重组XIAP对H2O2诱导小肠上皮细胞凋亡的保护作用

背景：XIAP在细胞抗凋亡中发挥关键作用,能作为与凋亡相关的多种疾病预防治疗的靶点。 目的：构建大鼠重组XIAP表达质粒,观察其对H₂O₂诱导细胞凋亡的保护作用和机制。 方法：采用RT-PCR从大鼠小肠上皮细胞IEC-6扩增出大鼠XIAP基因ORF序列,插入pCMV6-AC-GFP载体,重组成pXIAP-GFP表达质粒,测序鉴定。以重组pXIAP-GFP与对照质粒pCMV6-AC-GFP转染IEC-6细胞,Western blot检测细胞重组XIAP的表达,同时在H2O2诱导细胞凋亡后,MTT法检测细胞存活,Western blot检测细胞Casepase-3表达。 结果与结论：经测序证实pXIAP-GFP重组序列正确,Western blot证实将其转染IEC-6细胞后细胞正确表达XIAP,表明pXIAP-GFP重组质粒构建成功;在转染质粒和H₂O₂诱导凋亡后,与对照质粒pCMV6-AC-GFP组比较,pXIAP-GFP组细胞 A值增高,Caspase- 3表达降低。表明重组XIAP能通过抑制Caspase-3的表达抵抗H₂O₂诱导的细胞凋亡。     

白术抑制IEC-6细胞增殖及其机制的研究

目的 研究白术(Atractylodes macrocephala,AM)对大鼠小肠隐窝细胞IEC-6增殖的影响及其作用机制.方法 采用MTT法和流式细胞术检测AM对IEC-6细胞增殖的影响,RT-PCR和Western blot技术检测AM对IEC-6细胞p21mRNA和蛋白的表达.结果 发现AM(432 μg ·m1-1)和AM(2160 μg· ml-1)剂量在作用于IEC-6细胞48h后即对细胞的增殖产生明显的抑制作用,细胞p21 mRNA及其蛋白表达增加.结论 白术可通过上调周期抑制蛋白p21 mRNA和蛋白的表达,抑制IEC-6细胞的增殖.     

阿尔茨海默病后期患者照料及伦理学问题探讨

目的：阿尔茨海默病（AD）患者多伴随进展性认知功能下降,为此对诊疗自主决策能力不乏影响,在研究层面陆续引发不少伦理学问题。当前此类伦理研究主要侧重在参与临床前期预防性试验、及以缓解症状为主的临床治疗研究过程所涉及的问题。然而,绝大多数AD 患者的大部分时间却用在后期照料等医疗语境之外的活动,故有必要对AD后期患者生活相处期相关伦理问题进行探讨。本文围绕上述核心问题在AD后期医疗照料伦理风险（如抗精神病药物使用、喂养方式选择等）、非医疗背景照料伦理风险、及公民其他基本权利保障等方面进行阐述,并就决策科学性与伦理合理性等层面进行分析,以期为AD后期个体照料及伦理实践提供参考。     

猪苓多糖对卡介苗刺激巨噬细胞表达前炎症细胞因子mRNA的影响

目的检测猪苓多糖（polyporus polysaccharide，PPS）协同卡介苗（bacillus calmette guerin，BCG）对巨噬细胞自介索-1β（Interleukin-lbeta，IL-1β）和肿瘤坏死因子α（Tumor Necrosis Factor-alpha，TNF-α）mRNA表达的影响，研究其参与免疫启动的过程。方法将BCG或BCG加PPS作用于体外培养的小鼠巨噬细胞J774细胞株，运用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术，检测巨噬细胞IL-1β和TNF-α mRNA的表达水平。结果单用BCG或BCG和PPS合用刺激巨噬细胞后，IL-1β和TNF-53 mRNA表达水平较阴性对照组均显著升高。BCG和PPS合用，巨噬细胞IL-1βmRNA表达水平比单用BCG高，两者差异有显著性。同等剂量的情况下，单用BCG或BCG和PPS合用，两者TNF-α mRNA表达水平无明显差异。表达峰值时间：TNF-α为0．5h，IL-1β为3h。结论BCG可增强巨噬细胞IL-1β和TNF-α mRNA的表达，一定剂量的PPS能协同BCG提高IL-1β mRNA的表达，参与免疫启动反应。     

SARS患者急性期病情严重程度与康复期免疫功能的关系

目的考察SARS患者发病期病情轻重程度与康复期机体免疫功能受损的关系。方法将患者分为未使用呼吸机组（A）和使用过呼吸机组（B）,通过回顾性分析SAILS患者住院期间和康复期的病例资料,比较两组患者肺部病灶阴影范围和吸收时间、WBC总数及其分类、康复期淋巴T细胞亚群与活化分子等。结果B组的肺部病灶范围在第2周内显著性大于A组,吸收时间也长于A组;A组的WBC总数,中性（N）、淋巴细胞（L）计数和百分数均在正常参考值范围,B组WBC总数、N计数与百分数高于A组,L百分数低于A组;第1次随访B组CD8^＋、CD8^＋／CD28^-、CD3^＋／HLA-DR^＋T细胞显著性高于A组,CD3^-／HLA—DR^＋细胞显著低于A组;第2次随访仅B组CD3^-／HIA—DR^＋细胞仍显著低于A组,其余免疫细胞无统计学差异。结论SAILS患者未使用呼吸机组较使用过呼吸机组肺部病理性损害小,免疫功能基本正常或受损程度很小。     

