肝豆状核变性的基因诊断

应用ｐＣＲ１３２４探针（Ｄ１３Ｓ３１）检测了中国人中ＴａｑⅠ和ＰｖｕⅡ位点的多态性、多态片段及频率，分别为：ＴａｑⅠ位点，４．２ｋｂ（０．６０）／６．５ｋｂ（０．４０）（ＰＩＣ０．３６）；ＰｖｕⅡ位点，４．６ｋｂ（０．６４）／６．５ｋｂ（０．３６）（ＰＩＣ０．３５）；与白种人相似。由此二位点组成４种单体型，频率分别为０．２６、０．３４、０．１５和０．２５，ＰＩＣ为０．７２。应用此二位点及ＲＢ／ＸｂａⅠ和Ｄ１３Ｓ２６／ＨｐｈⅠ位点对北方地区２０个肝豆状核变性家系进行ＲＦＬＰ单体型连锁分析，确定了相关个体的基因型。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因对肝癌细胞杀伤作用及旁观者效应研究

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因在诱导肝癌细胞凋亡时是否存在旁观者效应，以及旁观者效应的可能机制。方法 构建表达TRAIL基因的双腺病毒载体系统Ad／GT-TRAIL Ad／PGK-GV16，通过293包装细胞产生的病毒上清液将TRAIL基因转入肝癌细胞SMMC7721细胞中，RT-PCR检测TRAIL基因的表达，以MTT法检测细胞生长抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率；不同比例混合培养SMMC7721／TRAIL和SMMC7721细胞，检测混合细胞生长抑制率来评价TRAIL基因的旁观者效应，并以滤去细胞成分的转染细胞培养液培养未转染细胞，观测可溶性因子在TRAIL基因旁观者效应中的作用。结果 TRAIL基因对SMMC7721细胞的生长抑制率与PBS、LacZ基因和Bax基因比较，差异有显著性(P＜0．05)；SMMC7721细胞的凋亡率，TRAIL基因与PBS、LacZ基因和Bax基因比较，差异有显著性(P＜0．05)；混合细胞的生长抑制率，以SMMC7721／TRAIL占0％时为0，占5％时为15．9％，占25％时为67．0％，占50％时为80．2％，占100％时为87．7％；以PBS对SMMC7721的生长抑制率为0，则滤去细胞成分的转染细胞培养液对SMMC7721的生长抑制率为4％，两者差异无显著性。结论 双腺病毒载体系统介导的TRAIL基因对肝癌细胞有明显的抑制生长和促凋亡作用，并存在旁观者效应，可溶性因子在TRAIL的旁观者效应中不起作用。     

~(35)S参入试验诊断粘多糖贮积症

粘多糖贮积症(MPS)是一组遗传性疾病,由溶酶体分解糖胺聚糖(GAG)的酶缺陷,使其在细胞中贮积所致。目前至少已发现10种不同的溶酶体酶缺陷可引起本病。表现为多发性骨畸形,侏儒,智力低下,尿GAG排出增加。按其临床表现以及酶缺陷的不同分六型。本病的实验诊断基于尿GAG分析,皮肤成纤维细胞~(35)S参入试验与酶学分析,后两者可以确诊本病并进行定型。     

亲代印迹与遗传病

许多资料表明,来自父母双方的基因在功能上存在着差异,这一现象被称为亲代印迹。亲代印迹与一些遗传性疾病的外显率、表现度及肿瘤易患性等有关。越来越多的证据说明来自父母双方的染色体或基因存在着功能上的差异,这种由双亲性别决定的基因功能上的差异被称之为亲代印迹(parental imprinting)。可以肯定印迹与基因在男女生殖细胞分化过程中受到不同的修饰有关,这些修饰使得一条染色体或一个基因包含了亲代来源的信息。目前尚不知道印迹发生的分子机理,可能与基因的甲基化有关。本文综述了基因组印迹与人类遗传病的关系。     

