石茵退黄汤治疗气滞湿阻型慢性乙肝的临床研究

笔者多年的临床观察,慢性乙肝活动期的患者大多属于中医辨证之气滞湿阻型,虽兼夹有热、瘀、虚等病理特征的不同,但肝郁气滞、脾虚湿阻之征象贯穿于大部分乙肝活动期。2011年6月-2013年6月,笔者采用石茵退黄汤联合阿德福韦酯治疗慢性乙肝,现将结果报告如下。     

重氮乳胶反向凝集试验与乳凝试验在血吸虫病临床诊断中的…

本文应用日本血吸虫虫卵单克隆抗体及虫卵可溶性抗原，分别致敏新型免疫微球载体重氮基聚苯乙烯乳胶，制备出血吸虫反向乳凝试剂与乳凝试剂，并用于检测血吸虫病患者血清标本中的相应抗原和相应抗体，以此试验检测１９７份急慢性血吸虫病患者血清标本。结果反向乳凝试剂检出率为９０．４％，乳凝试剂检出率为９５．２％，均高于反向间接血凝法的８５．０％。反向乳凝试验与乳凝试验联合应用，既可早期诊断，又可判断疗效。试验采用玻     

Pf332抗原的结构和抗原表位的初步研究

目的　了解恶性疟原虫FCCl／HN株Pf332抗原(Ag332)的初级结构和潜在的抗原表位。方法　根据Pf332基因已知序列，合成9对引物用于从恶性疟原虫FCCl／HN株基因组DNA中扩增Pf332基因片段。将扩增得到的9个Pf332基因片段插入pMD-18T载体后测序。用DNAstar软件将测定的Pf332基因片段序列拼接出成完整的Pf332基因序列。分别用SAPS、Tmpred、SingalP和Blastn程序来分析Ag332的初级结构和序列同源性。将与Pf332基因的9595－10083、10339－10767和10855－11247位碱基对应的RO、R1和R2片段分别插入真核表达载体pcDNA3-S。将pcDNA3-R0、pcDNA3-S-R1和pcDNA3-S-R2分别免疫Balh/c鼠，并通过免疫组化检测表达产物。通过ELISA和体外疟原虫生长抑制实验来鉴定DNA免疫所诱导的保护性免疫反应。结果扩增到特异的9个Pf332基因片段，并正确插入pMD-18T载体。序列测定和拼接结果显示，恶性疟原虫FCC1/HN株Pf332基因长16377bp，编码5458个氨基酸，相对分子质量约615.28ku。Ag332包含17个调度简并的富谷氨酸重复序列，抗原中谷氨酸占30.18%。恶性疟原虫FCCl/HN株和3D7株Ag332的氨基酸残基同源性达94.55%。免疫组化检测显示R0、R1和R2在鼠肌肉组织中表达。分别免疫了pcDNA3-S-R0,pcDNA3-S-R1和pcDNA3-S-R2的实验组IgG含量显大于空白对照组和pcDNA3组（P＜0.05)。体外疟原虫生长抑制实验结果表明，pcDNA3-S-R0,pcDNA3-S-RI和pcDNA3-S-R2组的免疫血清在1：5稀释度时对恶性疟原虫的生长有抑制作用。结论　Pf332抗原是一包含很多调度简并的富谷氨酸重复序列的大蛋白，Pf332基因片段R1和R2编码潜在的抗原表位重复序列。     

Echinococcus granulosus钙结合蛋白基因的克隆和序列分析

目的：获得细粒棘球蚴Calcium-binding protein(CaBPs)基因序列资料，进行序列分析，为包虫病免疫预防研究奠定基础。方法：从包囊内获取细粒棘球蚴原头蚴（protoscolices)，提取RNA，逆转录成cDNA，用特异引物扩增CaBPs基因；并将其克隆到T载体后进行序列测定和分析。然后登录Cene/Bank数据库。结果：以cDNA为模板获得3个核苷酸长度不同的基因，分别是CaBP1为914bp,CaBP2为1095bp,CaBP3为1039bp。同源性比较结果表明：来自新疆羊源CaBPs基因序列和巴西（Brazil)羊源基因CaBPs同源性为90％以上；从cDNA获得的3个CaBPs基因序列的比较分析说明钙结合蛋白可能存在一个家族，有不同的成员组成。结论：CaBPs在E.granulosus虫体发育过程中具有十分重要的功能，到目前为止其机理尚不完全明了，CaBPs基因的获得为进一步研究其结构和功能，以及对包虫病的防治具有重要作用。     

