人胰岛素样生长因子在pET-DsbA载体中的克隆及表达

目的 通过重组技术,对胰岛素样生长因子IGF-Ⅰ基因进行缺失、突变以获得最有利于高水平表达的IGF-Ⅰ cDNA.构建原核表达载体,并进行表达,以获得能够高水平表达高活性产物的基因工程菌珠.方法 提取人肝脏组织总RNA,RT-PCR后琼脂糖电泳初步鉴定产物.将cDNA回收、补平后插入克隆质粒KS,酶切鉴定后,对IGF-Ⅰ基因进行序列分析.采用PCR法从克隆质粒中扩增IGF-Ⅰ片段,亚克隆至pET-DsbA原核表达载体,酶切鉴定,并进行序列测定.转化到大肠杆菌BL21(DE3)PLysS中,IPTG诱导表达,聚丙稀酰胺凝胶电泳、Western Blot分析目的蛋白.结果 成功构建原核表达载体pET-DsbA-IGF-Ⅰ,测序结果与预期序列完全一致,并在大肠杆菌BL21(DE3)plysS表达出IGF-Ⅰ融合蛋白.结论 IGF-Ⅰ融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3) PLysS中的表达,对进一步研究IGF-Ⅰ的功能及开发其生物制品具有重要意义.     

中医内外合治小儿咳嗽变异型哮喘临床研究简

目的:观察中药直流电离子导入联合益肺养阴胶囊内外合治小儿咳嗽变异型哮喘(CVA)的临床疗效。方法:将小儿CVA患者共93例随机分为3组,对照组31例首周予辅舒酮吸入及支气管扩张剂治疗,缓解期继续予辅舒酮治疗;治疗1组30例首周予对照组相同治疗并同时联合中药直流电离子导入,缓解期单以口服益肺养阴胶囊吸入治疗;治疗2组32例首周治疗同治疗1组,缓解期则在对照组基础上加服益肺养阴胶囊口服。总疗程为3月。结果:治疗后所有患者日间、夜间症状和咳嗽症状总评分均较治疗前有明显改善(P<0.01);且直流电离子导入治疗(治疗1、2组)的患者夜间咳嗽症状评分及咳嗽症状总积分比对照组下降更明显(P<0.05),日间咳嗽症状评分则无显著性差异(P>0.05)。治疗3月后,3组症状评分均较治疗前显著改善(P<0.01);且治疗2组的日间咳嗽平均分及咳嗽症状总评分低于对照组(P<0.05)及治疗1组(P<0.01),但夜间咳嗽评分则无显著差异(P>0.05);对照组在日间、咳嗽总评分上要优于治疗1组,但差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后3组血清IgE、IgA、IgG及呼出气一氧化氮(FeNO)均较治疗前显著改善(P<0.01)。治疗后对照组血清IgE、FeNO较治疗1组下降更显著(P<0.01),而治疗1组血清IgA、IgG则较对照组升高更显著(P<0.05)。治疗后治疗2组血Fe NO较对照组显著下降(P<0.05),血清IgA、IgG则较对照组升高(P<0.05);2组间IgE比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后治疗2组血清IgE、FeNO较治疗1组显著下降(P<0.01),2组间血清IgA、IgG比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:中药直流电离子导入能够迅速改善患儿的咳嗽症状;益肺养阴胶囊可能通过调节患儿的免疫功能,协同西药降低患儿的气道高反应性,从而达到提高疗效的目的。     

美国终末期肾脏病发生状况

本文介绍了近年来美国终末期肾脏病发病率和患病率，及与年龄，种族和性别的关系，引起ＥＳＲＤ病因。     

内括约肌切除术治疗22例低位直肠癌的近期效果

近年来,器械吻合的应用使得低位直肠癌保留括约肌手术变得容易,但是当肿瘤远端切线位于肛管直肠环近端不足1 cm时,器械也难以吻合,此种情况下可考虑行内括约肌切除术.     

遗传性肾炎致病基因的研究进展

遗传性肾炎 (AS)致病基因 COL4 An的研究近年来取得了一些新的进展。通过聚合酶链反应技术 (PCR)已获得COL4 A3、COL4 A4、COL4 A5基因的详细结构。应用单链核苷酸多态性分析 (SSCP)及基因测序寻找具有致病意义的基因突变 ,探讨其可能导致的病理改变 ,为 AS基因诊断、预防及治疗提供了新的理论依据 ,但“热点突变”仍待进一步探索     

蛋白质组学在肾病研究中的应用

蛋白质组学的快速发展为肾病的研究提供了科学的理论依据,在肾损伤、糖尿病肾病以及肾小球肾炎等肾脏疾病的诊断方面发挥了重要作用,一些差异表达蛋白及其作用机制相继被发现,如细胞信号蛋白、跨膜蛋白和钙调蛋白等.了解这些表达机制,对肾病的诊断和治疗有重要意义.     

内括约肌切除术治疗22例低位直肠癌的近期效果

近年来,器械吻合的应用使得低位直肠癌保留括约肌手术变得容易,但是当肿瘤远端切线位于肛管直肠环近端不足1 cm时,器械也难以吻合,此种情况下可考虑行内括约肌切除术.     

慢性肾功能不全患者外周血Th1/Th2淋巴细胞平衡的研究

目的 :通过检测慢性肾功能不全患者外周血中CD4 淋巴细胞分泌细胞因子的情况 ,探讨Th1/Th2细胞类型与慢性肾功能不全发展的关系。方法 :利用流式细胞分析法对 40例慢性肾功能不全患者和健康志愿者 15例外周血中淋巴细胞的胞内细胞因子 (IFN -γ ,IL -4 )和表面抗原 (CD4 )进行分析。结果 :慢性肾功能不全患者不同期Th1,Th2数及Th1/Th2值与正常对照组相比 ,差异均有显著意义 (P <0 0 5 )。分泌IFN -γ的CD4 淋巴细胞数少于分泌IL -4的CD4 细胞数 ,致Th1/Th2比值与正常对照组比较明显下降。但肾功能不同期间Th1,Th2数及Th1/Th2值差异无显著意义。患者Th1/Th2比值与血清BUN和Cr值之间有显著相关 (r分别为 0 5 998,0 4181,P<0 0 5 )。结论 :慢性肾功能不全患者存在Th1弱势。     

多指并指一家系

先证者　男 ,2 9岁 ,身高 16 5 cm,体重 6 4 kg。神志清楚 ,智力正常。头面部检查无异常 ,心肺检查无异常 ,肝脾正常。左手为拇指多指 ,小指中节多指 ,中、环、小指并指。右手拇指多关节 ,小指中节多指 ,中、环、小指并指 (图 1、2 )。双足趾未现异常。家系调查 :先证者的祖母、父亲和儿子与先证者相似 ,其他家庭成员未见异常。图 1　患者双手外观图 2　患者双手 X光片作者单位 :51 80 2 0广东省深圳市人民医院临床医学研究中心　　讨论　先天性肢体异常是人群中较为常见的遗传缺陷。家族性并指多指 (synpolydactyly,SPD)是常染色体显性遗…