胰岛素逆转1型糖尿病脑病模型大鼠海马齿状回神经发生障碍与空间学习记忆异常的研究

目的揭示海马齿状回神经发生与1型糖尿病脑病发病的相互关系以及用胰岛素干预后所发生的变化。方法分别用链脲佐菌素和胰岛素建立1型糖尿病脑病大鼠模型和胰岛素治疗大鼠模型,采用Morris水迷宫以及5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU,一种神经干细胞DNA合成的标记物）单标、BrdU＋NF（神经丝,成熟神经元的标志物）双标、BrdU＋GFAP（胶质原纤维酸性蛋白,成熟星形胶质细胞的标志物）双标的免疫组织化学方法,测试大鼠的空间学习记忆能力,并在光镜下观察处于海马齿状回神经发生过程中的细胞存活、迁移和分化的程度。结果1型糖尿病脑病模型大鼠的空间学习能力,海马齿状回BrdU单标、BrdU＋NF双标和BrdU＋GFAP双标的阳性细胞数均明显下降（P〈0.01）;用胰岛素治疗后可提升以上各项指标几乎接近正常水平（P〈0.01）,但各种阳性细胞形态以及细胞迁移的方向、路径和终点均不受到明显的影响。结论个体内长期缺乏胰岛素,导致海马齿状回神经干细胞生存率和分化率下降,可能是诱发1型糖尿病脑病的一个因素;尽早用胰岛素进行干预可逆转神经发生障碍和学习记忆异常,这将有利于防治该脑病的发生。     

胰岛素逆转1型糖尿病脑病模型大鼠海马齿状回神经发生障碍与空间学习记忆异常的研究

目的 揭示海马齿状回神经发生与1型糖尿病脑病发病的相互关系以及用胰岛素干预后所发生的变化.方法 分别用链脲佐菌素和胰岛素建立1型糖尿病脑病大鼠模型和胰岛素治疗大鼠模型,采用Morris水迷宫以及5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU,一种神经干细胞DNA合成的标记物)单标、BrdU+NF(神经丝,成熟神经元的标志物)双标、BrdU+GFAP(胶质原纤维酸性蛋白,成熟星形胶质细胞的标志物)双标的免疫组织化学方法,测试大鼠的空间学习记忆能力,并在光镜下观察处于海马齿状回神经发生过程中的细胞存活、迁移和分化的程度.结果 1型糖尿病脑病模型大鼠的空间学习能力,海马齿状回BrdU单标、BrdU+NF双标和BrdU+GFAP双标的阳性细胞数均明显下降(P＜0.01);用胰岛素治疗后可提升以上各项指标几乎接近正常水平(P＜0.01),但各种阳性细胞形态以及细胞迁移的方向、路径和终点均不受到明显的影响.结论 个体内长期缺乏胰岛素,导致海马齿状回神经干细胞生存率和分化率下降,可能是诱发1型糖尿病脑病的一个因素;尽早用胰岛素进行干预可逆转神经发生障碍和学习记忆异常,这将有利于防治该脑病的发生.     

Kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏树突状细胞对T细胞分化格局的改变

背景:Kinectin作为树突状细胞瘤苗可运用于肝癌临床免疫治疗.目的:检测kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏的树突状细胞刺激T细胞亚群的分化情况.方法:运用免疫组化法检测kinectin-麦芽糖结合蛋白孵育的树突状细胞刺激增殖的T细胞中CD4+、CD8+ T细胞亚群活化情况,同时设立麦芽糖结合蛋白组、非致敏树突状细胞组及普通培养T细胞组作为比较.结果与结论:Kinectin-麦芽糖结合蛋白致敏树突状细胞刺激的T细胞组CD8+T细胞明显高于麦芽糖结合蛋白孵育树突状细胞刺激的T细胞组、非致敏树突状细胞刺激组及普通培养T细胞组(P < 0.05);各组CD4值之间、CD4/CD8值之间比较,差异无显著性意义(P > 0.05).经Kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏的树突状细胞能有效刺激自体CD8+ T淋巴细胞的增殖,Kinectin-麦芽糖结合蛋白作为肝癌相关抗原可通过致敏树突状细胞发挥较明显的抗肿瘤功能.     

GCF2基因片段原核表达载体的构建与鉴定

目的 构建肝癌相关抗原GCF2基因片断(323～1 234 bp)原核表达重组质粒.方法 提取人肝癌组织总RNA,通过反转录酶合成cDNA;根据GenBank公布的GCF2基因cDNA序列设计引物,利用RT-PCR法扩增出人GCF2基因片断(编号2-5a),将此片段连接在克隆载体pGEM-T上进行测序,通过酶切、连接将...     