LC/MS/MS测定龙胆苦苷的尿药浓度

目的建立龙胆苦苷尿药浓度的液质联用测定方法(LC/MS/MS).方法以咖啡因作内标,固相萃取法处理尿样.色谱柱:RESCEK C8柱(150 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为甲醇-10 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH=6.5)-乙腈(50:40:10),流速为0.2 mL·min-1.样品经电喷雾离子源(ESI)正离子化后,通过三级四极杆串联质谱仪,采用多反应离子监测方式测定龙胆苦苷(m/z 374.1→195.2)和咖啡因(m/z 195.2→138.2)浓度.结果尿液中龙胆苦苷在30～9000 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9980),方法回收率为91.10%～96.21%,提取回收率为100.52%～103.83%,日内、日间精密度均＜10%.结论该方法灵敏、准确、快速、特异性强.     

猪苓多糖对膀胱癌细胞钙离子浓度的影响

目的　观察猪苓多糖对人T2 4膀胱癌细胞内钙离子 (Ca2 )浓度的影响 ,探讨猪苓多糖抗癌机理。方法　体外培养人T2 4细胞经钙荧光指示剂 (calciumcrimson AM )负载后 ,用激光扫描共聚焦显微镜测定猪苓多糖作用前后细胞内Ca2 随时间的变化。结果　猪苓多糖低剂量 (0 .2mg·L- 1)使T2 4细胞内Ca2 降低 ,高剂量 (>1mg·L- 1)使T2 4细胞内Ca2 升高 ,最后维持在高钙水平上。猪苓多糖主要促进细胞核内Ca2 升高 ,细胞浆Ca2 无明显改变。结论　猪苓多糖可引起T2 4细胞内Ca2 水平的显著变化 ,而且这种变化主要表现在细胞核内 ,提示猪苓多糖可能有诱导细胞凋亡的作用     

索拉非尼治疗转移性肾癌的不良反应

目的回顾分析31例使用靶向治疗药物索拉非尼治疗转移性肾癌患者的临床资料,评价索拉非尼治疗晚期转移性肾癌的安全性,探讨其不良反应的特点、预防及治疗方法。方法2006年4月至2008年12月,我们对31例转移性肾癌患者行口服索拉非尼治疗,其中男20例,女11例;有17例患者为一线用药,14例为二线用药。25例行原发肿瘤切除,除1例为肾乳头状细胞癌外,其余均为透明细胞癌(2例含肉瘤成分),6例患者无法行手术切除,但经穿刺活检证实为肾透明细胞癌。治疗方案：索拉非尼400mg,2次/日;2例患者接受索拉非尼增量治疗,每次口服600mg,2次/日;1例同时使用免疫治疗。结果本组31例患者出现的不良反应包括消化系统反应22例(71.0%)、手足综合征17例(54.8%)、疲乏13例(42.0%)、高血压7例(22.6%)、肝功能损害3例(9.7%),其中3级不良反应4例(12.9%),无4级不良反应,给予对症处理、减量或停药后均缓解。结论索拉非尼治疗转移性肾癌有较多的不良反应,但多数较为轻微,经积极适当的处理,绝大多数患者可耐受,安全性较好。     

15例脐尿管癌的临床特征及预后分析

目的:分析脐尿管癌患者的临床及预后特征,提高临床医生对脐尿管癌的诊疗水平。方法:回顾性分析我院2012年5月～2019年5月收治的15例脐尿管癌患者的临床资料、治疗方案以及随访结果,所需资料主要通过追踪病历及电话访问获得,运用SPSS 17.0进行统计分析并计算生存率。结果:脐尿管癌患者共有15例,其中男13例,女2例。中位年龄46岁,平均年龄44.1(25～65)岁。最常见的首发症状为肉眼血尿,其次是尿路刺激症状、腹痛。15例均为腺癌,其中中分化腺癌6例,中低分化腺癌3例,印戒细胞癌1例,黏液腺癌1例,混合型腺癌1例,未分型3例。免疫组化中CK20、CDX-2均可呈弥漫性强阳性,CK7为60%阳性率,GATA-3、PSA阴性。膀胱镜或影像学显示肿块组织均处于膀胱顶壁或前壁或沿膀胱中线分布。依据Sheldon分期,Ⅲa期11例(73.3%),Ⅲc期1例(6.7%),Ⅳb期2例(13.3%),1例(6.7%)由于外院术后转入,无具体分期资料。本中心患者大部分是采用手术治疗结合化疗或单纯手术治疗,15例患者当中多数接受扩大的膀胱部分切除术,切除范围包括脐及脐尿管,还有耻骨后间隙的结缔组织,...