人TIMP-2蛋白在肝癌细胞迁移与侵袭中的作用

目的 通过原核表达获取人TIMP-2蛋白,探讨TIMP-2在肝癌细胞迁移及侵袭中的作用。 方法 以SMMC-7721肝癌细胞总RNA为模板,用RT-PCR技术扩增出人TIMP-2基因cDNA,通过基因重组技术构建原核表达载体pGEX-TIMP-2并在大肠杆菌Origami(DE3)中诱导表达人TIMP-2重组蛋白。采用亲和层析法纯化表达产物,并用Western blotting鉴定;用RNAi技术和添加外源蛋白方法分析TIMP-2蛋白对肝癌细胞迁移和侵袭的作用;荧光定量PCR 、Western blotting检测siRNA-TIMP-2转染细胞后肝癌细胞内源性TIMP-2的mRNA及蛋白表达水平。 结果 外源添加的TIMP-2 蛋白抑制肝癌细胞迁移及侵袭的能力,而RNAi技术能抑制内源的TIMP-2蛋白增强肝癌细胞迁移及侵袭的能力;肝星状细胞的条件培养液能够促进肝癌细胞迁移和侵袭,而这种作用能够被TIMP-2蛋白抑制。 结论 肝癌微环境中的TIMP-2蛋白水平与肝癌细胞的迁移和浸润密切相关。     

骨骼风痛片中鸡血藤高效液相特征图谱研究

目的建立骨骼风痛片中鸡血藤的高效液相特征图谱分析方法。方法采用HPLC-UV法,以芒柄花素为参照物,采用色谱柱GraceSmart RP 18(5μm,4.6mm×250mm),以乙腈-0.1%磷酸(34:66)为流动相,柱温40℃,流速0.8 mL/min。结果鸡血藤有6个共有峰,10批不同来源的鸡血藤药材相似度在90%以上,确定了骨骼风痛片成品中3个特征峰归属于鸡血藤。结论该方法简便、快速,可为骨骼风痛片的质量提供更为科学、准确的控制。     

硅烷偶联剂对纯钛表面改性及细胞相容性的影响

背景：目前国内将硅烷偶联用于金属表面预处理的报道较少。目的：对NaOH碱处理的钛片行硅烷化改性,观察硅烷膜的表面形貌与结构特征及细胞相容性。方法：对制得的纯钛试件行NaOH碱处理,然后分别以8%,15%,33%浓度的KH-550硅烷偶联剂进行改性处理,以纯钛片和碱处理的钛片为对照组,采用扫描电镜观察改性处理钛片表面微观形貌,采用能谱仪分析改性处理钛片表面的成分。将纯钛片、碱处理的钛片及不同浓度 KH-550硅烷偶联剂改性处理的钛片分别与犬骨髓间充质干细胞共培养,观察材料表面细胞的形态及黏附。结果与结论：硅烷膜由许多呈脑浆状的小片构成,排列紧密,主要由C、N、O、Si等元素组成。当硅烷溶液浓度为8%时,钛表面难以形成较完整的硅烷膜;当硅烷溶液浓度为15%时,钛表面形成的硅烷膜表面较8%浓度组钛表面相对较完整,但可仍见有较多裂纹,难以形成致密的硅烷膜;当硅烷溶液浓度为33%时,纯钛表面能形成致密的硅烷膜。犬骨髓间充质干细胞在33%浓度硅烷膜处理后钛基体上的黏附情况明显优于纯钛、碱处理钛片及8%,15%浓度硅烷膜处理后的钛片。说明33%硅烷化改性纯钛表面硅烷膜较完整,并且具有良好的生物相容性,可促进骨髓间质干细胞在活性层表面的黏附。     

非小细胞肺癌患者血清Ras相关区域家族1A基因异常甲基化检测及意义

目的 探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血清中Ras相关区域家族1A(Ras association domain family 1A,RASSF1A)基因启动子区域甲基化状况及其临床意义.方法 基因测序法检测62例NSCLC患者、30例肺部良性疾病患者和16名健康体检者血清中RASSF1A启动子区域甲基化状况,并分析其与临床特征的关系.结果 RASSF1A甲基化检出率在NSCLC患者为45.16%(28/62),而肺部良性疾病患者和健康体检者血清未检出(P<0.05).NSCLC患者血清RASSF1A基因甲基化率在Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期,低、未分化组高于高、中分化组(P <0.05),与年龄、性别、吸烟指数、病理类型无关.结论 RASSF1A异常甲基化可能在NSCLC发生、发展中起重要作用,有望成为NSCLC辅助诊断和预后判断的分子标记.     

以呼吸困难为主诉的中暑患者临床诊治分析

我院自1998～2006年夏季收治的急诊患者中,以呼吸困难为主诉的中暑患者30例,现将诊治情况总结如下。     

乙酰胆碱对碘缺乏子代大鼠尾核神经元放电的影响

目的 探讨地方克汀病智力低下与尾核神经元放电活动及神经递质的关系。方法 复制碘缺乏子代大鼠模型,采用玻璃电极记录磺缺乏子代大鼠尾核神经元单位自发放电活动并观察脑室注入乙酰胆碱对其影响。结果 磺缺乏了在鼠尾核神经元自发放电数目稀少,以低、中频率为主,而对照组以中、高频率占优（Ｐ〈０．０１）,注入乙酰胆碱后,对照组５５％尾核神经元放电呈兴奋效应,而磺缺乏子代大鼠仅有２３％兴奋,５８％无明显变化。结论磺     

人TIMP-2基因的克隆及其原核表达

目的 构建人TIMP-2重组表达载体,并在大肠杆菌BL21 (DE3)中表达.方法 提取人肝癌细胞(Hep G2)总RNA后,经RT-PCR扩增获得目的片段,插入克隆载体pMD18-T;酶切鉴定和测序后将TIMP-2导入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒pGEX-TIMP-2.将重组质粒转化至大肠杆菌菌株BL21 (DE3)中,IPTG诱导融合蛋白表达后用SDS-PAGE电泳检测并用western blot验证(蛋白质印迹法).结果 成功构建原核重组表达载体pGEX-TIMP-2,并在原核宿主BL21中大量表达融合蛋白GST-TIMP-2.结论 克隆人TIMP-2基因并在原核生物中大量表达.     

藏药线叶龙胆化学成分的研究

目的 对藏药线叶龙胆化学成分进行研究.方法 用普通硅胶柱色谱和制备薄层色谱等方法进行分离、纯化,并经核磁共振(NMR)、质谱(MS)、红外(IR)等现代波谱技术鉴定结构.结果 从线叶龙胆的乙醇提取物中分离并鉴定了10个化合物,α-香树脂醇(1),β-香树脂醇(2),28-羟基-α-香树脂醇(3),28-羟基-β-香树脂醇(4),3β-棕榈酸酯-28-羟基-α-香树脂醇(5),3β-棕榈酸酯-28 -羟基-β-香树脂醇(6).胡萝卜苷(7),β-谷甾醇(8),28-羟基-羽扇豆醇(9),24-羟基-羽扇豆醇(10).结论 这10个化合物均为首次从该植物中分离得到.     

医院管理中质量控制指标的探讨

病床工作效率是衡量医院质量管理的主要指标之一。本文选用四种不同计算公式,以肖山县人民医院1973～1983年资料为例,进行计算比较。公式:1.病床工作效率(x)=平均病床周转次数