脂质体载体法转染成纤维细胞的最佳条件

目前基因转染的方法有多种,其中磷酸钙ＤＮＡ沉淀法应用较为广泛,但其转化效率不高,且不太适用于悬浮细胞和原代细胞培养的上皮细胞的转化〔１〕。本文介绍的Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ是一种新的多阴离子转染脂质体,其独特的精胺基团强负电子头部可自发地与ＤＮＡ...     

α1(Ⅰ)型前胶原基因反义重组质粒对成纤维细胞的影响

目的：研究反义RNA对成纤维细胞胶原蛋白的调控作用,探讨基因治疗增生性瘢痕的可能性。方法：将α1（Ⅰ）型前胶原基因片段反向克隆至非整合型哺乳动物表达载体pREP9的多克隆位点中,以构α1(Ⅰ)丧胶原基因反义RNA表达载体pREP9-AScoll,并籍脂质体－lipofectamine将其导入人肺HLF细胞中,运用MTT试验,电镜,3H－氨酸掺入法检测反义RNA表达载体对HLF细胞的影响。结果：外源重组体pREP9-AScoll对胶原蛋白的合成有明显抑制作用,但对细胞增殖无任何影响。结论：α1（Ⅰ）型前胶原基因反义重组质粒能有效调控胶原蛋白的合成,从而有在基因水平防治瘢痕的前景。     

非婴儿型促纤维增生性节细胞胶质瘤一例

患者女,44岁.1 h前突发失语,随即意识丧失伴抽搐1次.既往长期服用抗焦虑精神抑制剂.人院体检未见精神、神经系统和语言障碍,MRI检查发现左额顶叶有一大的实性肿物,与大脑帘和顶骨相连,T1w信号不均匀,呈等信号到低信号;T2W呈低和高信号;增强扫描,病灶强化明显,并见脑膜强化、增厚,肿瘤周围明显水肿,占位改变明显,中线结构稍向右侧偏移,右脑室体部受压.临床诊断为脑膜瘤,与血管外皮瘤鉴别.     

NY-ESO-1致敏树突状细胞诱导的CTL对肝癌细胞株的特异性杀伤作用

目的：探讨肿瘤睾丸抗原NYESO1（New Yorkesophageal1）致敏树突状细胞体外诱导特异性CTL对肝癌细胞株的杀伤作用。方法：重组质粒pGEXESO1经原核诱导表达并纯化GSTESO1融合蛋白肽。重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGMCSF）和白细胞介素4（rhIL4）诱导培养人外周血来源的树突状细胞（dendritic cells, DCs）,经GSTESO1融合蛋白肽致敏后诱导特异性CTL增殖。以此CTL为效应细胞,分别以NYESO1阳性表达的肝癌细胞株HepG2和不表达NYESO1的肝癌细胞株H2P为靶细胞,MTT法检测CTL对肝癌细胞株的杀伤作用。结果：重组质粒pGEXESO1经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达相对分子质量约36 000的GSTESO1融合蛋白肽,纯化后的质量浓度为50 μg/ml;经rhGMCSF和rhIL4联合诱导成功培养人外周血DCs,其表型分子HLADR为91.4%、CD86为70.5%、CD83为71.2%、CD80为55.3%。NYESO1致敏的DCs能明显诱导CTL增殖,此CTL对肝癌细胞株HepG2的杀伤率显著高于GST刺激组、未致敏DC组和无DC刺激组(均P<0.05),效靶比为50∶1时杀伤效应达到最高峰\[(53.23±3.78)%,P<0.01\];相同条件下CTL对H2P细胞无特异性杀伤作用。结论： NYESO1抗原致敏的DCs在体外可诱导同种CTL产生和增殖,后者对NYESO1阳性肝癌细胞株具有特异性杀伤效应,该方法为肝癌免疫治疗提供了一条新思路。     

颅内原发性Rosai-Dorfman病1例报道及文献回顾

背景与目的：Rosai-Dorfman病（Rosai-Dorfman disease,RDD）是一种少见的良性组织细胞增生性疾病,多位于淋巴结内,颅内RDD极少见。本文探讨颅内RDD的病理、诊断、鉴别诊断及治疗。方法：对1例颅内RDD病例进行病理形态观察和免疫组化检测,并对文献报道进行回顾。结果：本例患者病灶位于右侧额、颞部和基底池,肿物基底位于硬膜。病理和免疫组化见病变组织由数量不等的成熟淋巴细胞、浆细胞及S-100、CD68标记阳性的组织细胞构成,组织细胞内有吞噬淋巴细胞或淋巴细胞＂伸入现象＂。结论：原发性颅内窦组织细胞增生症是一种原发于中枢神经系统的罕见的良性组织细胞增生性疾病,缺乏特异性临床表现,确诊依赖病理学检查。因本例在颅内有多个病灶,手术难以全部切除,采用保守治疗包括使用激素效果良好。     

