LATS2对恶性周围神经鞘瘤细胞的调控作用及分子机制探讨

目的:探讨大肿瘤抑制激酶2（LATS2）对恶性周围神经鞘瘤（MPNST）细胞增殖和迁移的影响及机制。方法:LATS2过表达慢病毒感染ST88-14、STS26T细胞,实验分为阴性对照组及LATS2过表达组,利用CCK-8、细胞划痕实验检测过表达LATS2对细胞增殖、迁移的影响。实时荧光定量RT-PCR和免疫印迹实验检测细胞中LATS2、多梳抑制复合物2（PRC2）核心组分、Yes相关蛋白（YAP）、含有PDZ结合位点的转录共激活因子（TAZ）的mRNA和蛋白表达,以及组蛋白H3第27位赖氨酸上的三甲基化（H3K27me3）水平。结果:与对照组相比,LATS2过表达抑制ST88-14、STS26T细胞增殖（t=4.219、14.66、11.5,均P<0.05;t=5.674、7.118、10.77,均P<0.01）、迁移（t=4.838、4.736,均P<0.01）。与对照组相比,LATS2过表达不影响ST88-14、STS26T细胞中YAP/TAZ的mRNA和总蛋白水平,但升高其蛋白磷酸化水平（t=6.233、3.759,均P<0.01;t=3.44、2.947,均P<0.05）。与对照组相比,LATS2过表达不影响ST88-14、STS26T细胞中PRC2核心组分SUZ12、EZH2、EED的mRNA和蛋白水平,但H3K27me3水平明显升高（t=6.569、16.68,均P<0.01）。结论:LATS2在MPNST细胞系中表达下降,过表达LATS2升高H3K27me3表达水平,同时促进YAP/TAZ的磷酸化,从而抑制MPNST细胞的增殖、迁移,在MPNST中发挥肿瘤抑制因子的作用。     

天津地区风疹病毒的分子特征分析

目的:了解2009年天津地区风疹病毒(rubella virus,RV)的分子特征.方法:采用Vero/SLAM细胞培养法分离出10株风疹病毒,用RT-PCR方法扩增10株风疹病毒E1基因编码的1170个核苷酸,并对该PCR产物进行序列测定和分析.分离株与WHO各基因型参考株基于E1基因编码的739个核苷酸构建基因亲缘性关系树.结果:10株风疹病毒与1E基因型代表株处于同一分支,属于1E基因型.核苷酸同源性为97.3%～100%,重要抗原位点未发生变异.血凝抑制和中和位点中,只有Tianjin09-06株在E1蛋白第234位氨基酸发生了变化(Trp234→Ser234).同时所有天津分离的风疹毒株在E1蛋白的第338位氨基酸发生相同突变(Leu338→Phe338),该氨基酸(Phe338)可能是我国1E基因犁风疹病毒所特有.结论:天津地区流行的风疹病毒为E1基因型,在基因亲缘性关系树中形成紧密相连的3簇,处于不同的进化链中,显示天津地区存在不同风疹病毒株的传播链.     

青鹏软膏外敷治疗中老年桡骨下端骨折肿胀疼痛临床观察

目的 探讨青鹏软膏对中老年挠骨下端骨折肿胀疼痛的临床疗效.方法 119例中老年挠骨下端骨折,根据使用青鹏软膏和不用任何药物随机分两组,分别观察治疗后3天7天肿胀及疼痛情况.结果 3天7天后使用青鹏软膏的肿胀,疼痛减轻明显优于对照组.结论 青鹏软膏具有促进局部血液循环、减轻肢体水肿,祛瘀止痛的作用.     

SUZ12过表达及敲减恶性外周神经鞘瘤稳定细胞株的建立及其意义

目的:构建SUZ12基因过表达和敲减的恶性外周神经鞘瘤(MPNST)稳定细胞株并探讨其意义。方法:PCR合成SUZ12基因全长并设计合成SUZ12基因的3对特异性sgRNA干扰靶点序列（sgRNA-1、sgRNA-2、sgRNA-3）,构建重组表达质粒,转染293T细胞,包装慢病毒颗粒并用荧光法测定其滴度。确定慢病毒感染的最适MOI以及嘌呤霉素筛选的最适剂量,转染ST88-14细胞,构建过表达及敲减的MPNST稳定细胞株。荧光显微镜观察稳定株绿色荧光蛋白的表达情况,RT-qPCR在mRNA水平进行验证,MTT法检测SUZ12过表达和敲减组增殖活性的改变。结果:LV-SUZ12和LV-SUZ12-sgRNA转导入ST88-14细胞并稳定表达绿色荧光蛋白,RT-qPCR结果显示过表达稳定株SUZ12表达量明显升高（P<0.05）,CRISPR/Cas9敲减稳定株SUZ12表达量明显下降（P<0.05）。MTT结果显示过表达SUZ12基因抑制MPNST细胞的增殖。结论:SUZ12过表达和敲减的稳定细胞株构建成功,初步验证结果表明过表达SUZ12基因抑制MPNST细胞的增殖,为针对SUZ12在MPNST中的生物学功能、作用机制和疾病诊断治疗的进一步研究提供了实验基础。     

