人胎盘造血干/祖细胞的增殖分化能力

近年来有研究表明，人胎盘组织富含造血干细胞，而且其CD34^＋CD38^-、CD34^＋CD38^＋造血干／祖细胞（HSPC）的百分率明显高于脐血。但有关人胎盘组织CD34^＋HSPC亚群的增殖分化能力的研究却未见报道。我们采用免疫磁珠分选人胎盘组织CD34^＋CD38^-和CD34^＋CD38^＋HSPC亚群，并用不同培养体系进行血细胞集落培养，以评价其增殖分化能力。     

古尼虫草多糖及其解聚物的免疫活性

目的　比较研究古尼虫草纯多糖组分FP及其解聚物的免疫活性。方法　采用超声波解聚多糖 ,并用葡聚糖凝胶分离获得解聚级分 ,通过MTT法和中性红比色法测定其对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能和细胞毒T淋巴细胞杀伤功能的影响。结果　FP的解聚级分FP 1、FP 2和FP 3有更强的免疫活性 ,在中、低剂量 (1和 10 μg mL)与对照相比有显著差异 ,而其中以FP 2的活性最明显。结论　古尼虫草多糖解聚后能明显提高免疫活性 ,为多糖生物制品研究开发提供了一条新途径     

人胎盘CD133^＋细胞具有LTC-IC集落启动细胞特性

本研究从功能上评价人胎盘CD133^＋细胞是否具有长期造血重建功能。采用免疫磁殊激活分选系统（MACS）富集胎盘CD133^＋细胞作为测试细胞,采用有限稀释法（LDA）设置4种不同浓度的测试细胞,用胎儿原代骨髓基质细胞制备的饲养层细胞共培养于长期培养体系中,以检测测试细胞中长期培养启动细胞（LTC—IC）的发生率及其增殖分化能力。结果表明：人胎盘CD133^＋细胞群中含有LTC—IC,其发生率为1／645;LTC—IC具有增殖分化为粒-单集落形成单位（CFU—GM）和混合集落形成单位（CFU—Mix）的能力;在所有LTC—IC阳性孔中,产生CFU—GM的孔占总阳性孔的71．4％,产生CFU—GM和CFU—Mix的孔占总阳性孔的28．6％。结论：人胎盘组织CD133^＋细胞群中存在LTC—IC,并具有造血早期祖细胞集落形成能力。     

高血压大鼠动脉平滑肌细胞钙超载与腺苷三磷酸酶

目的探讨自发性高血压大鼠(SHR)动脉血管平滑肌细胞钙超载与腺苷三磷酸酶(ATPase)的关系.方法组织块种植法培养SHR和Wistar-Kyoto( WKY )大鼠胸主动脉平滑肌细胞,应用流式细胞术、生化酶学方法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术等检测SHR和WKY大鼠动脉平滑肌细胞内游离钙浓度([Ca2 ]i)、细胞膜Ca2 -ATPase和Na -K -ATPase活性及其mRNA表达水平.结果SHR动脉平滑肌细胞[Ca2 ]i浓度高于WKY大鼠[(307.7±32.1 vs 118.9±21.4)nmol/L,P<0.01)],Ca2 -ATPase和Na -K -ATPase活性低于WKY大鼠(1.3±0.2 vs 2.6±0.3; 3.1±0.5 vs 4.9±0.5,P均<0.01),细胞质膜Ca2 -ATPase(plasma membrane Ca2 -ATPase, PMCA)亚型1和Na -K -ATPase α1亚单位 mRNA表达低于WKY大鼠(0.231±0.007 vs 0.403±0.021;0.253±0.028 vs 0.634±0.033,P均<0.01).结论SHR动脉平滑肌细胞出现钙超载,其机制可能部分与细胞膜PMCA和Na -K -ATPase活性降低有关,两种ATPase功能降低可能是其基因转录水平下调的结果.     

关于"惠民"医疗服务的实践与思考

为体现党和政府对社会特殊困难群体的关怀,江苏省委、省政府在“十一五“规划中明确提出了解决特困群体“看病贵“的工作目标.南京市卫生局决定今年在原有二级“惠民医院“的基础上,遵循世界卫生组织提出的“儿童优先,母亲安全“的医疗保障原则,新增南京市儿童医院、妇幼保健院进入“惠民医院“的行列,拟在进一步为特困群众提供质优价廉的医疗服务,确保医疗安全.……     

单核细胞趋化蛋白-1及其受体在结核性胸膜炎患者中的表达

目的 探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体(CCR2)在结核性胸膜炎患者外周血和胸水中的表达情况.方法 采用流式细胞术检测结核性胸膜炎患者外周血单个核细胞及胸水细胞中的CCR2;用ELISA法检测结核性胸膜炎患者血清及胸水中的MCP-1.结果 结核性胸膜炎患者外周血中MCP-1和CCR2表达明显高于正常对照组[MCP-1:(340.8±220.8)与(9.0±3.8)ng/L,P＜0.01;CCR2:(18.2±10.1)%与(6.9±3.5)%,P＜0.05];外周血中MCP-1与CCR2两者呈正相关(r=0.227,P＜0.05),胸水中检测到MCP-1和CCR2表达.结论 MCP-1和CCR2在结核性胸膜炎患者外周血和胸水中的表达明显增加,是参与结核性胸膜炎发生发展的重要免疫分子.     

