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91.
92.
目的 研究Nurr1基因过表达在6-羟基多巴胺(6-OHDA)选择性诱导多巴胺(DA)能神经元特异性损伤中的作用。方法 ①不同浓度6-OHDA作用不同时间,比较细胞形态;②细胞经6-OHDA作用后,经流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布比例;③不同浓度6-OHDA作用不同时间,经AnnexinV/PI双染后,运用共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况,获得毒素诱导凋亡的最适剂量(75μmoL/L)和时间(12h),运用FCM检测两株细胞早期凋亡比例。结果 ①经6-OHDA处理后,倒置相差显微镜观察,结果显示SK-N-SH/Nurrl细胞形态损伤早于SK-N-SH细胞,且损伤程度明显;②细胞周期结果显示,6-OHDA诱导SK-N-SH细胞G2/M期细胞比例下降,而SK-N-SH/Nurr1细胞S期细胞比例下降;③经Annexin V/PI双染联合FCM检测早期凋亡比例结果显示,SK-N-SH/Nurr1细胞凋亡比铡明显高于SK-N-SH细胞(P〈0.05)。结论外源性Nurr1基因过表达促进了6-OHDA诱导的SK-N-SH/Nurr1细胞凋亡,Nurr1可能与SK-N-SH/Nurr1细胞对6-OHDA损伤敏感性增强有关。 相似文献
93.
为探讨同时接枝Nogo-A受体(NgR)的抗体和多聚赖氨酸(PLL)的透明质酸(HA)水凝胶用于中枢神经系统损伤修复的可行性,本研究在碳二亚胺盐酸盐的介导下用己二酸二酰肼交联的方法制备HA水凝胶,并接枝PLL和NgR抗体。取新生大鼠海马神经元接种于水凝胶支架材料上,分为HA-NgR抗体-PLL水凝胶组和纯HA水凝胶组。培养7d后,用吖啶橙(AO)染色、抗神经丝蛋白(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色和扫描电镜观察两组细胞的生长情况。结果显示:纯HA水凝胶不利于神经细胞在材料上粘附和突起生长;HA-NgR抗体-PLL水凝胶可以显著增加海马神经元的粘附数量、促进神经元突起形成,同时也能使星形胶质细胞在材料表面生长。上述结果提示:接枝NgR抗体和PLL的HA水凝胶与海马神经元相容性良好,为中枢神经系统损伤修复提供了一种较理想的支架材料。 相似文献
94.
目的观察全反式视黄酸(RA)对体外培养的人神经前体细胞的诱导作用,研究在这个过程中细胞周期调节蛋白p27Kip1、p21Cip1及相关分子cdk2、cyclinE的变化,探讨p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中的作用。方法取12wk的人胚胎前脑纹状体,原代培养人神经前体细胞。在细胞进入对数生长期时给予1μmol·L-1RA诱导。在诱导的d1、3、7,用相差显微镜观察细胞形态的变化;用免疫细胞化学染色、RT-PCR等方法检测p27Kip1、p21Cip1及其相关的cdk2、cyclinE的变化。结果在RA诱导d3,人神经前体细胞形态发生变化,至d7时已接近成熟神经元形态。免疫细胞化学染色结果显示p27Kip1的表达在RA诱导d3增加,在RA诱导d7时明显增加,与未经RA诱导的细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,p27Kip1 mRNA的表达在RA诱导d3增加,并在RA诱导d5达到高峰,而p21Cip1 mRNA的表达在RA诱导后略呈下降趋势。cdk2、cy-clinE的mRNA水平在RA诱导前后没有明显变化。结论p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中具有重要作用,并且其表达增加是通过转录水平调节的。 相似文献
95.
目的探讨骨髓干细胞来源的星形胶质细胞是否参与脑损伤后胶质界膜的形成。方法将制作好的雌性Sprague-Dawley大鼠脑损伤模型24h后经尾静脉植入GFP标记的雄性Sprague-Dawley大鼠的骨髓源干细胞。在植入后2、4和8周取脑,用GFAP荧光免疫组织化学方法显示星形胶质细胞,GFP显示骨髓来源细胞,观察损伤组织边缘的胶质界膜中是否存在GFP/GFAP双阳性细胞。结果在损伤组织边缘可见骨髓干细胞来源的星形胶质细胞。结论骨髓干细胞来源星形胶质细胞参与脑损伤后胶质界膜的形成。这对脑外伤的恢复和组织工程材料的植入有重要的意义。 相似文献
96.
97.
采用两种方法来研究猫骶尾髓到小脑的投射:6只猫在骶髓半断下方向脊髓灰质注入麦茅凝集素结合辣根过氧化酶(WGA-HRP),观察顺行标记纤维及末梢在小脑内的分布;3只猫在下腰髓半断后用Fink-Heimer氏法观察溃变纤维的分布。 WGA-HRP标记的苔藓末梢分布于双侧小脑前叶Ⅰ—Ⅴ小叶,其中多数集中在Ⅱ小叶的前部。其分布呈与正中面平行的纵行条带并主要位于叶片的浅表部。少数末梢还在后叶蚓部的Ⅷ小叶B部及旁正中小叶交合部呈单侧分布,还有一些末梢止于小脑中央核。标记纤维还见于一侧脊髓外侧索和小脑上、下脚。用Fink-Heimer法所看到的溃变纤维及末梢与用WGA-HRP法所显示的结果相一致。对结果的讨论提示在猫的下段脊髓内存在有参与组成脊髓小脑腹侧和背侧束的神经元,其机能可能与接受来自下肢远端和尾的皮肤外感受器的输入有关。 相似文献
98.
在60只大鼠颈膨大后根神经节(C_3~C_8)内注射霍乱毒素B亚单位结合辣根过氧化物酶(CB—HRP),顺行追踪初级传入纤维在脊髓内的投射。结果表明,除后角Ⅰ、Ⅱ层和lissauer氏束未见有明显标记外,CB—HRP对于分布在灰质Ⅲ—Ⅸ层的纤维标记良好。传入纤维在次质各层的投射存在有一定的躯体定位关系。 相似文献
99.
100.
体外转基因肌细胞植入帕金森病模型大鼠脑内的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
用6-羟多巴胺单侧损毁脑内多巴胺能系统建立的帕金森病大鼠模型进行基因治疗实验。所用方法为重组带酪氨酸羟化酶基因的载体-质粒pCMVTH,在体将此质通过脂质体Lipofectin介导转入原代培养的骨骼肌细胞内;经检测证实这些经遗传改造的骨骼肌细胞能表达酪氨酸羟化酶后,再将之植入模型大鼠脑的纹状体内。 相似文献