利用离散选择实验测量血友病患者治疗偏好的研究述评

目的:回顾利用离散选择实验测量血友病患者治疗偏好文献,并评估文献的研究质量,为健康管理和临床实践提供参考。方法:在中国知网、万方、PubMed、Web of Science Core Collection和Embase数据库系统检索离散选择实验文献。纳入属性按受益性、风险性、便利性和费用4个维度进行分类,并评估各属性的相对重要性。使用PREFS工具进行文献质量评估。结果:最终纳入12篇文献。便利性、受益性、风险性和费用维度包含属性的数量占比分别为41.7%、29.8%、22.6%和6.0%;在因子和非因子替代治疗中,血友病患者最为偏好的属性,受益性维度和风险性维度占比均最高(33.3%),其次是便利性维度(26.7%),费用维度最低(6.7%)。PREFS工具评估结果显示,纳入文献的研究质量尚可。结论:尽管便利性维度的属性纳入频率最高,但血友病患者更偏好受益性和风险性维度的属性。医疗产品全周期过程与临床实践中应充分考虑患者偏好,从而提高治疗效果。     

凝血因子Ⅴ抑制物致多项凝血因子活性假性降低

目的分析获得性凝血因子Ⅴ缺乏症患者多项凝血因子活性假性降低的原因。方法 4例患者凝血酶原时间(PT)及活化部分凝血活酶时间(APTT)均延长,对其进行纠正试验、狼疮抗凝物及凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ活性检测,并对活性降低的凝血因子稀释不同倍数后复检,对稀释后活性没有明显变化的凝血因子进行相应的抑制物筛查。结果 4例患者均出现多项凝血因子降低,纠正试验提示不纠正,狼疮抗凝物检测提示超出检测限,经不同稀释倍数稀释后,除凝血因子Ⅴ外,其他凝血因子活性水平大幅升高,凝血因子Ⅴ抑制物检测阳性。结论获得性凝血因子V缺乏症患者常伴有多种凝血因子活性假性降低,凝血因子Ⅴ抑制物的存在会干扰狼疮抗凝物的检测。     

血管内皮生长因子C在人乳腺癌细胞株MCF-7及MCF-7/Adr中的表达

目的：检测血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)mRNA和蛋白在人乳腺癌细胞株MCF－7及其耐药株MCF－7／Adr中的定位，定性表达。方法：根据VEGF－C基因序列，设计合成地高辛标记的特异性寡核苷酸探针，运用原位杂交方法检测培养的细胞株MCF－7和MCF－7／Adr中VEGF－C mRNA的表达；并运用免疫组织化学方法检测了两种细胞中VEGF－C蛋白的表达。结果：原位杂交检测到MCF－7和MCF－7／Adr细胞的胞浆中有阳性蓝色颗粒，免疫组化检测发现两种细胞的胞浆中均有阳性棕黄色颗粒，而阴性对照细胞的胞浆中则均无阳性颗粒。结论：人乳腺癌细胞株MCF－7及其耐药株MCF－7／Adr细胞能够转录VEGF－C mRNA并在其细胞浆中翻译合成相应的蛋白。     

人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建

目的：VEGF—C基因的真核表达载体，以便进一步研究VEGF—C基因在淋巴管生成中的作用。方法：根据人VEGF—C的cDNA序列，设计合成一对5’端分别含有EcoRI和BamH I酶切位点的特异性引物，运用RT—RCR方法扩塔人乳腺癌细胞MDA—MB－231中的VEGF—C cDNA(1.26kb)；回收PCR产物(1．28kb)，并将其连接至克隆载体pUMT—18中，重组的pUMT—18在大肠杆菌DH5α内扩增后，经质粒提取、EcoR I和BamH I酶切，筛选出阳性重组子，并进行基因测序鉴定；琼脂糖凝胶电泳回收含有VEGF—C cDNA全长的酶切片断(1．27kb)，然后在DNA连接酶作用下将其与真核表达载体pcDNA3．1（－)连接，重组质粒经EcoR I和BamH I酶切予以鉴定。结果：RT—PCR产物自有VEGF-C cDNA，基因测序显示重组的pUMT—18中自有正确的人VEGF—C cDNA全长序列，重组的pcDNA3．1(-)中含有人VEGF—C cDNA全长序列。结论：VEGP—C/pcDNA3．1(－)。     

炎性环境下内皮微粒介导单核细胞促内皮细胞增殖的作用

目的 探讨炎性环境中内皮微粒(EMPs)在单核细胞参与的促内皮细胞增殖中的作用,并探讨EMPs对单核细胞表达内皮细胞标志物的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激内皮细胞,超速离心法获取EMPs;用透射电镜观察其形态和结构;运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测经EMPs激活的单核细胞株THP-1对血管内皮生长因子(VEGF)中VEGF-A、VEGF-C的表达情况;将HUVECs和THP-1细胞或者经EMPs诱导的THP-1细胞共培养,检测HUVECs的增殖情况;运用RT-PCR和免疫荧光细胞化学技术,观察经EMPs激活的THP-1细胞对内皮细胞标志物vWF和血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)的表达情况.结果 内皮细胞经炎性因子刺激后释放EMPs,EMPs刺激的THP-1细胞上清中VEGF-A和VEGF-C蛋白水平明显升高;HUVECs细胞增殖实验中,与THP-1细胞或者经EMPs诱导的THP-1共培养的两种情况下,HUVECs均显著增多;与EMPs共培养3d后,THP-1中vWF和VEGFR-2蛋白表达为阳性,基因表达为阴性,共培养8d后,vWF和VEGFR-2的蛋白和基因表达均为阴性.结论 炎性环境中内皮细胞释放EMPs可以促使单核细胞分泌VEGF-A和VEGF-C,后两者可使HUVECs增殖,EMPs仅能使单核细胞一过性呈现内皮表型,而不能将其转分化为内皮细胞.     

