重组人尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶2B7三个功能性突变体的构建、表达及活性比较

目的构建人尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶(UGT)2B7重组酶的3个功能性突变体UGT2B7*71S(A71S,211G>T),UGT2B7*2(H268Y,802C>T)和UGT2B7*5(D398N,1192G>A),以进一步研究该酶野生型和其突变体在对底物作用过程中的功能差异。方法应用细菌/杆状病毒系统,将构建的pFastBac-UGT2B7*71S,pFastBac-UGT2B7*2和pFastBac-UGT2B7*5重组质粒转化E.coli DH10Bac大肠杆菌,通过转座作用获得各自的重组粘粒(bac-mid),然后将其转染草地夜蛾(Sf)9细胞后,产生重组杆状病毒。这些病毒再感染Sf9细胞,即可获得野生型UGT2B7*1及其突变体的重组酶。野生型及突变体酶的活性以7-羟基-4-三氟甲基香豆素(7-HFC)为底物,用荧光法测定并分析比较。结果利用杆状病毒/昆虫细胞系统,成功地构建人UGT2B7重组酶的3个功能性突变体。UGT2B7*1对7-HFC的Km值为(0.331±0.018)mmol·L-1,Vmax值为(2.14±0.04)μmol·min-1·g-1蛋白;UGT2B7*71S对7-HFC的Km值为(0.260±0.026)mmol·L-1,Vmax值为(1.36±0.05)μmol·min-1·g-1蛋白;UGT2B7*2对7-HFC的Km值为(0.53±0.06)mmol·L-1,Vmax值为(9.5±0.5)μmol·min-1·g-1蛋白;UGT2B7*5对7-HFC的Km值为(0.59±0.05)mmol·L-1,Vmax值为(7.52±0.28)μmol·min-1·g-1蛋白。结论应用细菌/杆状病毒系统,成功构建了UGT2B7的3个功能性突变体,这些突变体可进一步用于对其他底物的代谢活性比较。     

糖尿病大鼠脉络膜病变超微结构的研究

随着吲哚青绿血管造影(ICGA)和荧光素眼底血管造影(FFA)的开展，人们发现糖尿病视网膜病变(DR)发生的同时脉络膜也有相应的改变，认为糖尿病的视网膜脉络膜病变可能同时存在，Saracco等提出了糖尿病脉络膜病变(DC)的概念。我们通过建立糖尿病的动物模型，在不同病程通过透射电子显微镜从组织病理学角度进一步观察糖尿病大鼠发生脉络膜病变的超微结构改变，分析它与视网膜病变之间的关系。     

早产儿视网膜病变

早产儿视网膜病变（ROP）是特指发生于早产儿特别是过早产儿的以视网膜血管异常增生为病变特征的视网膜血管疾病，是发达国家儿童失明的主要病因。随着围产医学的不断发展，ROP的发病率也随之上升，而早期发现和及时合理的治疗无疑是现阶段拯救ROP患儿视功能的最重要措施。我们对近年来国内外有关ROP的研究进行综述，内容涵盖了ROP的发病、诊断、筛查、治疗以及随访等诸方面。(中华眼底病杂志，2005，21：337-340)     

血清β-HCG浓度变化与异位妊娠保守治疗的临床研究

近年来,异位妊娠的发病率呈明显上升的趋势[1-2].β-HCG在异位妊娠的诊断及观察疗效方面也被广泛应用,甲氨喋呤(MTX)米非司酮及配伍中药在异位妊娠保守治疗的效果经大量的临床观察,其有效性及安全性也得到社会的公认,本文对95例保守性治疗输卵管妊娠患者的β-HCG的变化,以探讨最低剂量的用药,以达到保守治疗成功的方案收稿日期:2008-01-11作者简介:郑文玲(1967-),女,广东龙川人,副主任医师.     

2013-2014年1237株鲍曼不动杆菌的临床耐药监测与分析

摘要:目的 了解2013年和2014年我院分离的鲍曼不动杆菌临床分布特征及对常用抗菌药物药敏试验结果,更好地指导临床用药。方法 采用全自动微生物分析仪进行药敏试验,用WHONET软件统计和分析临床送检出的鲍曼不动杆菌资料。结果 共分离出1237株鲍曼不动杆菌,检出率最高的是痰标本,病菌主要来自呼吸科重症监护室和呼吸科,其次是ICU病区。药敏结果显示鲍曼不动杆菌对多粘菌素B和美满霉素的耐药率较低,此外对其他抗生素的耐药率均很高。该菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率83%～87%,对头孢菌素类、氨基糖苷类和氟喹诺酮类耐药率为68.5%～92.7%,对头孢噻肟和头孢曲松耐药率100%。结论 医院鲍曼不动杆菌感染患者主要集中在重症监护室和呼吸科,该菌对临床常用抗菌药物已普遍耐药,应加强鲍曼不动杆菌耐药监测和抗菌药物管理。     

基于Kinect的人体三维质心动态测量及准确性分析

人体三维质心（COM）对于评价人体平衡能力有很重要的意义,然而昂贵的测量仪器不适于广泛应用于普通诊所或社区医院。微软公司的Kinect设备与编程结合可作为便捷廉价的测量工具,为了分析此系统是否能用于动态测量人体三维COM及数据的准确性,本研究通过将人体合理划分成15 部分,使用Kinect和动作捕捉系统同时采集4 种测试动作下人体各部分端点坐标,并基于人体模型分别合成整体COM并对数据比较。测试动作包括裸足静止站立、踩泡沫板静止站立、裸足站立倾斜、踩泡沫板站立倾斜。比较10 名被试者的COM轨迹数据,结果显示Kinect与动作捕捉系统相比均方根误差均值小于7.3 mm,误差均值最小-2.7 mm最大0.8 mm,动作幅值越大时,相对误差量越小,表明通过编程可将Kinect用于测量人体三维COM,应用于平衡能力评价。     