萋-尼氏抗酸染色法和金胺O荧光染色法在结核分枝杆菌痰涂片检测中的对比

目的:比较萋-尼氏抗酸染色法（简称Z-N）和金胺O荧光染色法（简称荧光染色）在痰涂片镜检中对结核分枝杆菌的检测效果差异。方法:纳入580份痰标本,挑取相同部位制成两份涂片,分别使用Z-N和荧光染色进行染色镜检,比较两种方法的阳性检出率、阳性分级标准及读片时间上的差异。将涂片后余下的痰标本采用全自动分枝杆菌检测/药敏系统做液体培养。结果:Z-N法阳性检出率为10.8%,荧光染色法为15.3%,两种方法比较差异有统计学意义（P＜0.05）。对两种方法每一级别的结果进行?字2检验,结果表明两种染色方法在各个分级没有统计学差异（P＞0.05）。荧光染色法的读片时间要明显短于Z-N。结论:荧光染色阳性检出率略高于Z-N,证明荧光染色法是一种快速、灵敏的检测方法,对肺结核的临床诊断具有重要意义。     

血清降钙素原与肾上腺髓质素前体中段肽在婴幼儿细菌性肺炎诊疗中的临床研究

目的:探讨血清降钙素原（PCT）与肾上腺髓质素前体中段肽（MR-proADM）在婴幼儿细菌性肺炎中的应用价值,为临床诊疗提供帮助。方法:选取108例出院确诊为细菌性肺炎的患儿,根据入院时感染的严重程度分为局限性感染组42例、脓毒症组31例、严重脓毒症组28例、脓毒性休克组7例;选取同期病毒性肺炎患儿89例设为病毒感染组,将同期体检正常的儿童88例设为健康对照组;比较各组婴幼儿PCT与MR-proADM水平,分析PCT与MR-proADM在细菌性肺炎中的诊断价值及联合应用后诊断性能的变化;通过Pearson相关分析论证PCT、MR-proADM与PCIS评分的相关性;对细菌感染不同程度组PCT与MR-proADM诊断指标价值进行分析,计算二者联合应用后的后验概率;观测患儿应用3 d抗生素治疗后PCT、MR-proADM水平的变化;评估PCT与MR-proADM在严重脓毒症与脓毒性休克中死亡率的预测价值。结果:细菌感染组PCT、MR-proADM均显著高于病毒感染组与健康对照组（P <0.05）;联合应用PCT与MR-proADM检测后,细菌性肺炎诊断的敏感度增至98.71%,特异性增至99.30%,诊断符合率增至99.62%;通过Pearson相关分析,PCT、MR-proADM与PCIS评分均呈负相关;细菌感染不同程度组PCT与MR-proADM联合应用后验概率均明显升高;经3 d抗生素治疗后,局限性感染组、脓毒症组PCT水平显著下降（P <0.05）,严重脓毒症组、脓毒性休克组MR-proADM水平显著下降（P <0.05）;在严重脓毒症与脓毒性休克的死亡率预测中,MR-proADM变化差异显著（P <0.05）,PCT变化无统计学意义。结论:PCT与MR-proADM在婴幼儿细菌性肺炎的诊疗中具有很高的临床价值,二者联合应用,更为患儿的临床诊断、病情预估、疗效监测及风险预警提供有力的指导。     

单侧多功能外固定支架用于治疗踝关节爆裂骨折12例

自 1993年 2月～ 1999年 3月将单侧多功能外固定支架用于治疗踝关节爆裂骨折共 12例。通过治疗 ,认为将外固定支架用于治疗踝关节爆裂骨折在一定程度上弥补了治疗此类骨折缺乏坚强、有效内固定的缺点 ,简化了术中操作 ,方便了术后处理 ,是一种相对理想的治疗方法。     

单侧多功能外固定支架用于治疗踝关节爆裂骨折12例

自１９９３年２￣１９９９年３月将单侧多功能外固定支架有于治疗踝关节关节爆裂骨折共１２例。通过治疗，认为交以架用于治疗踝差了爆裂骨在一定程度上弥补了治疗此类骨折缺乏坚持、有效内固定的缺点，简化了术中损伤，方便了术后处理，是一种相对理想的治疗方法。     

加亚嘉西科逆转录病毒研究进展

从加亚嘉西科逆转录病毒(JSRV)的基因组、JSRV的致瘤信号传导途径、JSRV与宿主共进化方面综述了JSRV的研究进展.JSRV引起的羊肺腺瘤(SPA)与人的细支气管肺泡癌(BAC)极相似,通过对SPA的研究,不仅为BAC早期诊断及预防该病提出新方法,而且为揭示BAC的分子发病机制及探索其基因治疗提供新思路.     

半月板损伤缝合修补术的生物力学依据

目的探讨关节镜下膝关节半月板损伤缝合修补术的生物力学依据,为临床手术提供基础理论依据。方法采集8具新鲜膝关节标本,模拟临床分别行内外侧半月板半切除或双侧全切除,分别进行生物力学实验应力分析,分析半月板损伤后引起的应力分布规律。结果膝关节半月板损伤后,在胫骨关节骨端上会引起异常应力,临床上半月板全部切除后胫骨平台内外侧应力峰值分别达到(3.87±0.31)MPa和(4.88±0.42)MPa,即使单切内外侧半月板应力峰值也能达到(3.70±0.32)MPa和(4.84±0.41)MPa,它们比正常人应力水平增加18%～28%(P 0.05)。结论临床上导致创伤性骨性关节炎主要是由于半月板损伤(切除)所致的机械应力集中,建议临床骨科医师采取必要措施保留半月板、修补或缝合损伤的半月板予以防范。