2016年4月—2022年3月深圳市和济南市流感病原学监测及流行特征

目的 分析在新型冠状病毒肺炎流行背景下,2016年4月—2022年3月国内深圳市和济南市流感流行特点,了解我国南北方地区流感流行差异。 方法 使用深圳市和济南市国家级哨点医院2016—2022监测年度流感样病例(ILI)和流感病原学监测资料,分析流感流行特征和趋势。 结果 2016—2022监测年度深圳市和济南市国家级哨点医院的门急诊病例中流感样病例百分比(ILI%)分别为2.25%、3.45%。两地区ILI%最高的年份均为2021—2022监测年度。ILl年龄构成均以0~4岁为主(分别占40%、46%)。按月分析两地区流感病毒分离阳性率与ILI%变化的相关性,两者趋势均存在正相关(r=0.238,P<0.05;r=0.425,P<0.001)。两地区不同监测年度流感优势毒株型别均不相同,呈交替变化,但每年流行的型别及高峰期的优势毒株型别基本一致。 结论 2020—2021监测年度即新型冠状病毒肺炎流行初期,深圳市和济南市流感活跃程度明显低于往年平均水平且流行毒株型别单一,其余监测年度基本符合我国南、北方地区流感流行特征。     

荧光定量RT-PCR在流感病毒检测上的应用

目的　探讨实时荧光定量RT PCR检测方法在流行性感冒检测诊断上的意义。方法　收集集体暴发疑似流感、SARS患者的咽拭子标本 16起 2 0 7份和双份血清标本 10 4份 ,应用荧光定量RT PCR检测方法、MDCK细胞培养法和血凝抑制试验进行病原学和血清学检测。结果　 2 0 7份集体暴发疑似流感、SARS患者的咽拭子标本中用荧光定量RT PCR检测 ,阳性 79份。阳性率 38 16 % (79 2 0 7)。MDCK细胞培养 ,16起中有 13起共 14 5份咽拭子有 6 2份标本阳性。阳性率 2 9 95 % (6 2 2 0 7)。两者的阳性率差异有显著意义 (χ2 =8.6 4 ,P <0 0 0 5 )。有 9起 10 4份成功的采集了双份血清 ,经HI试验有 6 4份双份血清与H3N2亚型抗原产生血抑 4倍增长 ,阳性率 6 1 5 4 % (6 4 10 4 )。结论　荧光定量RT PCR方法检测流感病毒能够在 3～ 4h内得出结果、且操作方便、特异性强、灵敏度高。因此我们认为实时荧光定量RT PCR方法 ,可作为一种快速的流感病毒检测诊断方法。     

我国诺如病毒SZ9711株P粒子制备及唾液HBGAs受体亲和性分析

目的 了解SZ9711株P粒子与唾液组织血型抗原受体（HBGAs）的结合模式.方法 从诺如病毒SZ9711株基因组中克隆P区基因片段并构建pGEX-4T-1原核表达质粒,在原核细胞中表达目的 重组蛋白并纯化,经溶血酶酶切后释放目的 蛋白.用EIA方法测定SZ9711株和VA387株P粒子与唾液HBGAs的结合情况.结果 SDS-PAGE电泳分析确定重组融合蛋白的表达,经纯化和凝血酶切后获得约38×10^3的目的 蛋白P蛋白.根据EIA分析表明,SZ9711株P粒子与先前报道的VA387株P粒子与唾液HBGAs模式相同,与A、B和O^secretor有亲和力,但与O^non-secretor亲和力非常低.同时,SZ9711与A抗原的亲和力较VA387与A抗原的亲和力低.结论 本研究利用我国分离到的SZ9711株制备的P粒子进行唾液HBGAs受体结合分析,表明与同源性较高的先前报道的VA387 P粒子结合模式相似,为今后研究诺如病毒与宿主受体之间的关系奠定实验基础.     

