留学生组织胚胎学全英文教学的实践与体会

针对目前医学院校留学生全英语教学现状及存在的主要问题,结合本校教学实践,探讨了我院组织胚胎学教研室为提高留学生全英语教学质量所采取的措施,为进一步提高和改进留学生教学提供参考。     

DNA去甲基化对大鼠骨髓间充质干细胞增殖细胞核抗原的调节

背景：DNA去甲基化是一种重要的表观遗传修饰。 目的：观察DNA去甲基化对骨髓间充质干细胞增殖及增殖细胞核抗原蛋白表达的影响。 方法：全骨髓贴壁培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,免疫组化法鉴定骨髓间充质干细胞CD44和CD45蛋白的表达,MTT法检测5-杂氮胞苷对骨髓间充质干细胞增殖的影响,免疫组化法检测5-杂氮胞苷对骨髓间充质干细胞增殖细胞核抗原蛋白表达的影响。 结果与结论：①第3代骨髓间充质干细胞不表达或低表达CD45,高表达CD44。②与未加入5-杂氮胞苷组比较,5-杂氮胞苷干预48 h,6,12,24 μmol/L组显著促进细胞增殖活性(P < 0.05),无浓度依赖性。③与未加入5-杂氮胞苷组比较,5-杂氮胞苷干预48 h,6,12,24 μmol/L 组增殖细胞核抗原蛋白积分吸光度值显著增加 (P < 0.05),组间差异无显著性意义。结果显示在一定浓度范围内,5-杂氮胞苷发挥去甲基化作用,激活增殖细胞核抗原蛋白表达,从而促进骨髓间充质干细胞增殖。     

比较法在组织学与胚胎学教学中的应用探讨

目的：探讨比较法与传统法教学效果。方法：在中医本科九七级二个班的教学中,选取部分章节使用两种方法进行比较教学研究。结果：比较法教学效果优于传统法。结论：比较法组织学与胚胎学教学中教学效果较好,值得推广。     

小鼠精原干细胞染色体G带显示及其影响因素研究

目的:探索精原干细胞染色体G带显示技术及其影响因素,为如何鉴定培养状态下干细胞的染色体核型提供实验参考.方法:培养昆明系小白鼠精原干细胞,待细胞生长到15～20天时,吸出克隆细胞团,吹打分散后滴加秋水仙素处理4～6小时.收集细胞悬液,再经低渗处理后滴片染色制成.结果:正常小鼠精原干细胞染色体呈粒状、棒状,核型为20对,40条.结论:小鼠精原干细胞染色体受到细胞所处的分裂时期、低渗处理的效果、滴片时细胞的分散程度及胰酶浓度及消化时间等因素的影响.     

小鼠精原干细胞生物学特征的研究

目的:探讨培养状态下精原干细胞的生物学特征,为体外鉴定精原干细胞及认识精原干细胞在体内的生物学行为打下实验基础.方法:在预先制备的骨髓基质饲养单层上接种生后6～10天雄性小鼠生精细胞,于IMDM培养基及37℃下培养,倒置显微镜观察细胞增殖行为并对增殖后的细胞进行组织学、细胞化学、免疫组化及遗传学检测.结果:培养状态下的精原干细胞增殖经历了短暂增殖期、静止期和分离增生期三个阶段,且增殖细胞呈簇、团状生长,细胞问可见明显的胞质间桥,细胞核大,核/质比高,碱性磷酸酶及C-KIT受体阳性,染色体核型为20对(40条).结论:精原干细胞具有典型的生物学行为和特征,结合行为及生物学特征可对增殖的精原干细胞进行鉴定.     

