去唾液酸糖蛋白受体单链抗体靶向蜂毒肽的体外抑瘤效应研究

目的探讨抗去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)单链抗体C1与蜂毒肽(Melittin)重组蛋白C1M靶向抑制肝癌细胞的效果。方法将含C1M/pGC的XL1-Blue转化菌通过IPTG诱导表达。表达产物用Ni2+螯合柱亲和纯化,免疫组织化学技术分析重组蛋白C1M的抗原结合能力,四氮唑盐(MTT)法检测C1M对肝癌细胞株HepG2的增殖抑制作用。结果原核表达质粒C1M/pGC在XL1-Blue中获得有效表达;表达产物以可溶性形式存在;纯化的C1M相对分子量为29.4×103;免疫组化结果表明C1M能有效识别去唾液酸糖蛋白受体,与HepG2(C1M)共培养3d,细胞生长抑制率达92.0%。结论在大肠埃希菌中成功表达C1M,位于C端的Melittin蜂毒肽能有效抑制肿瘤细胞的生长,为体内研究Melittin的靶向抗肝癌效果奠定了基础。     

再生障碍性贫血患者外周血淋巴细胞亚群检测

<正> 本文报告应用抗淋巴细胞单克隆抗体检测再障患者外周血淋巴细胞亚群。 研究对象和方法 一、研究对象:慢性再障成人患者9例,按1981年全国再障座谈会诊断标准。男性5例,女性4例。平均年龄30岁(15～55岁)。 再障患儿 8例,按1986年杭州儿科血液病会议制定的标准诊断。     

表达增强型绿色荧光蛋白K562细胞株的建立及其检测自然杀伤细胞活性的效果评价

目的建立一种准确、稳定的自然杀伤细胞(NK)活性检测方法。方法通过电穿孔法将含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒转入K562细胞,经G418筛选后进行克隆,获得EGFP阳性表达细胞株;采用流式细胞仪和乳酸脱氢酶法检测10名健康人外周血NK细胞活性。结果通过基因转染的方法得到1株稳定表达EGFP的K562细胞,转染EGFP对细胞生长无影响,10名健康人外周血NK细胞对转染EGFP的细胞及未转染细胞的杀伤活性无差异(P>0.05);表达EGFP的K562细胞在效靶比为40∶1时,用流式细胞仪检测培养2和4h时的NK细胞杀伤率分别为(21.5±1.3)%和(23.7±1.5)%,二者无差异(P>0.05);而用乳酸脱氢酶法测定培养4h的NK细胞对K562和EGFP-K562的杀伤率[分别为(23.6±2.3)%和(23.7±2.3)%]均高于2h的杀伤率[(18.0±1.1)%和(18.2±1.3)%,P<0.05]。结论成功建立了表达EGFP的K562细胞株,将该细胞株作为靶细胞用于流式细胞术检测NK细胞活性时,无需预先染色和标记靶细胞,且操作简便、省时、稳定、可靠。     

腹腔镜与开腹手术对早期宫颈癌患者术后性生活质量的对比研究

目的 比较分析腹腔镜手术与开腹手术治疗早期宫颈癌的临床疗效和性生活质量影响。方法 随机抽取我院近4年来实施广泛性全子宫切除加盆腔淋巴结清扫术的宫颈癌患者40例,其中腹腔镜宫颈癌根治术20例、开腹宫颈癌根治术20例。观察比较两组的住院时间、手术时间、术中出血量、术后排气时间和术后并发症的情况,并于术后4个月、8个月、1年采用欧洲癌症研究和治疗组织(EORTC)针对宫颈癌患者建立的QLQ-CX 24评价量表随访调查患者的术后性生活质量。结果 腹腔镜手术与开腹手术相比,患者住院时间短、术中出血量少、排气时间早、术后并发症少(P<0.05),两组手术时间、差异无显著性(P>0.05)。术后3次随访,两组患者术后第4个月的随访性功能及阴道功能均降低,而腹腔镜组相对于开腹手术,性生活相关困扰少,性活跃度和愉悦感方面高,差异有显著性(P<0.05)。而术后8个月及1年腹腔镜组与开腹组相比,各个维度差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 腹腔镜与开腹手术治疗早期宫颈癌相比,术后并发症少,病人恢复快,在性生活方面,术后4个月的随访问卷,两组性功能及阴道功能均降低;腹腔镜组相对于开腹手术,性生活相关困扰少,性活跃度和愉悦感方面高。而术后8个月和1年,两组在性生活方面无明显差异。     

阴式与腹腔镜卵巢良性肿瘤切除术的临床效果比较

目的 比较阴式和腹腔镜卵巢良性肿瘤切除术的临床效果.方法 收集2006年5月至2007年2月接受以上不同途径卵巢肿瘤切除术的病例共52例的临床资料,其中阴式卵巢肿瘤切除术25例(阴式组),腹腔镜卵巢肿瘤切除术27例(腹腔镜组).比较两种手术手术时间、术中出血量、住院时间、医疗费用及术后恢复情况等.结果 手术时间:阴式组(70±20)min、腹腔镜组(82±26)min;术中出血量:阴式组(40±20)ml,腹腔镜组(30±20)ml;住院时间:阴式组(5.8±1.2)d,腹腔镜组(5.7±1.4)d;以上各项指标两组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).住院总费用:阴式组(3 301±310)元,腹腔镜组(4 262±935)元,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 无明显盆腔粘连、肿瘤直径＜10 cm的卵巢良性肿瘤可选择阴式途径.阴式卵巢肿瘤切除术无需特殊器械,可避免卵巢肿瘤内容物污染腹腔.     