1994-2006年深圳市分离的B型流感病毒分子进化研究

目的 通过对深圳市分离的B型流感病毒HA1分子系统进化分析,初步了解深圳市B型流感病毒的流行变异规律.方法 选取深圳市1994-2006共13年间分离的50株B型流感毒株,通过RT-PCR将其HA1基因片段扩增后进行序列解析,然后,通过MEGA等软件对序列进行分子进化分析.结果 1994-2006年间深圳市流行的B型流感病毒分为Yamagata和Victoria两个亚系,两系的毒株分别是不同年份的主要流行株.两个亚系的HA1分子具有1个糖基化位点的差异,在4个抗原决定簇区域也分布有多个氨基酸位点的变异.结论 1994-2006年间深圳市B型流感病毒的两个亚系分别在不同年份主导流行,但变异均比较缓慢.

Abstract：

Objective To study the prevalence and variation of influenza B viruses of Shenzhen. Methods Fifty strains influenza B viruses in Shenzhen from 1994 to 2006 were selected. HA1 gene were amplified by RT-PCR and sequenced. Phylogenetic analysis of HA1 was conducted by MEGA program. Results The influenza B viruses of Shenzhen were divided into Yamagata and Victoria lineage. The two lineages prevailed respectively in different years from 1994 to 2006. The variance of glycosylation site and some mutations of antigenic determinants were detected in the two lineages. Conclusion The viruses of Yamagata and Victoria lineage prevailed respectively in different years in Shenzhen but the mutation rates of the two lineages were slowly.     

2010年深圳市流感流行病学分析

目的对2010年深圳市流感监测结果进行分析,了解流感的流行趋势,为流感防治提供科学依据。方法收集全市31家监测单位的流感样病例数据、病原学检测结果和暴发疫情资料进行分析。结果 2010年深圳市的流感样病例百分比（ILI%）为5.43%。2010年全市共采集日常监测ILI咽拭标本4031份,分离出445株流感病毒,阳性率为11.0%,其中14株季节性H1N1亚型（3.1%）,42株季节性H3N2亚型（9.4%）,171株甲型H1N1亚型（38.4%）,213株B（Victoria,47.9%）亚型,5株B（Yamagata,1.1%）亚型。2010年全市报告了89起ILI暴发疫情,发病总人数741人,流感PCR检测阳性79起,其中季节性甲型6起（6.8%）,乙型67起（75.3%）,甲型H1N1流感6起（6.8%）。结论 2010年深圳市流感活动较低,未出现明显的高峰。     

1995-2007年深圳市H1N1流感病毒血凝素基因的序列分析

目的 研究1995-2007年深圳市流行的H1N1流感病毒血凝素(HA)的基因特性.方法 选取在该期间分离培养到的64株H1N1流感病毒,对其进行HA片段核苷酸序列测定并推导出其氨基酸序列,用Simmonic软件和Mega软件对其进行分析.结果 深圳市H1N1流感毒株在进化树上可以划分为A、B、C三个分枝.部分2005-2006年毒株与2001年毒株在同一分枝上.通过同源性分析发现部分WHO所推荐的疫苗株在时间上滞后于深圳株.深圳H1N1株的4个抗原决定簇及受体结合位点均发生了氨基酸的替换.除1995年外其余年份的毒株均在137位上发生了氨基酸的缺失.结论 1995-2007年深圳市H1N1毒株氨基酸的变异主要集中在抗原决定簇及受体结合部位.并且抗原决定簇的变异活跃区域随时间的推移发生了转移.     