限制性片段长度多态性分析

不同个体在DNA结构上存在着差异,在不编码蛋白质的区域及没有重要调节功能的区域,DNA结构的个体差异更为明显。基因组中一个特定的基因座位(DNA序列)若存在两种或两种以上的状态(等位基因),而且其中任何一个等位基因在人群中的频率不低于1％,这一现象被称为多态性。DNA多态性本质上是染色体DNA中核苷酸数目或排列顺序的个体差异,这些差异多数为中性突变,不引起表型改变。DNA多态性可应用不同的方法进行检测,如DNA序列分析、PCR片段长度多态性(PCR-FLP),单链DNA构型多态性等。当DNA     

端粒酶启动子肿瘤靶向基因抗大肠癌的研究

目的探讨端粒酶 (hTERT)启动子驱动的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF relatedapoptosis inducingligand ,TRAIL)基因在大肠癌细胞DLD1的表达及肿瘤杀伤作用。方法通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TRAIL基因转入大肠癌细胞DLD1,流式细胞仪检测GFP/TRAIL的表达和DLD1细胞凋亡率。结果端粒酶启动子驱动的GFP/TRAIL基因和CMV启动子驱动的GFP(绿色荧光蛋白 )基因在DLD1内的表达率分别达 4 1 6 3%和 5 4 0 7% ;GFP/TRAIL基因对DLD1细胞的生长抑制率和凋亡率分别达 93 5 0 %和 5 6 97% ,与PBS和Ad/hTERT LacZ的差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论端粒酶启动子驱动的GFP/TRAIL融合基因在大肠癌细胞中能够有效地表达 ;TRAIL基因对大肠癌细胞DLD1有明显的抑制生长和促凋亡作用。     

中国人慢性舞蹈症的基因分析（简报）

中国人慢性舞蹈症的基因分析（简报）严韶峰，黄尚志，高秀贤，王玫，方炳良，李辉，罗会元（中国医学科学院，中国协和医科大学，北京基础医学研究所，１００００５）亨廷顿病（Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎｄｉｓｅａｓｅ，Ｈｎ）又称慢性进行性舞蹈病，为常染色体显性遗传，是...     

中国人遗传性慢性舞蹈病病因的确定

国外报道的亨廷顿病有１／３的家系可追溯到共同的祖先，而国内报道的亨廷顿病多为散发病例。为了查明国内报道的遗传性慢性舞蹈病与国外报道的亨廷顿病是否属同一种病因。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法分析了中国正常人和遗传性慢性舞蹈病家系成员的ＩＴ１５基因中（ＣＡＧ）ｎ重复序列。结果２５个正常人拷贝数为１６～２６，来自４个家系的７名患者的拷贝数为４４～５３，显著增大。结论从基因水平第１次确定了中国人遗传性慢性舞蹈病与白种人的享廷顿舞蹈病一样，是由ＩＴ１５基因中（ＣＡＧ）ｎ重复序列扩增所致。     

华北地区苯丙氨酸羟化酶基因的RFLP单体型与突变位点分析

本文分别分析华北地区28个苯丙酮尿症(PKU)家系苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因限制酶切片段长度多态性(RFLP),及42个PKU家系PAH基因外显子3(Arg~(111)→终止码)及外显子6(Tyr~(204)→Cys)突变位点。RFLP单体型分析表明,华北地区人群中约77％的正常染色体与79％的PKU突变基因染色体与单体型4相关,同时发现两种新的单体型——单体型49与单体型50;在群体中只有37％的个体为单体型杂合子,并可提供连锁分析所需的信息。应用聚合酶链反应(PCR)及寡核苷酸探针杂交法检测42个PKU家系PAH基因外显子3(Arg~(111)与外显子6(Tyr~(204)的突变位点,结果表明两者分别占华北地区PKU点突变的3.6％与9.5％。     

神经系统遗传病的基因分析

本文综述Huntington舞蹈病、多发性神经纤维瘤及Wilson病等3种累及神经系统遗传病的分子遗传学研究与基因诊断进展。多发性神经纤维瘤基因位于17q11.2,已被克隆,基因编码的mRNA为13kb;Huntington病基因位于4p16.3;Wilson病基因位于13q14-q21;后两者的基因均未被克隆.