以骨髓基质细胞为饲养层培养小鼠精原干细胞

目的:建立精原干细胞与骨髓基质细胞共培养细胞模型,探讨骨髓基质细胞层支持精原干细胞扩增的可能机制。方法:实验于2004-03/2005-04在泸州医学院医学分子生物学实验室完成。以6～8d龄小鼠为材料,脱颈处死后经体积分数为0.75的乙醇浸泡消毒,打开腹腔分离双侧睾丸,采用0.25%胰酶消化离心后培养睾丸细胞,采用差速贴壁法分离支持细胞与生精细胞。同时取小鼠胫骨骨髓,分离后用IMDM培养基培养,待细胞生长至单层时,以10mg/L丝裂霉素C处理的原代培养骨髓基质细胞作为饲养层,并将分离后的生精细胞接种至饲养层上,以含体积分数为0.1的小牛血清的IMDM为培养基,37℃下共培养,在倒置相差显微镜下观察细胞的生长特点,并对培养15d的细胞进行苏木精-伊红染色、碱性磷酸酶染色及C-Kit受体检测。结果:①支持细胞在培养后4～6h就开始贴附变形,此时生精细胞仍呈圆形,且悬浮于培养基中,将悬浮的圆形生精细胞吸出后接种于骨髓基质饲养层上共培养。培养8h后,见体积较小的原形细胞开始贴附增殖,继续培养三四天后见体积相对较大的圆形细胞开始死亡,推测增殖较小的细胞为精原干细胞。增殖细胞的生长特点及形态学特征与文献报道精原干细胞的特征相符合。②苏木精-伊红染色显示培养的生殖细胞大小均匀,核大而圆着色深、胞质浅染、核质比高;碱性磷酸酶染色见胞质和细胞膜为阳性,C-Kit受体显示细胞膜呈强阳性,背景基质细胞为阴性。这些均符合精原干细胞的生物学特征。结论:精原干细胞在未加入细胞因子、原代培养的骨髓基质细胞饲养层中能较长时间生长并分裂增殖,推测骨髓基质细胞通过分泌生物活性物质和细胞黏附分子支持精原干细胞的扩增。     

糖尿病大鼠胃黏膜细胞色素C异常表达及大黄素调控

目的：探讨糖尿病胃病的相关机制及大黄素干预。方法：SD大鼠随机分为对照组（正常组）、实验组（糖尿病组）与大黄素组,实验组应用腹腔一次性注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）建立糖尿病大鼠模型,造模成功10周后免疫组织化学检测胃黏膜腺细胞细胞色素C（cyt c）的表达情况。结果：①实验组和大黄素组大鼠于造模后均出现多尿、多饮、多食症状,体重减轻,平均体重明显低于对照组（P＜0.05）;平均血糖浓度显著高于对照组（P＜0.05）等糖尿病症状。但应用大黄素干预组大鼠的血糖浓度显著低于实验组。②实验组cyt c蛋白阳性表达的胃黏膜细胞数明显高于对照组（P＜0.05）;大黄素组cyt c蛋白阳性表达的胃黏膜细胞数明显少于实验组（P＜0.05）。结论：糖尿病引起大鼠胃黏膜细胞高表达cyt c蛋白,导致细胞死亡增加,参与糖尿病胃病的发生,而大黄素可降低胃黏膜细胞cyt c蛋白表达,从而缓解糖尿病胃病。     

精子细胞、精子特殊结构的方法显示及其意义

精子细胞作为一种终末生殖细胞,丧失了其细胞分裂能力,通过变态发育成为形态结构与其相差甚远的精子。精子细胞及精子中存在一些如顶体泡、核环、环粒等特殊结构,而这些结构的观察不仅在形态学上对认识精子变态发育有重要意义,而且其结构的改变在研究生殖毒物的作用机制及临床诊断男性不育中也有重要作用。由于在HE染色中这些结构不能被显示,须借助电镜才能识别,因此为临床快速检查药物对男性损伤及诊断男性生不育障碍带来一定困难。     

神经干细胞培养影响因素的研究

神经干细胞是指具有分化为神经元、星形胶质细胞、少突胶质和对疾病损伤具有反应性修复潜能的细胞。神经干细胞的发现对神经系统的难治性疾病的治疗带来了希望。然而,内源性神经干细胞的数量在机体内特别是在成体内存在极少,使其在反应性疾病损伤中的修复作用体现非常有限,因此,体外有效培养和扩增神经干细胞仍然是目前科研工作者获取神经干细胞的主要手段。本文就影响神经干细胞培养的主要影响因素如取材、分离培养、接种密度及传代纯化方法等方面进行分析,为神经干细胞的体外培养提供参考。     

浅谈医学发育生物学教学改革的实践与思考

发育生物学作为21世纪的前沿学科之一已得到广泛认同,在国外,几乎每所医学院校都开设了此课程。2000年以来,国内少数医学院校也相继开设了医学发育生物学课程,笔者所在教研室已经承担了四年的本科医学发育生物学课程的教学。在几年的教学过程中,我们采用了一些教学改革措施,并已初见成效。