汉坦病毒N蛋白的重组表达及其用于IgM直接捕捉ELISA的建立和应用

目的克隆并表达汉坦病毒（HV）Z10株（HV—Z10）N蛋白（NP）编码基因，建立基于辣根过氧化酶（HRP）标记重组NP（rNP）的rNP—IgM直接捕捉ELISA，检测肾综合征出血热（HFRS）患者血清并评价其检测效果。方法PCR扩增HV—Z10株NP编码基因，基因工程方法构建NP编码基因原核表达系统pET28a—Z10N—E．coli BL21DE3。SDS-PAGE了解rNP表达情况，离子交换法和Ni—NTA亲和层析法提纯rNP。Western blot检测rNP的特异性免疫反应性。建立HRP标记rNP—IgM直接捕捉ELISA检测HFRS患者血清样品，并与常规HV—IgM间接捕捉ELISA进行比较。结果pET28a—Z10N—E．coli BL21DE3高效表达rNP。提纯rNPSDS-PAGE显示单一蛋白条带，HV-IgG能有效识别rNP并与之结合。94．73％（90／95）HFRS患者血清样品rNP—IgM直接捕捉ELISA检测结果阳性，HV—IgM间接捕捉ELISA阳性率为92．63％（88／95）。两种IgM捕捉ELISAs检测的HFRS患者血清样品A450值分布及对多份不同稀释度血清检测的A450，均值变化均相似。结论成功构建了HV—Z10株NP编码基因高效原核表达系统。所建立的rNP—IgM直接捕捉ELISA可作为HFRS简便、安全、敏感、特异的血清学诊断新方法。     

肾综合征出血热检测结果分析

目的：掌握全省肾综合征出血热(HFRS)动物间疫情动态变化，为制定防制对策提供依据。方法：选择监测点开展宿主动物调查，测定鼠密度和带毒率，采集病人血清进行分型鉴定。结果：室外和室内平均鼠密度为10．0％。其中野外鼠密度为10．8％，居民区为9．0％。开化县鼠密度最高，达到14．5％。在捕获的室内鼠中，褐家鼠为优势鼠种，占75．87％，其次为小家鼠；在捕获的室外鼠中，黑线姬鼠为优势鼠种，占74．44％，其次为黄毛鼠。黑线姬鼠带毒率为5．21％，褐家鼠带毒率为4．18％。临床确诊病人的血清阳性率为67．8％，恢复期血清分型鉴定，姬鼠(Ⅰ)型病人占60．91％，家鼠(Ⅱ)型病人占32．51％，另有6．58％的病人未分型。健康人群隐性感染率为3．58％。结论：我省属于以姬鼠(Ⅰ)型为主的混合型HFRS疫区，鼠密度和带毒率仍然较高，需要加强防治。     

肾综合征出血热病毒高效价免疫血清抗体毒株的筛选

肾综合征出血热（HFRS）是由布尼亚病毒科汉坦病毒属引起的急性传染病。在HFRS病毒和疫苗的研究工作中，常采用间接免疫荧光抗体（IFA）技术和直接荧光抗体（FA）技术。利用高效价兔抗HFRS病毒免疫血清制备的荧光血清在检测HFRS病毒抗原：亡作中，具有特异、快速的优点忙，而荧光血清的质量与免疫血清的效价有直接关系，不同生物学特性的HFRS毒株免疫敏感动物家兔后，其免疫血清的效价有一定的差异。因此，能产生高效价免疫血清的毒株筛选是制备高质量荧光血清的关键。     

巨大恶性小肠系膜间质瘤并小肠穿孔感染一例

患者女，65岁。腹痛、黑粪、腹部包块、消瘦2个月，发热1周。10年前有上消化道出血史，病因不详，1年前B超发现右腹部2cm×2cm包块，未进一步诊治。体格检查：体温38．5℃，血压130／85mmHg（1mmHg=0．133kPa）。消瘦面容，皮肤黏膜无黄染及出血点，浅表淋巴结不大，无肝掌及蜘蛛痣。睑结膜轻度苍白。心肺正常。腹膨隆，肝脾不大。右中下腹触及约10cm×10cm包块，质中，边界欠光滑，活动可，触痛明显。     

双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫效果观察

现已知我国半数地区存在着姬鼠和家鼠二种型别的肾综合征出血热(HFRS)的混合流行[1],因此,有必要研制能同时预防这二种型别的疫苗.目前我国用于生产的三株HFRS病毒,对同型各毒株均表现较好的中和作用,但对异型病毒的交叉中和作用较差.     