燃煤型砷中毒流行因素的累积比数模型

为探讨燃煤型砷中毒流行因素的作用,用累积比数模型对151例不同程度砷中毒患者、16例病区内对照、53例病区外对照的暴露因素进行了分析.结果发现危险因素按作用大小依次是燃用高砷煤的年限、居室通风情况差、发砷及尿总砷负荷高、吸烟、氟中毒(OR>1,P<0.05);影响因素有文化程度和家庭经济状况(OR<1,P<0.05).提示应采取综合措施来预防燃煤型砷中毒.     

Kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏树突状细胞对T细胞分化格局的改变

背景：Kinectin作为树突状细胞瘤苗可运用于肝癌临床免疫治疗。 目的：检测kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏的树突状细胞刺激T细胞亚群的分化情况。 方法：运用免疫组化法检测kinectin-麦芽糖结合蛋白孵育的树突状细胞刺激增殖的T细胞中CD4⁺、CD8⁺ T细胞亚群活化情况,同时设立麦芽糖结合蛋白组、非致敏树突状细胞组及普通培养T细胞组作为比较。 结果与结论：Kinectin-麦芽糖结合蛋白致敏树突状细胞刺激的T细胞组CD8⁺T细胞明显高于麦芽糖结合蛋白孵育树突状细胞刺激的T细胞组、非致敏树突状细胞刺激组及普通培养T细胞组(P < 0.05);各组CD4值之间、CD4/CD8值之间比较,差异无显著性意义(P > 0.05)。经Kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏的树突状细胞能有效刺激自体CD8⁺ T淋巴细胞的增殖,Kinectin-麦芽糖结合蛋白作为肝癌相关抗原可通过致敏树突状细胞发挥较明显的抗肿瘤功能。     

浅议系统解剖学本科生大课与实习课学时比例的调整

一直以来 ,我校系统解剖学本科生大课与实习课学时比例保持在 1∶ 13左右。即整个课程分成四次大课来讲授 ,运动系、内脏系、脉管系、感官与神经系各一次 ,共 8个学时。其余内容全部放到实习课学习。今年春季从 2 0 0 1级开始 ,调整大课与实习课学时比例为 1∶ 1,即每周一次大课配一次实习课。　　过去的做法其特点是大课只讲授一些基本的理论 ,而各系统器官的具体形态结构安排到实验室学习。整个教学的重心是放在实习课。采取这种做法是由解剖学是一门特殊的形态学课决定的。在大课课堂上 ,教师虽可以用挂图等形式来展示器官的形态结构 ,但…     

系统解剖学教具设备的特点和展望

目前系统解剖学教学中仍然以实验教学为主,主要使用的教学技术手段是尸体标本观察并辅以多媒体课件教学。解剖学工作者也在不停探索更好的教学技术手段。我们期望通过本文抛砖引玉,激发大家共同探讨,集思广益,以期结束一个福尔马林时代,开启一个新的无害、高效技术时代。1各种现有教具设备的特点1.1普通福尔马林防腐固定标本:普通福尔马林防腐技术仍是尸体处理的主要技术手段。这样处理后的标本有较好的防腐和固定效果,标本保持良好的形态和弹性,仍然是目前解剖实验示教中最好的教学材料。但在实际的使用中易损坏,尤其是福尔马林有强烈的刺激性,长期使用可能导致癌的发生。因为这样的缘故,使得教学效果大打折扣。因此,研制寻找新的无挥发无刺激性无毒性的甲醛替代品就成了当务之急。有解剖学工作者尝试使用食盐、消毒剂、丙二醇混合液做防腐固定剂,取得良好的效果[1]。也有解剖学工作者将已制作好的标本浸泡于新洁尔灭中4个小时,然后取出,发现此时标本仍能保持良好的弹性,但已无福尔马林挥发的刺激性。可以设想,用福尔马林浸泡透标本后,用某种涂剂涂被在标本表面隔绝并防止标本深部福尔马林挥发,也许是未来的一个新的发展方向。1.2防护服装设备:目前的防护服装笨重,使用...     

