氯化镉在Balb/c 3T3细胞转化过程中对细胞凋亡的影响

目的探讨氯化镉(CdCl2)在Balb/c 3T3细胞转化过程中对细胞凋亡的影响及其分子机制。方法N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)启动后,CdCl2持续处理Balb/c 3T3细胞14 d,建立两阶段细胞转化模型。苔盼蓝排染法检测CdCl2的细胞毒性,AnnexinV-FITC/PI双染色结合流式细胞仪检测细胞凋亡率,小鼠毒理基因芯片检测CdCl2促癌作用过程中的基因表达变化。结果1 mg/L MNNG启动后,324μg/L CdCl2持续处理能诱导细胞转化灶的出现。CdCl2处理2 d后细胞存活率降低,凋亡率显著升高。同时基因表达谱分析筛选出的差异表达基因中,有11个基因的功能与细胞凋亡有关,10个基因的功能与细胞抗氧化机制有关。结论CdCl2在促癌过程能诱导Balb/c 3T3细胞凋亡,同时影响凋亡和抗氧化相关基因的表达。     

昆明山海棠总生物碱体外抗肿瘤作用的研究

目的:探讨昆明山海棠(THH)总生物碱对10种不同肿瘤细胞系的抑制作用,并筛选出最敏感的肿瘤细胞系。方法:采用XTT法和SRB法对THH总生物碱体外抗肿瘤作用进行初步筛选。结果:THH总生物碱对10种不同肿瘤细胞系生长均有明显的抑制作用,而且对不同肿瘤细胞系抑制作用存显著差异和选择性。尤其是对人T细胞白血病细胞系MOLT-4、人T淋巴母细胞白血病细胞系Jurkat、小鼠黑色素瘤细胞系B16-F10、人结肠腺癌细胞系SW-480抑制率均>80%,其对应的IC50分别为13.59,24.10,30.05,31.39mg·L-1。结论:THH总生物碱体外具有广泛,高效的抗肿瘤活性,可进一步探讨其作为抗肿瘤药物研究开发的价值。     

基因芯片分析显示昆明山海棠有机萃取液经NF- κB及线粒体信号传导途径诱导HL- 60细胞凋亡

目的 研究中草药昆明山海棠Tripterygium hypoglaucum (THH）有机萃取液诱导人早幼粒白血病HL—60细胞凋亡过程的信号传导通道及分子机制。方法 应用流式细胞仪研究了THH有机萃取液诱导HL—60细胞的凋亡过程，并应用包含3000人类基因与EST的基因芯片进行基因表达差异分析。结果 基因芯片杂交结果显示有16个基因表达发生大于2倍的显著变化，这些基因同细胞生长，细胞周期调控，细胞分化，以及压力反应有关。部分基因在细胞凋亡过程中起关键作用，如Caspase 3和Caspase 8。结论 THH有机萃取液诱导HL—60细胞凋亡，该过程与NF—κB和线粒体信号传导途径有关。     

基因芯片分析显示昆明山海棠有机萃取液经NF- κB及线粒体信号传导途径诱导HL- 60细胞凋亡

目的　研究中草药昆明山海棠 Tripterygium hypoglaucum( THH)有机萃取液诱导人早幼粒白血病 HL-6 0细胞凋亡过程的信号传导通道及分子机制。方法　应用流式细胞仪研究了 THH有机萃取液诱导 HL - 6 0细胞的凋亡过程 ,并应用包含 3 0 0 0人类基因与 EST的基因芯片进行基因表达差异分析。结果　基因芯片杂交结果显示有 16个基因表达发生大于 2倍的显著变化 ,这些基因同细胞生长 ,细胞周期调控 ,细胞分化 ,以及压力反应有关。部分基因在细胞凋亡过程中起关键作用 ,如 Caspase3和 Caspase8。结论　 THH有机萃取液诱导 HL- 6 0细胞凋亡 ,该过程与 NF- κB和线粒体信号传导途径有关。     

HPLC法测定昆明山海棠中雷公藤甲素含量

目的：建立高效液相色谱法测定昆明山海棠药材中雷公藤甲素含量的方法。方法：采用反相C18柱,以甲醇-水（49？51）为流动相,218nm为检测波长,测定雷公藤甲素的含量。结果：雷公藤甲素在0.044～1.1μg/mL范围内线性良好,r=0.9996,平均回收率为93.2%,RSD为1.97%。结论：本方法灵敏、准确、重现性好。     

