甘草对小肠隐窝干细胞增殖中p53mRNA稳定性及其表达的影响

目的研究甘草对小肠隐窝干细胞IEC-6细胞增殖及p53表达的影响。方法采用二氟甲基鸟氨酸（DFMO）耗竭细胞内多胺的方法诱导IEC-6细胞生长抑制模型,实验分4组,即对照组、DFMO组、甘草低剂量组和甘草高剂量组。对照组为正常细胞,其他3组均加入5 mmol/L DFMO,同时甘草低剂量组与甘草高剂量组分别添加40、80μg/mL甘草配方颗粒,均连续培养6天。利用流式细胞术检测各组细胞数量及存活率,Western blot检测p53蛋白水平,荧光定量RT-PCR检测p53 mRNA水平及mRNA稳定性。结果与对照组比较,第4天DFMO组IEC-6细胞生长明显受到抑制（P〈0.05）;第6天甘草低剂量组及甘草高剂量组细胞数量较DFMO组明显增加（P〈0.05）,且2个剂量的甘草组间具有量效依赖性。处理IEC-6细胞6天后,DFMO组p53蛋白及mRNA表达水平较对照组显著升高（P〈0.05）;与DFMO组比较,2个剂量的甘草组能够明显下调p53蛋白及mRNA的表达水平（P〈0.05）。对照组细胞的p53 mRNA降解最快,DFMO组细胞的降解速度最慢。结论甘草通过下调p53 mRNA的稳定性来降低p53表达,从而促进小肠隐窝干细胞的增殖,可能是甘草的肠黏膜保护和修复作用的机制之一。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中染料木素及其葡萄糖醛酸代谢物

目的建立液相色谱-串联质谱联用法测定人血浆中染料木素(雌激素类药物)及其葡萄糖醛酸代谢物(GGS)并研究其在健康人体中的药代动力学。方法10例健康受试者空腹口服染料木素50 mg,血浆加入内标物地塞米松后,经液-液萃取,色谱柱为Capcell Pak C8(2 mm×150 mm,5μm),流动相为:甲醇-5 mmol.L-1乙酸铵-乙腈(70∶20∶10),以ESI源正离子MRM模式测定染料木素的血药浓度,GGS先酶解为原形后间接测定,用DAS 2.0程序计算药代动力学参数。结果线性范围为0.3~500.0μg.L-1(γ=0.9983),回收率在92.9%~104.9%,绝对回收率在74.2%~89.2%,日内、日间变异(RSD)均<15%。染料木素和GGS的主要药代动力学参数:tmax分别为(5.0±1.3),(6.0±2.4)h,Cmax分别为(10.1±6.3),(218.7±68.6)μg.L-1,AUC0-t分别为(31.2±10.3),(3344.0±1635.0)μg.h.L-1,AUC0-∞分别为(33.9±11.4),(3703.0±2031.0)μg.h.L-1。结论测定方法灵敏、准确...     

克罗恩病患者运动干预研究进展

目的 了解国内外克罗恩病患者的运动干预研究进展,为干预实践提供参考依据。方法 回顾国内外文献,从运动在克罗恩病患者中应用的意义、研究方法、干预实施、效果、依从性等角度进行综述。结果 运动可以降低克罗恩病患者炎症因子水平、提高骨密度、增加肌肉量、提高摄氧能力、改善疲乏及心理状态,提高生活质量,但运动依从性差。结论 运动已被证明在克罗恩病缓解期及轻中度活动期是安全性有效的,未来为进一步明确不同运动方式、强度、时间及频率在克罗恩病中的干预效果,还需要进行多种研究方法的探索,开展多中心、大样本的研究;并针对不同时期、不同年龄及性别等患者开展个体化的运动干预,加强监督,提高患者运动依从性,从而改善患者预后。     

猪苓多糖对膀胱癌T24细胞凋亡及细胞周期分布的影响

目的:探讨中药猪苓多糖(PPS)对膀胱癌 T24细胞的作用。方法:应用细胞计数形态学观察和流式细胞分析技术观察 PPS 对 T24细胞形态、细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。结果:PPS 组细胞数量减少,细胞形态改变,较多细胞伸出伪足。PPS 组凋亡细胞与对照组比较差异无显著性,但细胞周期分布中 S期细胞增加,G_2期细胞减少。结论:PPS 有抑制 T24细胞增殖作用,可能是通过阻止 T24细胞由 S 期进入G_2期所致。     