无症状扁平足与正常足生物力学差异的数字化研究

运用足底压力测试与影像学X线测量结合的足踝数字化无损测评系统,对比分析无症状扁平足者与正常足者在足底压力和足弓形态上的生物力学差异。受试为青年学生,其中正常足者12人（男女各6人,左右足共24只,其中左足12只,右足12只）,无症状扁平足者12人（男女各6人,左右足共24只,其中左足12只,右足12只）。利用Zebris足底压力测量仪对正常足组和无症状扁平足组进行直立状态和行走状态下的足底压力测试,并拍摄其负重位和非负重位的侧位X线片进行足弓形态测量,测量数据进行统计学分析,从而对比得出无症状扁平足与正常足足弓和足底压力方面的生物力学差异。结果表明：双足直立时,无症状扁平足组与正常足组的足底压力差异无显著意义（P>0．05）;单足直立时,无症状扁平足组的足前负重比例增大;步行时,无症状扁平足组与正常足组足底压力的峰值相比差异显著（P<0．05）。无症状扁平足组负重位与非负重位的足弓形态各参数有显著差异（P<0．05）,而且无症状扁平足组负重位与正常足组负重位的足弓形态有显著差异（P<0．05）。非负重状态和双足直立状态下,无症状扁平足表现出一定的隐匿性。单足直立和行走状态下,无症状扁平足的足底压力和足弓形态与正常足相比有明显差异。应用FA DNTS测量评价足踝生物力学性能,方法简单,实用,易于推广。     

减低剂量地西他滨治疗输血依赖的骨髓增生异常综合征难治性血细胞减少伴单系病态造血8例疗效分析

目目的 探讨减低剂量地西他滨治疗输血依赖的骨髓增生异常综合征(MDS)-难治性血细胞减少伴单系病态造血(MDS-RCUD)的临床疗效和安全性。方法 评价江苏省血液病研究所2009年11月至2012年5月使用减低剂量地西他滨［20 mg/(m2·d),连续3 d］治疗的8例MDS-RCUD患者的疗效和不良反应。结果 1例(12.5%)获完全缓解,2例脱离成分血输注,3例达血液学改善,总反应率达75.0%。在4例可行细胞遗传学评估的患者中,1例获部分细胞遗传学缓解。Ⅳ级血液学毒性发生率50.0%,Ⅲ～Ⅳ级感染发生率37.5%,无Ⅲ～Ⅳ级出血、严重恶心呕吐(Ⅲ～Ⅳ级)和肝功能损伤(Ⅲ～Ⅳ级)。中位随访时间386.6 d(108~655 d),随访期间无患者死亡。结论 减低剂量地西他滨可以改善MDS-RCUD患者的输血依赖,严重血液学毒性和早期病死率的发生率低。     

骨内微管中流动电位的实验研究

力学载荷是骨量和结构的重要调节因素,骨重建与骨的形成和代谢密切相关。研究认为骨的力电性质是骨重建与力学载荷之间的纽带,而骨的力电性质中一个重要的研究方向就是流动电位。此研究的目的在于通过实验确定缓冲液流经哈佛氏管与骨小管时所产生的流动电位的差别。选取8个样本,使用自行设计的测试系统,测量5种不同加载速率下骨试样的流动电位。将骨试样的侧表面由硅橡胶密封,模拟缓冲液主要通过哈佛氏管流动的情形;而未密封的情况,则模拟缓冲液同时流经哈佛氏管以及试样表面上被剖开的骨单元中骨小管的情形。结果显示,对应于加载速率26、36、60、180、360 kPa/s,侧表面密封时,流动电位稳定值分别为（0.29±0.09）、（0.24±0.06）、（0.21±0.05）、（0.19±0.05）、（0.16±0.04）mV;侧表面未密封时,流动电位稳定值分别为（0.69±0.08）、（0.61±0.09）、（0.57±0.07）、（0.51±0.05）、（0.46±0.05）mV。未密封时流动电位明显高于密封时的流动电位（P值均小于0.05）,而且两者的电位差反映了缓冲液流经骨小管时所产生的流动电位要明显高于流经哈佛氏管的时候。基于骨的微观结构,并考虑到骨细胞主要分布在骨小管附近,实验结果为研究流动电位与骨的重建问题提供了依据。     

电阻抗与EIT 测量微系统设计

以微系统结构、高稳定性为设计目标,构建一套基于ATmega16单片机和AD5933的电阻抗与EIT测量微系统。AD5933芯片内部集成了DDS部分、滤波放大部分、12位A/D转换部分和片上的DSP离散傅里叶变换解调部分,避免了各个模块时序不一致造成的误差,提高了系统的稳定性和抗干扰性。基于Matlab平台开发图形用户界面(GUI),实现了数据无线通讯、阻抗图谱绘制、特征参数计算、EIT图像重建。对均匀场进行100次数据采集,系统信噪比达70 dB。对高精度电阻、离体猪肉分别进行阻抗测试,根据Cole-Cole理论,绘制了阻抗圆图,测量结果与最小二乘算法拟合效果相符。针对16电极实验槽中不同位置和不同数量的有机玻璃棒分布,采用高斯牛顿重建算法进行电阻抗图像重建,成像效果良好,验证了系统的有效性与可行性。