淋球菌主要外膜蛋白的分离纯化及其单克隆抗体的制备

目的 建立快速，敏感，特异的淋球菌感染实验诊断方法。方法 采用溴化己二烯苯基三乙基胺-乙醇沉淀法提取淋球菌外膜蛋白复合物。以Z3.14,EDTA萃取外膜蛋白，经二乙氨基乙酸纤素-SepharoseCL-6B层析纯化获得主要外膜蛋白（PI），并按免疫杂交瘤技术建立分泌抗PI单克隆抗体（McAb)的杂交瘤细胞株。结果 获得了WI群淋球菌的PIA和WⅡ/WⅢ群淋球菌的PIB，SDS-PAGE测得PIA的分子量为35200，PIB的分子量为36700。建立了可持续，稳定分泌抗PIAMcAb的杂交瘤细胞2株和抗PIBMcAb的杂交瘤细胞3株，5株杂交瘤细胞培养上清液的抗体滴度为1：64-1：256，其诱生的BALB/c小鼠腹水中的抗体滴度为1：4096-1：16384，与淋球菌呈高效价反应。与脑膜炎双球菌等其他抗原不发生反应。结论 获得的高纯度PI及其McAb为建立快速，敏感，特异的淋球菌感染实验诊断方法奠定了基础。     

保留盆腔神经对宫颈癌患者术后生存质量的影响

【摘要】目的探讨腹腔镜下保留盆腔自主神经的广泛子宫切除术(laparoscopic nerve sparing radical hysterectomy,LNSRH)对早期宫颈癌患者术后生存质量的影响。方法回顾性分析我院2013年7月至2015年3月收治的70例Ⅰa～Ⅱa 宫颈癌患者的临床资料和随访资料,所有患者均行腹腔镜下宫颈癌根治术,其中35例行LNSRH 腹腔镜下盆腔淋巴结清扫(laparoscopic pelvic lymphadenectomy,LPL),为观察组,另35例行腹腔镜下广泛性子宫切除(laparoscopic radical hysterectomy,LRH) LPL,为对照组。术前及术后6月对所有患者进行宫颈癌治疗功能评价系统(FACT-Cx)的问卷调查,评价宫颈癌患者术后近期生活质量。结果术前两组FACT-Cx总评分及各部分得分差异无统计学意义,术后观察组FACT-Cx总评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后各部分评分中除了附加关注得分观察组高于对照组,其余各部分得分两组统计差异无统计学意(P>0.05)。结论保留盆腔自主神经的腹腔镜宫颈癌根治术较传统腹腔镜宫颈癌根治术患者术后有较为理想的生活状态,腹腔镜下保留盆腔神经的宫颈癌根治术可能对提高早期宫颈癌患者术后生活质量有效,值得临床进一步研究。     

自助推药器联合双腔单囊管在子宫输卵管造影中的应用观察

目的了解自助推药器联合双腔单囊管应用于数字X线机下,行子宫输卵管造影的可行性。方法应用自助推药器联合双腔单囊管对270例不孕症患者进行输卵管造影。结果 270例患者全部获得满意的实时图像。结论自助推药器联合双腔单囊管容易被接受,操作简单,安全可行,能避免医务人员接受辐射,值得在临床推广。     

TLR4与TLR9在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨Toll样受体4(TLR4)、TLR9在肝癌发生、发展中的作用。方法搜集临床经病理证实的肝癌及相应癌旁组织标本、肝血管瘤组织标本,分别用免疫组化法及流式细胞术检测TLR4、TLR9表达。结果肝癌组织中TLR4表达明显低于癌旁及肝血管瘤组织,而TLR9表达明显高于癌旁及肝血管瘤组织,P均<0.05。结论TLR4、TLR9与肝癌的发生、发展有关;乙肝病毒可能通过拮抗TLR4表达、激活TLR9通路促进肝癌的进展。     

胸腺素对实验性精索静脉曲张鼠免疫功能的影响

通过部分结扎左肾静脉诱导实验性精索静脉曲张，研究了胸腺素对免疫功能的影响。结果显示，未用药组实验性精索静脉曲张鼠脾细胞中溶血空斑（PFC）的形成和白细胞介素-2的诱生能力均明显降低（P＜0.05、P＜O.01）；给予胸腺素4周后，PFC的形成明显升高（P＜O.O1）。提示，实验性精索静脉曲张鼠存在免疫机能紊乱。胸腺素能够促进免疫功能，维持免疫功能的稳定。胸腺-神经内分泌免疫网络在精静脉曲张不育的发病机制中起着十分重要的作用。