抗肌萎缩蛋白免疫组化在青少年肌肉疾病中的诊断价值

目的 探讨抗肌萎缩蛋白(dystrophin)表达对青少年肌肉疾病诊断和鉴别诊断的价值.方法 应用免疫组织化学染色,对84例年龄＜25岁的肌肉疾病和2名正常肌肉活检组织进行dystrophin检测,同时用组织化学三磷酸腺苷酶(ATP酶)、还原性尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH-Tr)、改良Gomori、糖原PAS和脂肪苏丹Ⅲ染色法,同时对这些病例进行检测,以作为肌营养不良与其他肌肉疾病的鉴别诊断.结果 正常肌肉组织dystrophin表达强阳性.Duchenne型肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)中80%病例的肌纤维dystrophin免疫呈阴性反应,20%病例呈不连续点状或不完整线状弱阳性.在Becker型肌营养不良(Becket musculax dystrophy,BMD),所有的病例肌纤维都有不连续点状或不完整线状弱阳性,而其他类型的肌营养不良包括肢带型肌营养不良和强直型肌营养不良的肌纤维均为100%阳性率.另外,除1例糖原累积性肌病出现dystrophin弱阳性反应外,其他的肌肉疾病,包括炎症性肌病、线粒体肌病、神经源性肌萎缩、脂肪累积性肌病、轴空病和中央核肌病dystrophin阳性率为100%.结论 dystrophin免疫组化检测是诊断DMD/BMD可靠和有效的方法,结合形态学改变和组化染色,可以与其他肌肉疾病进行鉴别诊断.     

非婴儿型促纤维增生性节细胞胶质瘤一例

患者女,44岁.1 h前突发失语,随即意识丧失伴抽搐1次.既往长期服用抗焦虑精神抑制剂.人院体检未见精神、神经系统和语言障碍,MRI检查发现左额顶叶有一大的实性肿物,与大脑帘和顶骨相连,T1w信号不均匀,呈等信号到低信号;T2W呈低和高信号;增强扫描,病灶强化明显,并见脑膜强化、增厚,肿瘤周围明显水肿,占位改变明显,中线结构稍向右侧偏移,右脑室体部受压.临床诊断为脑膜瘤,与血管外皮瘤鉴别.     

TGF-β1和 EGFP 体外电转染兔骨髓间充质干细胞的实验研究

目的：通过电转染介导转化生长因子β1(TGF-β1)转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察Ⅱ型胶原表达的情况。方法用全骨髓细胞贴壁培养法分离、培养兔 BMSCs;诱导14 d 后,免疫组化和 Western blot 法检测Ⅱ型胶原表达。结果 BMSCs CD90表达阳性,CD31表达阴性;成功转染 TGF-β1至 BMSCs;通过免疫组化及 Western blot 法检测TGF-β1组细胞内Ⅱ型胶原有较强的表达,与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)组和空白对照组相比差异有统计学意义(P<0．05)。结论电转 TGF-β1质粒至兔 BMSCs,可以促进Ⅱ型胶原表达。     

端粒酶蛋白亚单位在骨巨细胞瘤组织中的表达

端粒酶使细胞在不断的分裂中逐渐丢失的端粒得以延长,我们过去在85%的骨侵袭性肿瘤中也检出有端粒酶活性,因此它被作为肿瘤细胞的一种标志.研究发现,端粒酶蛋白亚单位hTERT对端粒酶活性的调节具有重要的意义.本研究拟对临床骨巨细胞瘤标本进行hTERT基因的定量检测,并与肿瘤的组织学类型、分级及预后进行对比,分析hTERT的表达与肿瘤生物学行为之间的关系.     

人NY-ESO-1基因的原核表达、纯化和初步应用

目的：克隆人NY-ESO-1基因，进行原核表达和分离纯化，并初步应用于肝癌患者血清NY-ESO-1抗体的检测。方法：通过RT-PCR技术从人肝癌组织中扩增NY-ESO-1基因片段，插入原核表达载体pGEX4T-1( )中，构建重组表达质粒pGEx／ESO1，导入大肠杆菌BL21(DE3)，诱导目的蛋白表达，经包涵体透析复性和GSTrap亲和层析纯化目的蛋白，Westem blot鉴定。应用间接ELISA方法初步检测50例肝癌患者血清和20例正常人血清NY-ESO-1抗体的表达。结果：扩增得到NY-ESO-1基因3′端276bp片段，与GeneBank公布序列一致，构建的pGEX／ESO1原核表达质粒经IPTG诱导，在大肠杆菌中表达分子量约36kD的GST-ESO1融合蛋白，纯化后蛋白纯度为90％。50例肝细胞癌患者血清中4例检测到NY-ESO-1抗体(8％)，正常人血清均为阴性。结论：成功构建pGEX／ESO1重组表达质粒，得到有活性的NY-ESO-1融合蛋白，对肝癌患者血清NY-ESO-1抗体的检测有-定的应用价值。     