30例格林巴利综合征（GBS）的临床和神经电生理分析

资料与方法 一般资料：本组男14例，女16例；年龄11～72岁，平均37岁；急性起病27例，亚急性起病3例。     

生物信息学分析亚洲牛带绦虫WD40基因及其蛋白质的结构与功能

目的 分析和预测亚洲牛带绦虫WD40基因及其编码蛋白的结构和特性,用于指导其生物学功能的实验研究.方法 利用美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)、瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY,http://ca.expasy.org/)和IEDB Analysis Recource提供的各种生物信息学在线分析程序.结合其它生物信息学分析软件包如Pcgene和Vector NTI suite,从亚洲牛带绦虫全长cDNA质粒文库中识别WD40基因及其编码区,分析、预测该基因编码的蛋白质的理化特性、翻译后的修饰位点、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维空间构象等.结果 该基因全长1 208 bp,编码区为81～1 056 bp,编码402个氨基酸,为全长基因;无跨膜区,具有多个磷酸化位点,蛋白的理化性质稳定,理论分子量为35 942.4;没有质体、线粒体定位序列;预测该蛋白表面有三个亲水性强的线性表位和三个B细胞抗原表位.结论 应用生物信息方法从亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中识别出了亚洲牛带绦虫WD40基因,并对其所编码的蛋白质的结构与功能进行了预测.     

多媒体教学与传统教学在人体寄生虫学实验教学中的结合应用

目的探讨多媒体实验与传统实验在人体寄生虫学实验教学中的应用效果。方法制作多种寄生虫多媒体实验教学课件,配合传统实验教学内容在本科实验教学中试用。结果多媒体实验在人体寄生虫学实验教学中起着重要作用,但多媒体实验教学并不能代替传统的实验教学。结论多媒体教学与传统教学相结合的实验教学模式在人体寄生虫学实验教学中有较好效果。     

小鼠β2m正义与反义RNA表达载体的构建及鉴定

[目的]构建小鼠β2微球蛋白基因(β2 microgbbulingene,β2m)正义及反义RNA表达载体,为研究降低细胞MHCⅠ类分子的表达作准备.[方法]从小鼠基因组获得的β2m克隆中以β2m-pSV2△HXgpt为模板,合成两对引物,采用常规PCR方法分别扩增出β2m引导区及其下游主要编码区,即外显子1及部分外显子2,然后利用重叠延伸法将两条片段拼接起来,再将其分别正向、反向插入载体pcDNA3,并进行限制性内切酶酶切鉴定及序列分析.[结果]构建出小鼠β2m正义和反义RNA表达载体pcDNA3-β2mSN及pcDNA3-β2mAN.[结论]克隆的正义及反义β2m经限制性内切酶酶切鉴定结果正确,测序分析结果与文献一致,从而为下一步降低移植排斥反应的体内外研究奠定了基础.     

恶性疟原虫疫苗的研究──Ⅰ．环子孢子蛋白基因中央保守区的体外扩增

恶性疟原虫环子孢子蛋白基因中央保守区编码产物具有３７个ＮＡＮＰ串联重复序列，并认为（ＮＡＮＰ）ｎ具有保护性免疫作用。本文通过酚／氯仿抽提乙醇沉淀方法提取恶性疟原虫全基因组ＤＮＡ，首次采用ＰＣＲ方法获得环子孢子蛋白ＣＳＰ基因中央保守区片段。我们用地高辛标记的ＰＣＲ产物作ＤＮＡ探针，杂交试验表明具有高度的敏感性和特异性。同时，本文还探讨了ＰＣＲ技术在病原学检测、疫苗研制、流行病学调查、疗效考核等方面的潜在应用前景。     

华支睾吸虫成虫RPEF基因产物及其抗RPEF多克隆抗体的制备

目的 体外制备华支睾吸虫成虫RNA聚合酶Ⅱ延长因子(RPEF)基因产物及抗RPEF多克隆抗体.方法 亲和纯化试剂盒纯化表达蛋白pGEX-4T-1-RPEF,凝血酶酶切表达蛋白制备重组蛋白RPEF,将重组蛋白RPEF免疫小鼠,制备多克隆抗血清,检测抗体滴度和抗血清特异性.结果 体外制备的RPEF蛋白经SDS电泳呈单一条带;酶联免疫吸附结果显示,免疫过程抗体滴度呈连续上升趋势;免疫印迹结果显示,小鼠抗血清具有抗RPEF特异性.结论 获得较专一的华支睾吸虫RPEF蛋白和RPEF抗血清.