确证家兔外周血中存在具有多向分化能力的间充质干细胞

本研究确证家兔外周血中存在具有多向分化潜能的间充质干细胞（MSC）。取成年新西兰大白兔,经每日皮下注射粒细胞集落刺激因子30μg/kg动员6d后采集外周血样品,用Ficoll密度梯度离心和贴壁培养法分离纯化外周血间充质干细胞（PBMSC）,镜下观察其生长形态并绘制增殖曲线;流式细胞术分析其表型特征;并分别对培养的PBMSC进行成骨、成软骨及成脂细胞诱导分化能力鉴定。结果表明：①原代培养24h后,可见较多短梭形及多角形贴壁细胞,3-4d后出现集落样生长,传代培养的PBMSC形态均一、呈长梭形漩涡状生长;②PBMSC增殖能力旺盛,培养2d后进入对数生长期,细胞倍增时间为37．4h;③流式细胞术检测显示,培养的PBMSC高表达CD29,不表达CD14;④PBMSC经成骨诱导培养21d后,茜素红染色显示有明显的钙结节形成;经微团无血清软骨培养体系诱导培养21d后,细胞团切片,阿利新蓝染色呈强阳性反应;经成脂诱导培养21d后,油红染色显示诱导细胞胞浆内有大量脂滴。结论：成功从兔外周血中分离培养了PBMSC,在适宜诱导培养条件下具有向成骨、成软骨、成脂分化的能力。     

人羊膜间充质干细胞在大鼠受损肝组织中分化为肝细胞

背景:羊膜间充质干细胞在体外适当的诱导条件下可分化为肝细胞样细胞,而在受损肝脏原位是否可分化为肝细胞值得探讨。目的:观察人羊膜间充质干细胞在大鼠肝损伤原位植活及分化情况。方法:采用胰酶-胶原酶二酶消化法从羊膜组织中分离人羊膜间充质干细胞。采用腹腔注射D-氨基半乳糖建立大鼠肝损伤模型,随机分为2组,人羊膜间充质干细胞移植组造模后注射L-DMEM悬浮的人羊膜间充质干细胞悬液,对照组注射等量L-DMEM。结果与结论:①FCM分析结果显示,所分离的人羊膜间充质干细胞表达CD29、CD44和CD166;免疫荧光染色显示人羊膜间充质干细胞表达波形蛋白,不表达CK19。②与对照组比较,人羊膜间充质干细胞移植后肝病理无明显差异,均呈急性肝坏死病理改变。③免疫荧光双染色结果显示,人羊膜间充质干细胞移植后1周主要定植于肝小叶且表达CK19,至2周表达CK18,至3周表达Alb。结果表明,人羊膜间充质干细胞在大鼠受损肝组织中能被植活,且可分化为肝细胞,提示人羊膜间充质干细胞移植在临床肝病的治疗方面可能具有潜在应用价值。     

NO前药JS-K对HL-60细胞增殖、分化的影响

目的观察一氧化氮前体药物JS-K对白血病HL-60细胞增殖分化的影响。方法体外传代培养HL-60细胞,用不同浓度的JS-K处理HL-60细胞24～96h,MTT法测定细胞活力,观察细胞生长情况。流式细胞仪检测细胞分化的表面分子变化。结果按对数浓度差0.5的间距加入JS-K0.3～10μmol.L-1,处理24～96h,随着JS-K浓度的增加和作用时间的延长,MTT法检测所得各组的光密度值呈剂量依赖性和时间依赖性降低,细胞生长抑制率增高,JS-K作用96h抑制HL-60细胞增殖的IC50为(1.025±0.23)μmol.L-1。JS-K3和10μmol.L-1处理96h后,显微镜下可见细胞数量明显减少,细胞皱缩、细胞碎片明显增加。JS-K3μmol.L-1作用96h后,表达CD11b阳性和CD14阳性细胞的百分率明显提高。结论JS-K可明显抑制HL-60细胞的增殖,促进HL-60细胞分化。     

人胎盘CD133^＋、CD133^-细胞组份中高增殖潜能集落形成细胞及其表型特征的初步探讨

目的研究人胎盘CD133^＋、CD133^-细胞亚群中高增殖潜能集落形成细胞（HPP—CFC）频率及表型特征。方法采用机械法制备人胎盘组织（PT）游离细胞悬液,用Histopaque-1077分离出单个核细胞（MNCs）,经磁式分选（MACS）分离纯化CD133^＋和CD133^-细胞。将分选的CD133^＋和CD133^-细胞分别使用H4435培养基培养4wk后观察HPP—CFC集落形成能力,用流式细胞仪（FCM）对分选的细胞组份和HPP—CFC进行表型分析。结果培养4wk后,PT—CD133^＋、CD133^-细胞生成的HPP—CFC集落分别为32．4±11．2／5×10^3,2．0±2．3／5×10^3,前者细胞中HPP—CFC数量明显高于后者（P〈0．01）;PT—CD133^＋、CD133^-细胞培养至28d时CD133^＋CD34^＋,CD133^＋CD34^-和CD133^-CD34^＋亚型均比培养前减少。结论人胎盘组织CD133^＋与CD133^-细胞群中均存在HPP—CFC,但CD133^＋细胞群中的HPP—CFC明显多于CD133^-细胞群,说明胎盘CD133^＋细胞群中存在更多的早期HSPC。