褪黑素替代治疗对去松果体成年大鼠齿状回神经干细胞增殖及学习记忆的影响

目的：分析褪黑素替代治疗对去松果体成年大鼠神经干细胞增殖及学习记忆的影响。方法：实验于2004—06／2005—03在广西医科大学基础医学院解剖学教研室完成。将40只成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为5组：假手术组、去松果体组、褪黑素20μg／kg、200μg／kg和2mg／kg组。术后第2天开始进行干预，分别按20μg／kg、200μg／kg和2mg／kg剂量将褪黑素溶于0.5mL的50g／L乙醇-生理盐水，每天在固定时间（18：00）腹腔注射1次，连续给药21d。在相同条件下，每天给予假手术组或去松果体组的每只大鼠腹腔注射0.5mL的50g／L乙醇一生理盐水。用Morris水迷宫测定大鼠的学习记忆能力，用免疫组织化学方法检测齿状回颗粒细胞下区的增殖细胞核抗原阳性细胞的变化。结果：40只大鼠实验中无死亡，全部纳人结果分析。①去松果体组大鼠平均逃避潜伏期较假手术组明显延长，差异有显著性[（32．02&;#177;2．54），（18．58&;#177;1．97）s，P〈0．01]。褪黑素20μg/kg组和200μg/kg组的平均逃避潜伏期较假手术组稍延长[（23．29&;#177;2．74），（24．94&;#177;2．81），（18．58&;#177;1．97）s，P〉0．05]，但比去松果体组明显缩短，差异有显著性（P〈0．01）。褪黑素2mg／kg组的平均逃避潜伏期（30．57&;#177;2．43）s比假手术组、褪黑素20μg／kg、200μg／kg组明显延长（P〈0．01），并接近去松果体组的水平（P〉0．05）。（雪去松果体组大鼠平均游泳距离明显大于假手术组，差异有显著性[（826．24&;#177;32．28），（611．27&;#177;27．63）cm，P〈0．01]。褪黑素20μg／kg和20μg／kg组的平均距离均明显小于去松果体组[（680．27&;#177;25．15），（692．96&;#177;26．42）cm，P〈0．01]，而褪黑素2mg／kg组大鼠的平均距离（804．81&;#177;34．22）cm均明显大于假手术组、褪黑素20μg／kg、200μg／kg组（P〈0．01），并接近去松果体组的水平（P〉0．05）。③齿状回颗粒细胞下区的增殖细胞核抗原免疫反应产物定位于细胞核，呈棕黄色。增殖细胞核抗原阳性细胞核呈圆形、椭圆形或梭形，各组大鼠的增殖细胞核抗原阳性细胞核的形态无明显差异。去松果体组增殖细胞核抗原阳性细胞数较假手术组，差异有显著性[（58．50&;#177;7．73），（82．69&;#177;7．36）个／切片，P〈0．01]。褪黑素20μg／kg、200μg／kg组的增殖细胞核抗原阳性细胞[（74．20&;#177;6．74），（72．00&;#177;6．77）个／切片]分别较去松果体组升高37．6％和23．1％，差异有显著性（P〈0．01），但仍未能达到假手术组的水平（P〈0．01）。褪黑素2mg／kg组的增殖细胞核抗原阳性细胞数（61．23&;#177;6．61个／切片）分别比假手术组、褪黑素20μg／kg、200μg／kg组下降25．9％、17．5％及14．9％，组间差异有高度显著性（P〈0．01），并接近去松果体组的水平（P〉0．05）。结论：低剂量（20μg／kg，200μg／kg）的褪黑素替代治疗对去松果体成年齿状回颗粒细胞下区神经干细胞增殖及学习记忆能力均有相似的正性调节作用，而高剂量（2mg／kg）的褪黑素替代治疗对上述指标具有负性调节作用；去松果体或褪黑素替代治疗与否，神经干细胞的形态均无明显的改变，提示褪黑素的作用可能是通过神经干细胞上的相应受体介导的机制使增殖细胞核抗原表达上调，加速细胞周期进程，促进神经干细胞增殖和分裂。     

去松果体后成年大鼠学习记忆及侧脑室室管膜下区神经干细胞增殖的变化

目的观察松果体切除对学习记忆及侧脑室室管膜下区(SVZ)神经干细胞增殖的影响。方法将30只成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为非手术、假手术及去松果体组,每组大鼠10只。在建立动物模型16d后,连续5d测定大鼠在Morris水迷宫的学习记忆能力,继之用免疫组织化学方法观察SVZ的增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞的变化。结果去松果体组大鼠在Morris水迷宫泳游的逃避潜伏期及在原平台象限游泳距离的百分比均较非手术组或假手术组大鼠的明显延长或减少(P<0.01)。去松果体大鼠SVZ的PCNA阳性细胞数也明显低于非手术组或假手术组大鼠(P<0.01)。结论本研究首次观察到,去松果体使体内褪黑素减少,可导致学习记忆功能及SVZ神经干细胞增殖能力出现相似的明显下降趋势,说明褪黑素是确保学习记忆及神经发生得以正常进行的重要激素之一;提示褪黑素可能直接通过作用于神经干细胞上的相应受体以及间接通过提高基底前脑胆碱能系统功能来促进神经干细胞增殖,进而提高嗅觉记忆功能。