CCR7在结节性甲状腺肿与甲状腺癌中的表达及其与EMT关系的研究

目的 研究并探讨趋化因子受体-7(chemokine receptor 7,CCR7)在结节性甲状腺肿与甲状腺乳头状癌中与上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的关系.方法 采用免疫组化检测CCR7、N-cadherin与基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)在50例结节性甲状腺肿与50例甲状腺乳头状癌中的表达,分析其与患者病理资料的关系.结果 CCR7、N-cadherin在结节性甲状腺肿的结节期滤泡上皮均呈高表达(分别为83.7％、90.7％),且为正相关(P＜0.01),而在胶质贮存期滤泡上皮(分别为2.0％,8.2％)与结节期纤维组织(分别为6.7％,31.1％)低表达.CCR7、N-cadherin与MMP9在甲状腺乳头状癌的淋巴结转移组的阳性表达率为87.1％,90.3％,96.8％,而无淋巴结转移组的阳性表达率为42.1％,57.9％,63.2％,差异有统计学意义(P ＜0.01);CCR7与N-cadherin、MMP9在甲状腺乳头状癌的表达呈正相关(P＜0.01).结论 CCR7在结节性甲状腺肿与甲状腺乳头状癌中均与EMT的指标具有相关性,CCR7可能参与调节滤泡上皮EMT发生.     

山东省血友病综合关怀工作模式探讨

血友病是一种遗传性出血性疾病,由于体内缺乏凝血因子八或九,导致血液凝固异常,给患者家庭和社会都造成沉重的负担。血友病综合关怀是对血友病患者及家庭进行全面的治疗、护理及生活指导,从而全面实现血友病管理的规范化、专业化、科学化,减轻血友病的危害。通过对山东省血友病综合关怀工作模式的总结,探讨一种新的、适合国情的综合关怀工作模式,以提高血友病患者的生存质量,减轻家庭和社会负担。     

简便有效分离培养大鼠主动脉内皮细胞的一种新方法

目的：探索分离、培养鼠主动脉内皮细胞的有效方法。方法：将鼠主动脉内膜翻向外，结扎两端，置于50mL培养瓶中培养、传代，Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色。结果：培养6-8d时有少量细胞自主动脉迁移出并贴壁生长；12～14d时贴壁细胞覆盖大部分培养瓶面，约80％的细胞汇合成单层；传代细胞生长旺盛；细胞汇合后呈现典型的“鹅卵石”样内皮细胞特征，内皮细胞标志物Ⅷ因子相关抗原表达阳性；未见杂细胞。结论：此方法无损伤、不需要酶消化，能比较容易的获得高纯度大鼠原代主动脉内皮细胞，适用于细小血管内皮细胞的分离与培养。     

口腔负压对淋巴循环影响的实验研究

目的探讨口腔负压对淋巴动力学的影响,探寻影响淋巴循环的新方法。 方法在兔的口腔建立负压,分别在四肢及耳的固定部位注射定量染料,测量染料到达固定观察部位的时间,并与未建立口腔负压的对照组对比,观察口腔负压对淋巴动力学的影响。 结果实验组在建立口腔负压后,注射染料到达固定测量部位的时间明显缩短。 结论在口腔建立负压,能够影响淋巴动力学,促进淋巴的回流。     

核仁素在甲状腺乳头状癌中表达的临床意义

目的 探讨核仁素（NCL）在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学SP染色法检测60例正常甲状腺组织与甲状腺乳头状癌中NCL、趋化因子受体-7（CCR7）与基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达,分析NCL、CCR7与MMP-9的表达与性别、年龄、肿瘤大小与
有无转移的关系以及核仁素与CCR7、MMP-9表达的相关性。结果 NCL在正常甲状腺及甲状腺乳头状癌中的总阳性率分别为0、 100%。NCL在伴随转移组癌组织中表达于细胞核、细胞质与细胞膜;NCL在无转移组癌组织中仅表达于细胞核,差异有统计学意义（P<0.05）。不同年龄、性别、
肿瘤大小的NCL表达率间的差异无统计学意义(P>0.05)。核仁素细胞核外阳性表达与CCR7与MMP-9的阳性表达呈正相关（P<0.01）。结论 NCL在甲状腺乳头状癌中表达,表达部位在转移与非转移组明显不同,且与CCR7、MMP-9表达有密切关系。核仁素可作为区别癌转移与非转移的标志。