去松果体后成年大鼠学习记忆及侧脑室室管膜下区神经干细胞增殖的变化

目的观察松果体切除对学习记忆及侧脑室室管膜下区(SVZ)神经干细胞增殖的影响。方法将30只成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为非手术、假手术及去松果体组,每组大鼠10只。在建立动物模型16d后,连续5d测定大鼠在Morris水迷宫的学习记忆能力,继之用免疫组织化学方法观察SVZ的增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞的变化。结果去松果体组大鼠在Morris水迷宫泳游的逃避潜伏期及在原平台象限游泳距离的百分比均较非手术组或假手术组大鼠的明显延长或减少(P<0.01)。去松果体大鼠SVZ的PCNA阳性细胞数也明显低于非手术组或假手术组大鼠(P<0.01)。结论本研究首次观察到,去松果体使体内褪黑素减少,可导致学习记忆功能及SVZ神经干细胞增殖能力出现相似的明显下降趋势,说明褪黑素是确保学习记忆及神经发生得以正常进行的重要激素之一;提示褪黑素可能直接通过作用于神经干细胞上的相应受体以及间接通过提高基底前脑胆碱能系统功能来促进神经干细胞增殖,进而提高嗅觉记忆功能。     

提高重组腺病毒载体提纯和滴定效率的研究

目的探讨提取、纯化和滴定重组腺病毒表达载体的有效方法.方法将已用含报告基因β-半乳糖苷酶基因(LacZ)的重组5型腺病毒载体(Ad5CMVLacZ)转染的人胚肾293细胞从-70℃转移至37℃,反复冻融使细胞发生破溃,病毒从细胞内释放至上清液.在上清液中加入氯化铯,进行密度梯度超速离心,收集和透析病毒液,用空斑形成实验确定病毒的滴度.结果经提取和纯化的Ad5CMVLacZ病毒液清晰无色,用系列稀释法将其配制成10-2～10-13的稀释度,分别转染100%汇合的293细胞,连续追踪观察空斑的形成及其数目变化,直至转染后第10天,10-10稀释度的空斑数不再增加为止,计数其空斑,从而确定出mL病毒的滴度,即空斑形成单位(pfu),最终测定得到的结果是3.0×1010pfu/mL.结论用上述方法能制备出优质的重组腺病毒载体,后者足以达到对中枢神经系统损伤和疾病进行基因治疗的要求.     

环控生保集成演示验证系统总体设计及其试验验证

目的：研制环控生保集成演示验证系统，为未来中长期环控生保系统技术的研究创造一个先进的地面研究试验环境。方法：将固态胺二氧化碳收集浓缩、Sabatier二氧化碳还原、全氟磺酸热电综合膜蒸发尿处理和固态聚合物水电解制氧等再生式生保技术、集中通风温湿度控制技术、测量控制等非再生式技术集成在一密封绝热环境中，并通过试验考核。结果：系统及再生式各分系统主要技术指标满足要求，系统总体及各分系统的整合是成功的，基本上达到了系统整合部分闭环。结论：系统方案设计合理，系统的主要性能技术指标满足要求。系统总体及所属各个分系统之间匹配与协调性良好，系统运转正常，测试数据正确。     

学习状态对齿状回神经干细胞增殖的影响

目的:观察学习状态与学习不良对齿状回神经干细胞增殖状况的影响。方法:本实验于2005-5/10在广西医科大学神经解剖实验室完成,实验动物为成年雄性昆明小鼠,共27只,动物随机分为水迷宫训练组(n=18)及对照组(n=9)。对照组不进行水迷宫训练,水迷宫训练组在经过训练后,根据其水迷宫训练中的表现将动物分为正常学习组和不良学习组。水迷宫训练组动物于水迷宫训练最后3d,以40mg/kg进行5-溴脱氧尿苷(BrdU)腹腔注射,每日3次,12h内完成。对照组同步进行5-溴脱氧尿苷注射;然后在水迷宫训练后的第1、7、14天,应用免疫组化染色检测齿状回神经干细胞的增殖及存活情况。结果:各组实验动物均进入结果分析,无脱落。①学习状态对神经干细胞增殖的影响:正常学习组小鼠的5-溴脱氧尿苷阳性细胞数明显多于对照组和不良学习组(P<0.01),而对照组与不良学习组之间差异无显著性(P>0.05)。②学习状态对增殖神经干细胞细胞存活的影响:水迷宫训练后第7天,正常学习组与不良学习组小鼠齿状回5-溴脱氧尿苷阳性细胞均数均明显多于对照组(P<0.01),正常学习组5-溴脱氧尿苷阳性细胞数多于不良学习组(P<0.05);水迷宫训练后第14天,正常学习组与不良学习组小鼠齿状回5-溴脱氧尿苷阳性细胞均数仍明显多于对照组小鼠(P<0.01);而正常学习组与不良学习组之间差异无显著性。结论:神经干细胞的增殖活动不但受到学习记忆的调节,而且还与学习状态有关,但不良学习状态对齿状回的神经干细胞增殖不产生影响。     

