早期强化治疗、持续血液净化(CRRT)、重要脏器保护、呼吸支持及营养支持等方法治疗重症毒鼠强中毒合并多器官功能障碍综合征(MODS)患者。结论 运用文中所述治疗方法可以显著改善重症毒鼠强中毒合并MODS患者的预后。     

人源日本血吸虫Fab抗体库的构建及抗独特型抗体的筛选、鉴定

目的:构建人源日本血吸虫Fab抗体库,筛选出日本血吸虫抗独特型抗体并进行初步鉴定。方法:以3名晚期血吸虫患者切除的脾脏为源,构建人源日本血吸虫Fab抗体库。并以日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)及成虫抗原(SWAP)免疫鼠血清IgG包板进行筛选,经ELISA鉴定后,对阳性克隆进行可溶性表达。结果:构建了人源日本血吸虫Fab抗体库,库容为4.3×106,经核苷酸序列分析,证实插入片段为Fab基因片断。经过5轮筛选后,从富集的次级抗体库中随机挑取60个克隆,用ELISA法鉴定得到4个可与免疫鼠血清(Ab1)特异性结合,而不与SEA及SWAP结合的单克隆抗体(A3、B6、C4、C17),其中B6经SDS-PAGE电泳显示插入片断正确。结论:成功构建了人源日本血吸虫Fab抗体库,并从中获得人源日本血吸虫抗独特型抗体B6,为研制用于人体血吸虫病免疫预防的抗独特型抗体疫苗奠定了基础。     

Trop2在舌鳞癌中的表达及其意义

目的:观察并分析Trop2在口腔舌鳞癌(oral tongue squamous cell carcinoma,OTSCC)中的表达情况及其临床意义,探讨Trop2作为OTSCC潜在治疗靶点的可能性.方法:用实时定量RT-PCR检测15例OTSCC组织及癌旁舌组织中Trop2 mRNA的表达,用前期自制的全人源抗Tro...     

抗炭疽毒素保护性抗原单克隆抗体的制备及功能分析

目的:原核表达炭疽杆菌保护性抗原PA10蛋白,制备单克隆抗体,并进行功能分析?方法:人工合成炭疽杆菌保护性抗原PA10编码基因并克隆入pUC57载体,酶切鉴定后,将PA10编码基因插入原核表达载体pColdⅡ中,测序验证正确后转化至大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG和低温条件下诱导蛋白表达,SDS-PAGE验证产物;用HiTrap IMAC HP柱纯化重组蛋白,Western blot进一步验证?以纯化获得PA10重组蛋白为抗原,常规程序免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,并检测所制备抗体的中和活性?结果:获得的PA10重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,最终获得了4株特异性的单克隆抗体(分别命名为2G8?5A8?7B3? 9C9)?经体外炭疽毒素保护试验证实,其中1株单抗(7B3)具有较强的中和活性,其保护率可高达96%?结论:本文成功构建并表达炭疽杆菌保护性抗原PA10,制备了具有中和活性的抗PA单克隆抗体,为构建人源化的抗PA中和抗体奠定基础,从而有望用于炭疽病的治疗?