冠心病血瘀证患者白细胞CD11b及CD18表达研究

目的探求不同类型冠心病患者中性粒细胞和单核细胞膜CD11b、CD18表达的规律及其与中医证类的关系.方法采用流式细胞仪检测SAP、UAP和AMI各型患者和不同中医证类患者中性粒细胞和单核细胞膜CD11b、CD18的表达.结果UAP组和AMI组中性粒细胞和单核细胞CD11b、CD18显著高于SAP组,SAP、UAP、AMI组之间中性粒细胞和单核细胞CD11b、CD18表达随着病情程度的加重而增加.AMI组血瘀证患者中性粒细胞和单核细胞CD11b、CD18的表达高于非血瘀证组.结论冠心病患者中性粒细胞和单核细胞膜CD11b、CD18表达明显上调,其增加程度与心肌缺血的类型及是否合并中医血瘀证有关.     

用以药测证原理研究慢性肾衰大鼠模型的中医证候属性

目的：以药测证法是中医临床常用的一种辨证方法，这里采用本法评价动物模型的证候属性。方法：用腺嘌呤制高尿酸血症肾损害模型，分别用生理盐水、龟鹿补肾口服液、知柏地黄丸灌胃，观察血清尿素、肌酐含量，并与正常对照组对比。结果：各组大鼠血清尿素和肌酐水平有显著差异，温补肾阳和滋肾清热组对两值均有显著作用，但以温补肾阳组作用明显。结论：腺嘌呤所致慢性肾力能衰竭动物模型属于中医肾阳虚证侯模型。     

LC/MS/MS法测定人血浆中人参皂甙-Rd浓度

目的:建立液相色谱-质谱(LC/MS/MS)法测定人血浆中人参皂甙-Rd浓度。方法:血浆样品采用固相萃取法处理。用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测(MRM)方式检测人参皂甙-Rd(m/z 964.6→767.5;964.6→325.3),内标物:龙胆苦甙(m/z374.1→195.1;357.1→195.1)。结果:人参皂甙-Rd的最低定量限为3.00 ng/m l;线性范围为3.00~5000.00 ng/m l;方法回收率在81.01%~83.39%范围,日内、日间变异系数(RSD)均小于15%。结论:该法准确、灵敏、特异,适用于血浆人参皂甙-Rd浓度的测定。     

高血压肝阳上亢证大鼠模型建立和蛋白质表达分析

目的:复制高血压肝阳上亢证大鼠模型,探讨高血压肝阳上亢证候相关蛋白表达情况.方法:采用自发性高血压大鼠(SHR),灌服附子汤6周,观察造模前后症状、血压、饮水量,同时应用双向电泳技术分析大鼠的肝脏蛋白质组变化.结果:自发性高血压大鼠造模6周后,易激惹程度增高、饮水量增加等肝阳上亢证候的表现;SHR组和肝阳上亢组的蛋白斑点总体分布相似,SHR组共检测到蛋白质点数为716±58个;肝阳上亢组875±19个,仅在肝阳上亢组表达的蛋白质有27个;有28个点在表达量上有明显变化(5倍以上),其中15个点下调,13个点上调.结论:用自发性高血压大鼠(SHR)灌服附子汤可建立稳定的高血压肝阳上亢证候大鼠模型,两组差异表达蛋白可能与高血压肝阳上亢证候形成相关.     

液相色谱-质谱联用法测定人血浆双氢青蒿素浓度

目的:建立液相色谱-质谱联用法测定健康人血浆中双氢青蒿素浓度的方法。方法:以青蒿素为内标,血浆样品采用液-液萃取法处理。用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测方式检测双氢青蒿素。结果:该方法双氢青蒿素线性范围为1.01~2020 ng.ml-1;定量下限为1.001±0.072 ng.ml-1;方法回收率在93.0%~98.2%;批内、批间变异系数均<10%。结论:该方法准确、灵敏、特异、简便,适用于健康人血浆双氢青蒿素浓度的测定。     

婴幼儿脑积水52例临床与随访分析

婴幼儿脑积水是由于多种原因所致脑脊液在蛛网膜下腔或脑室系统聚积过多而引发的神经系病变.随着脑CT检查的普及应用,本病确诊率逐渐增多.我们于1998年10月-2003年5月共收治本病52例,现就其病因、临床表现及部分随访结果报道如下.