密闭舱室烟雾吸入性肺损伤救治方案效果评价

目的评价不同救治方案对密闭舱室烟雾吸入性肺损伤的救治效果。 方法将78只清洁级雄性SD大鼠完全随机分为13组,每组6只,分别为正常对照组(A组)、损伤对照组(B组)及救治组(C～M组),其中B～M分别进行烟雾吸入染毒10 min,C～E组分别行30%、60%、100%浓度常压氧吸入;F和G组分别给予10 U/mL和50 U/mL肝素钠雾化吸入;H和I组为5 mg/kg地塞米松(Dex)预处理及染毒后治疗;J和K组为1 000 mg/kg维生素C预处理及染毒后治疗;L和M组为200 mg/kg N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理及染毒后治疗。观察烟雾吸入后24 h,各组大鼠的动脉血气分析[酸碱度(pH)、动脉血氧分压(PaO₂)和动脉血二氧化碳分压(PaCO₂)]、静脉血碳氧血红蛋白(COHb)及其清除率(CCR)、肺组织病理改变及评分、肺湿干重比值(W/D)、肺泡灌洗液(BALF)和血清总蛋白浓度、肺通透性指数(PPI)、肺组织谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量及血清一氧化氮(NO)含量等指标的改变,综合评价各种措施的救治效果。 结果烟雾吸入后24 h,与B组比较,D、E、G、H组PaO₂显著升高[(117.0±1.0) mmHg,(119.2±3.1) mmHg,(115.0±5.7) mmHg,(101.8±3.3) mmHg vs (89.1±1.5) mmHg,P<0.05],J组大鼠PaO₂显著降低[(69.4±2.8) mmHg vs (89.1±1.5) mmHg,P<0.05];与B组比较,C、D和E组CCR显著升高[(23.1±4.2)%/h,(24.0±4.9)%/h,(26.3±4.5)%/h vs (19.3±2.2)%/h,P<0.05];与B组比较,G、H、L和M组大鼠的肺损伤总评分均显著低于B组[(2.9±1.0),(5.0±0.4),(4.4±1.5),(5.9±1.4) vs (9.4±1.2),P<0.05];与B组比较,C、G、H和I组大鼠肺W/D均显著降低[(4.63±0.10),(4.62±0.06),(4.65±0.05),(4.57±0.12) vs (4.88±0.21),P<0.05];与B组比较,H组肺PPI指数显著下降[(2.42±0.38) vs (7.02±1.05),P<0.01];与B组比较,J、L和M组大鼠肺组织GSH-Px和SOD活性均显著升高(P<0.05)、肺组织MDA和NO含量均显著降低(P<0.05)。 结论分别使用100%常压氧吸入、高剂量肝素钠雾化吸入、地塞米松预处理及NAC预处理,均能对密闭舱室火灾烟雾吸入性肺损伤有较明显的治疗效果。     

昆明山海棠总生物碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡与细胞周期改变

目的 为探讨昆明山海棠总生物碱(alkaloidsfrom Tripterygium Hypoglaucum Hutch,THHa)抗肺癌机制,研究THHa诱导肺腺癌A549细胞凋亡与细胞周期改变的关系.方法 应用形态学观察、DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测分析肺腺癌A549细胞凋亡及细胞周期改变.结果 THHa能够诱导肺腺癌A549细胞凋亡并主要作用于细胞周期S期(S期细胞增多).结论 THHa可能通过诱导细胞凋亡而抑制A549细胞增殖,这种作用与细胞周期有关,这些有助于将来肺癌治疗方案的合理设计.     

BPDE诱导GC-1细胞凋亡及褪黑素的保护作用

目的 探讨7,8-二羟-9,10-环氧苯并[a]芘(benzo[a]pyrene-7,8-diol-9,10-epoxide,BPDE)对小鼠精原细胞株GC-1的细胞毒性机制及褪黑素的保护作用.方法 不同浓度BPDE处理GC-1细胞,采用Annexin V/PI染色及流式细胞仪检测细胞凋亡,JC-1探针染色检测线粒体膜电位,Western blot检测细胞质Cyt C及细胞总蛋白中caspase-9/3的活化水平,DCFH-DA探针及流式细胞仪检测细胞内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.褪黑素预处理细胞后再进行BPDE染毒,采用上述方法检测褪黑素对BPDE细胞毒性的影响.结果 BPDE可提高GC-1细胞凋亡率,存在剂量-效应关系.同时,BPDE可降低细胞线粒体膜电位,促进线粒体Cyt C的释放,提高细胞中caspase-9和caspase-3蛋白的活化水平,并诱导细胞中ROS水平升高.褪黑素预处理则可降低BPDE诱导的细胞凋亡,抑制Cyt C的释放及caspase-9/3的活化,并激活Nrf-2/ARE抗氧化通路,降低细胞ROS水平.结论 BPDE可诱导小鼠精原细胞GC-1线粒体途径细胞凋亡和氧化应激,而褪黑素在这一过程中起保护作用.     

十三种化合物诱导的小鼠原代培养肝细胞基因表达谱的聚类分析

背景与目的： 利用基因芯片技术研究13种化合物所诱导的小鼠原代培养肝细胞基因表达谱,通过对基因表达谱的聚类分析,对化合物在基因组反应水平上进行分类的尝试,使化合物的分类与其诱导的基因表达谱联系起来。 材料与方法： 用30％的致死剂量染毒原代培养的小鼠肝细胞,24 h后提取RNA,用芯片进行检测。 结果： 聚类分析结果表明,13种化合物分成了三类。 结论： 用基因表达谱来对化合物进行分类,使其分类结果与毒性作用相联系,进而探讨其作用机制、预测未知毒性化合物的毒性是可行的,是很有价值与希望的研究方向。     

教学设计理论在《毒理学基础》教学实践中的应用

教学设计是通过分析教学问题和确定教学目标,建立解决教学问题的方案、运行解决方案和评价试行结果的过程。近年来教学设计的理念已经运用到各个课程的教学实践中去。结合医学本科《毒理学基础》教学实践,以教学设计基本理论为指导,围绕课程标准、教学对象的具体情况、教学内容的规范以及不同层次的教学目标等方面,总结该门课程教学设计的经验。