木瓜凝乳蛋白酶多克隆抗体制备方法的研究

目的　探讨了木瓜凝乳蛋白酶高效价抗体的制备方法。方法　将纯化的木瓜凝乳蛋白酶 (电泳纯 )以三种不同抗原形式———未处理原酶、H2 O2 抑活的木瓜凝乳蛋白酶、碘乙酸抑活的木瓜凝乳蛋白酶分别免疫雄性白兔 ,免疫方法采用多次皮下注射和静脉冲击免疫相结合方式进行。从第三次免疫开始 ,每次免疫后均由耳静脉采血 ,用Westernblotting法和ELISA法检测抗血清 ,用SAS软件包对数据进行分析比较。结果　两种抑活抗原诱导产生的抗血清效价显著高于未抑活抗原 (P <0 0 5 ) ,而两种抑活抗原之间无显著性差异 ;静脉冲击免疫可显著提高机体免疫应答能力 ,急剧提升抗血清效价。结论　抑活抗原比未处理原酶具有更好的免疫原性。与碘乙酸相比 ,选用H2 O2 抑活抗原来制备抗体不失为一种经济有效的方法。抑活抗原采用皮下注射及静脉冲击免疫相结合的方式 ,可十分有效的产生及提高抗血清效价 ,缩短抗体制备周期     

深圳市活禽市场活禽经营人员H7N9禽流感病毒抗体水平及感染危险因素调查

目的调查深圳市活禽市场活禽经营人员H7N9禽流感病毒抗体水平,探讨感染危险因素。方法在对活禽市场活禽经营人员问卷调查的基础上,采集血样,用血凝抑制试验检测H7N9禽流感病毒抗体,采用单因素分析和多因素logistic回归对H7N9病毒感染的危险因素进行分析。结果250名活禽市场活禽经营中,男性141人,女性109人,年龄中位数为41岁, 38人（15.2%）H7N9病毒抗体阳性（滴度≥1：160）,男、女各19人。问卷调查发现,236人（94.4%）主要接触鸡,169人（67.6%）接触过鸭,120人（48.0%）接触过鹅,105人（34.1%）接触过鸽子,单因素分析显示接触鸭子、鹅和鸽子为H7N9病毒感染的高危因素,进一步多因素logistic回归分析结果显示,接触鸭子为H7N9病毒感染的高危因素（OR=3.85,95%CI：1.44-10.35,P=0.007）,活禽暴露时间,暴露方式和流感疫苗接种等因素对H7N9病毒感染的影响没有显著性(P>0.05)。结论活禽市场活禽经营人员中存在这一定数量的隐性感染者,接触鸭子为H7N9病毒感染的危险因素 。     

深圳市2009-2011年乙型流感病毒流行特征分析

目的了解2009-2011年深圳市乙型流感的流行状况,为制定预防控制措施提供依据。方法在流感哨点监测医院随机采集流感样病例的咽拭子或咽漱液标本,用犬肾传代细胞进行病毒分离,分离阳性的病毒用血凝抑制实验进行流感病毒株型别鉴定。结果 2009-2011年共采集并检测流感样病例咽拭子5 353份,其中分离并鉴定出乙型流感病毒阳性139例,总阳性率为2.60%;以2009年第11周阳性率最高,达33.33%;病毒阳性者平均年龄为(13±15)岁,其中大于60岁组的阳性率最高,达4.21%。结论 2009-2011年深圳市乙型流感病毒的监测中,Victoria亚型为主要流行株。深圳乙型流感病毒主要累及青少年和老年人群。应继续加强监测工作,并在流行季节及时采取预防控制措施以保护公众的身体健康。     

转基因食品安全性检验的核酸检测技术研究

以国际市场上转基因食品的主流产品转基因大豆及玉米和我国生产的转基因辣椒为材料 ,以PCR方法为基础 ,研究适用于转基因食品安全性检验的核酸检测技术。针对抗除草剂 (孟山都公司 )GM 大豆 ,转Bt 176玉米 (Novartis Ciba Geigy公司 )及转抗菌肽辣椒 (华农 )产品的插入基因及调控序列设计不同引物进行PCR检测。建立了转基因大豆、玉米、辣椒的鉴别和相关标记基因、目的基因检测的技术 ,该方法简便快速 ,检测结果与标准及申报材料相符。