TNF—α、M—CSF及IL—1在骨巨细胞瘤中的表达及其意义

目的：探讨细胞因子与骨巨细胞瘤局部溶骨的关系。方法：采用ELISA法、Western blot分析和免疫组化双染检测了10例骨巨细胞瘤、5例骨肉瘤和5例正常人血清中TNF－α、含量和M－CSF、IL－1的表达,结果：骨巨细胞瘤组织TNF－α、含量和M－CSF表达率明显高于骨肉瘤和正常人。TNF－α、由骨巨细胞的部分单核基因细胞和多核巨细胞分泌;而－CSF及IL－1由部分单核基质细胞份泌,多核巨细胞则不表达。结论骨巨细胞瘤中各种细胞份泌不同的细胞因子可能与该肿瘤的局部溶骨过程。     

光敏剂mTHPC诱导骨肿瘤细胞凋亡的机制

目的 研究光敏剂对体外培养的人骨肉瘤HOS细胞的作用。方法 在HOS细胞的培养液中加入光敏剂,并孵育一段时间,经光照发挥其光敏作用。结果 经光敏作用后,HOS细胞出现了凋亡现象,表现为荧光染色出现凋亡小体及琼脂糖凝胶电泳见到特征性的梯度条带。结论 光敏剂有诱导HOS细胞凋亡作用。     

远志抽提物DX-1对神经母细胞瘤分化的诱导作用

目的观察神经母细胞瘤细胞分化诱导后形态学改变和端粒酶活性的变化.方法用中药远志抽提物1,7-二羟夹氧蒽酮(DX-1)诱导神经母细胞系Neuro-2A细胞分化,观察分化后瘤细胞的存活率、细胞倍增时间,以及细胞轴突树状突形成、长短和数目,并用TRAP银染法检测分化前后瘤细胞端粒酶活性的改变.结果用DX-1处理后,Neuro-2A细胞生长受明显抑制,其倍增时间延长1.1～13.0倍.在高剂量组(0.1mmol/L)大部分细胞死亡,仅存少量细胞分化成熟.各处理组的瘤细胞呈现神经细胞分化,胞浆具有轴突和树状突样突起,一些突起互相对接,或交织成网状结构.然而,经中、低剂量DX-1作用后,瘤细胞端粒酶活性未见明显的差异,仅在高剂量时端粒酶活性明显下降,甚至完全消失.结论DX-1可诱导体外培养的Neuro-2A细胞分化.在中、低剂量时,瘤细胞出现轴突和树状突突起.在高剂量时,DX-1对瘤细胞有一定的抑制和杀灭作用.在瘤细胞分化过程中,端粒酶活性并不出现明显的变化.     

睾丸网腺癌(1例报告并文献复习)

目的了解睾丸网腺癌的发病和临床特点，提高其早期诊断和治疗水平。方法分析1例睾丸网腺癌患者的临床资料，并结合文献对睾丸网腺癌的临床病理特点、早期诊断和治疗进行讨论。结果术前诊断为左睾丸鞘膜积液、左睾丸肿瘤待排，遂行左高位睾丸切除术，术后病理检查诊断为睾丸网腺癌。免疫组化：AFP（-），PLAP（-），CK（＋），CD30（-），CK20（＋）。术后CT示肝内多发转移瘤、左肾和左肾上腺转移改变。结论睾丸网腺癌是原发于睾丸网纵膈的恶性肿瘤，极为罕见，其临床表现独特，基本治疗是根治性睾丸切除术辅以根治性腹膜后淋巴结清扫术，放疗和化疗效果欠佳。该病预后差，文献报道5年生存率仅为13％。     

多轴空病患者一例临床和病理特征分析

多轴空病（multicore disease or minicore disease）是一种非进展或缓慢进展的先天性肌病，临床特点是婴儿或儿童期出现肌无力和肌张力低下，多合并关节挛缩、骨骼畸形和心脏异常。该病非常罕见，病因及发病机制不清楚，由Engel等。于1966年首先描述，国内尚未见报道。我们将1例经肌活检确诊的胎儿期即有症状的多轴空病患者报道如下，结合文献探讨该病的临床及病理特征。