1型糖尿病脑病大鼠空间学习记忆与海马齿状回神经干细胞增殖的观察

目的揭示1型糖尿病继发性脑病变(糖尿病脑病)的发生与海马齿状回颗粒下区(SGZ)神经干细胞增殖之间的关系。方法应用链脲佐菌素(溶解于柠檬酸缓冲液中)腹腔注射,将成年雄性Wistar大鼠建立成1型糖尿病脑病模型;将用柠檬酸缓冲液腹腔注射的大鼠或正常大鼠分别作为载体模型组或正常对照组。在建立模型成功后的60d,用Morris水迷宫和5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU,一种神经干细胞合成DNA的标记物)免疫组化方法,观察各组大鼠空间学习记忆能力以及SGZ神经干细胞(BrdU阳性细胞)的变化。结果1型糖尿病脑病模型大鼠的逃避潜伏期和游泳距离均较载体模型组或正常对照组大鼠明显延长(P<0.01);而且该脑病组大鼠SGZ的BrdU阳性细胞数也明显低于载体模型组或正常对照组大鼠(P<0.01)。结论个体内长期缺乏胰岛素可导致SGZ神经干细胞增殖出现障碍,从而引发空间学习记忆能力下降,这可能是诱发1型糖尿病脑病的一个因素。     

燃煤污染型砷中毒患者体内砷负荷及相关因素对病情的影响

通过分析贵州省燃煤污染型砷中毒重病区人群尿总砷 (Tat- As)、无机砷 (In- As)、无机砷与总砷比值 (In- As/Tat- As)和发砷以及相关因素对病情的影响 ,为流行病学调查提供基础资料以及为地砷病的发生和发展及指导防治提供科学依据。1　方法采用整群抽样与典型调查结合的方法 ,在本省地砷病高发区兴仁县交乐病区选择 2个重病村 2 9个村民组进行调查。参考省地病办 1991年确诊之患者并经临床复查确定 184例病人作为研究对象 ,另选择了 16例该病区内临床常规检测无异常者为病区非病人以及 5 0例病区 12公里以外非燃用高砷煤居民作对照。病…     

燃煤型砷中毒流行因素的多变量分析

目的 探讨燃煤型砷中毒流行因素的作用。方法 用单因素及多因素非条件Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型对１５１例砷中毒患者和６９例对照的暴露因素进行了分析。结果 发现危险因素按作用大小依次是燃用高砷煤的年限,居室通风情况差,发砷及尿总砷负荷高,吸烟,氟中毒（ＯＲ〉１,Ｐ〈０．０５）;影响因素有文化程度和家庭经济状况（ＯＲ〈１,Ｐ〈０．０５）。结论 提示应采取综合措施来预防燃煤型砷中毒。     

提高腺病毒表达载体扩增效率的研究

目的探讨在体外扩增重组腺病毒表达载体的有效方法。方法用含10%胎牛血清RPMI1640培养液常规培养人胚肾293细胞,当细胞生长至70%～80%汇合时,加入含有报告基因LacZ的重组5型腺病毒载体(Ad5CMVLacZ)共同培养36～38h。用X-gal组织化学方法检测Ad5CMVLacZ转染和表达的程度。结果293细胞生长至70%～80%汇合时,分裂增殖旺盛,形态为梭形、多角形,有明显分裂相,为指数生长期细胞。加入Ad5CMVLacZ8h后,293细胞开始出现肿胀,细胞间联系疏松,36～48h后细胞变成圆形、球形,对光折射增强,并聚集成葡萄串状。在此时间段作X-gal组化反应显示,约90%的293细胞被转染和表达产物。结论用上述方法可提高体外扩增腺病毒载体的效率,只要把握好病毒转染的时机和收获被转染293细胞的时机,就有可能制备出高滴度的病毒液,从而满足基因治疗神经退行性疾病的需要。     

人肝癌相关抗原SMP-30在肝癌中的表达及意义

目的：通过免疫组化方法检测人肝癌（HCC）中衰老标记蛋白-30（SMP-30）的表达,探讨其在HCC发生、发展中的作用及临床意义。方法：制备48例人HCC及相应的癌旁组织、6例正常人肝组织和1例正常人肾组织的石蜡切片。采用免疫组化SABC法,检测SMP-30在HCC和癌旁组织中的表达,结合临床资料进行统计分析。结果：初步发现HCC癌旁组织的SMP-30表达高于HCC组织（P〈0．05）。SMP30的表达与HCC患者性别、年龄、肿瘤大小、病理分级、肝硬化背景、HBsAg和AFP检测情况未见相关性（P〉0．05）。结论：SMP-30与HCC的发生、发展有关,其过度表达可能是HCC的早期性、保护性事件。     

空间站水电解制氧技术

在迄今为止的载人航天中,由于飞行时间较短、乘员较少,采用非再生式的(即消耗性的)供氧技术即可满足航天员在空间的代谢消耗、座舱内氧气的泄漏损失和应急条件下恢复舱压的要求。