用双价肾综合征出血热灭活疫苗加强接种HNT型单价疫苗免疫者？…

对１９８８年经过ＨＮＴ型疫苗初免３针，并于１９８９年加强１针的７名志愿者，于１９９７年加强１针双价疫苗后１４天采血，测定对ＨＮＴ型和ＳＥＯ型ＨＦＲＳ病毒的中和抗体。结果经加强双价疫苗的７名志愿者血清中，均检出ＨＮＴ型和ＳＥＯ型病毒的中和抗体，其中对ＨＮＴ病毒的中和抗体较高，对ＳＥＯ型病毒的中和抗体也能达到规定的要求，表明双价ＨＦＲＳ灭活疫苗可用于过去接种ＨＮＴ型疫苗人群的加强，加强接种一针可达到预     

肾综合征出血热I型灭活疫苗安全性研究

肾综合征出血热（ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃｆｅｖｅｒｗｉｔｈｒｅｎａｌｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＨＦＲＳ）灭活疫苗已研制成功，推广应用后防病效果良好。为了进一步考核其在高发疫区人群接种时的安全性，我省于１９９３～１９９７年开展了有关研究，现报告如下。１材料与方法...     

ANIMAL MODEL OF RABBITS FOR RESEARCHING EPIDEMIC HEMORRHAGIC FEVER

This study reveals that the rabbit is susceptible to all epidemic hemorrhagic fever virus strains isolated from both wild rodents and humans with epidemic hemorrhagic fever. Specific fluorescence for epi- demic hemorrhagic fever virus antigen was detected in many kinds of rabbit tissue, especially in the spleen, small intestine and pancreas on the 7th-13th day of experimental infection. Using fluorescence antibody positive lungs of wild rodents, epidemic hemorrhagic fever virus can easily be isolated in rabbits as well as Apodemus agrarius. Viremia was detected in rabbits on the 4th6th day after inoculation of epidemic hemorrhagic fever virus. Epidemic he- morrhagic fever virus strains can be serially passaged in rabbits. Therefore, the rabbit provides a new animal model for the isolation and propagation of epidemic hemorrhagic fever virus and for testing the safety of epidemic hemorrhagic fever vaccine.     

肾综合征出血热Ⅰ型灭活疫苗稳定性观察

我站于1993年研制成功HFRS沙鼠肾细胞1型单价灭活疫苗，经几年来的流行病学效果考核，证明安全有效，机体接种后中和抗体阳转率可达90％以上，无副作用。其稳定性经中国药品生物制品检定所检测，该疫苗经4℃保存18个月后，效力试验结果符合要求。现生产的疫苗有效期被定为1年。为进一步了解疫苗的稳定性，在实验室对几批疫苗进行了观察。1材料和方法1.1疫苗为杭州天元生物药品公司按文献方法生产，即病毒浙10殊感染沙鼠肾细胞，培养后收获议滩病毒，以什丙内脂灭活，加AL.（OH）3佐剂制成疫苗。经中国药品生物制品检定所检定符合要求。1…     

双价肾综合征出血热沙鼠肾细胞灭活疫苗接种效果观察

现已知我国半数地区间时存在着姬鼠和家鼠二种型别的肾综合征出血热(HFRS)的混合流行,因此,有必要研制能同时预防这二种型别的疫苗。目前我国用于生产疫苗的三株HFRS病毒,对同型各毒株均表现较好的中和作用,但对异型病毒的交叉中和作用较差。经人体免疫三针后,对同型病毒的中和抗体阳转率可达90%,而对异型病毒的阳转率仅30%左右。因而,在我国,研制双价HFRS疫苗的工作早已被提出来了。本文报道我们研制的双价HFRS沙鼠肾灭活疫苗免疫人体的结果。材料与方法一、疫苗:由杭州天元生物药业公司生产的双价肾综合征出血热沙鼠肾细胞灭活疫苗(批号双-4),制造疫苗的毒种为Z10(Ⅰ型)和Z37(Ⅱ型),病毒在沙鼠肾原代细胞培养后,经β-丙内脂灭活,内含0.1%人血白蛋白和0.5mg/ml氢氧化铝佐剂,先分别制成Ⅰ型和Ⅱ型的单价疫苗,再按不同比例混合而成双价疫苗。