维甲酸和地塞米松对骨肉瘤细胞分化与端粒酶活性的影响

目的：观察维甲酸（ＲＡ）和地塞以（ＤＥＸ）对骨肉瘤细胞（ＨＯＳ）形态和功能分化的诱导作用以及分人化后细胞周期与端粒酶活性变化。方法：用ＲＡ和ＤＥＸ诱导ＨＯＳ细胞分化,观察分化后瘤细胞的细胞形态和功能细胞停留在Ｇ２/Ｍ期 ,细胞生长受到明显抑制,细胞形态和功能分化成熟,碱性磷酸酶（ＡＰ）活性明显升高,瘤细胞端粒酶活性随药物作用时间和浓度的增加而明显减弱。结论：ＲＡ和ＤＥＸ能诱导骨肉瘤细胞分化的形态和     

蛋白激酶C的活性变化对人肝癌细胞增殖及端粒酶表达的影响

目的:揭示蛋白激酶C(PKC)活性变化对人肝癌细胞增殖及端粒酶表达的影响。方法: 体外以PKC激活剂PMA(phorbol-12-myristate-13-acetate)及其抑制剂星形孢菌素(staurosporine,SP)作用于人肝癌细胞系(BEL-7402)48 h后,运用TRAP-银染(telomeric repeat amplification protocol silver staining)与计算机图像凝胶扫描记录技术结合的方法来揭示细胞端粒酶活性、PKC变化与细胞增殖的关系。结果:PMA与SP的作用,促进其细胞增殖抑制的同时,抑制其细胞端粒酶活性表达。结论:PKC的活性变化与人肝癌细胞增殖相关,并可能与端粒酶的活性表达关联。     

骨巨细胞瘤瘤组织中M-CSF、TNF-Α的检测及其意义

目的:探讨细胞因子与骨巨细胞瘤局部溶骨的关系.方法:通过ELISA法、WESTERN BLOT法和免疫组化法对10例骨巨细胞瘤、5例骨肉瘤和5例正常人血清进行了TNF-Α和M-CSF表达及定位检测.结果:骨巨细胞瘤组织TNF-Α含量和M-CSF表达率明显高于骨肉瘤和正常人血清.TNF-Α由骨巨细胞的部分单核基质细胞和多核巨细胞分泌;而M-CSF由部分单核基质细胞分泌,多核巨细胞则不表达.结论:骨巨细胞瘤中各种细胞分泌不同的细胞因子可能参与该肿瘤的局部骨质吸收.     

恶性肿瘤细胞体外诱导逆转过程中端粒酶活性变化的研究

目的 观察骨肉瘤细胞株HOS和神经母细胞瘤细胞株Neuro-2A在体外诱导逆转中端粒酶活性的变化。探讨端粒酶活性作为恶性肿瘤细胞逆转指标的意义。方法 体外用维甲酸（RA）和1，7-二羟夹氧蒽酮（DX-1）分别对HOS和Neuro-2A细胞进行逆转诱导，观察处理后瘤细胞的形态和功能变化，并采用TRAP-银染法检测诱导逆转过程中瘤细胞端粒酶活性的改变。结果 经诱导剂处理后，HOS和Nenro-2A细胞生长均受到明显抑制，形态和功能检测显示细胞出现逆转改变，HOS细胞的端粒酶活性随诱导剂作用时间的延长及其浓度的增加明显减弱，Neuro-2A细胞株在中，低剂量诱导剂作用下。端粒酶活性无明显下降，仅高剂量组端凿酶活性明显下降。结论 HOS和Neuro-2A细胞株在体外诱导恶性逆转的过程中，瘤细胞形态和功能均出现明显改变。端粒酶活性的下调可作为部分恶性肿瘤细胞恶性逆转的指标之一。     

病理学实习课因人施教法的尝试

在本科生的一个班进行了实习课因人施教的尝试 :采用学习类型分类法对学生进行分类 ,然后根据每个学生的不同学习类型在实习课中进行不同教学方法的施教。实验表明 ,实验班的学生实习课、理论课成绩和总成绩都比对照班高。实践提示 ,这种教学方法能针对不同的学习对象施教 ,在病理实习课中最大限度发挥教与学的潜力