热休克因子1调控的细胞凋亡相关基因的筛选与鉴定

[目的] 观察热休克因子1在热休克反应时对细胞凋亡相关基因表达的调控，同时筛选和初步鉴定热休克因子1调控的下游凋亡相关基因。方法 采用热休克因子1基因敲除小鼠热休克反应模型，抽提热休克因子1基因敲除小鼠和野生型小鼠心肌和肺组织的总RNA进行基因芯片实验，观察凋亡相关基因表达的情况；同时采用生物信息学技术对上述差异表达基因的启动子区进行分析，筛选含有热休克元件的基因；通过逆转录一聚合酶链反应进一步验证热休克因子1对上述基因表达的调控。结果 热休克反应后，野生型小鼠与热休克因子1基因敲除小鼠组织中差异表达的细胞凋亡相关基因有40个。经Genomatix和TESS软件分析发现其中Fasl、Fas、Bim、Bak等8个基因的启动子区含有热休克因子1结合位点。经逆转录一聚合酶链反应证实，热休克反应使Fasl在热休克因子1基因敲除小鼠的表达较野生型小鼠明显增高，而在稳定转染热休克因子1的Raw264.7细胞，Fasl的表达较转空载体细胞明显降低。结论 热休克因子1可调控FasL等多个细胞凋亡相关基因的表达。     

新药(中药)治疗消渴病(糖尿病)临床研究的技术指导原则

总则消渴病系因机体肺胃肾三脏热灼阴虚,水谷输布失常所致的以口渴引饮,消谷善饥,尿频量多,形体日益消瘦为主的病证。临床上消渴病类似于西医的糖尿病,是一种常见的,多发的慢性病,目前尚无根治的方法。其病理改变常涉及到全身各个系统,为该病致死、致残的主要原因。严重地危害人民健康和     

适足

智莫过实,财莫过足, 行莫过力,则 能互相优养, 各得其全。若 过则费而且 伤,大者伤命, 小者成灾,良 为违天背道, 法所不容。适     

羟乙基淀粉溶液在复苏肠缺血再灌注休克中的作用

目的　比较不同剂量羟乙基淀粉溶液 ( HES)对兔肠缺血再灌注损伤所致休克的复苏作用。方法　 32只新西兰白兔随机分为 4组 :模型对照、乳酸林格液复苏组 ( L RS,2 0 m l· kg- 1 · h- 1 ) ,小剂量 HES复苏组 ( HES2 ml· kg- 1· h- 1 L RS18m l· kg- 1· h- 1 ) ,大剂量 HES复苏组 ( HES2 0 ml· kg- 1· h- 1 )。采用肠系膜上动脉夹闭 6 0 m in后松夹行再灌注制备肠缺血再灌注休克模型 ,松夹再灌注时同步进行液体复苏。观测各时间点的血流动力学参数 (平均动脉压、心率、心排血量、肠系膜上动脉血流 ) ,并通过测定肠黏膜CO2 分压和动脉血 CO2 分压的差值 (动脉二氧化碳间隙 )、肠黏膜 p H值、动脉血乳酸浓度和氧输送等指标间接评估组织氧合情况。实验结束后累计动物死亡数。结果　 HES能明显提高肠缺血再灌注休克时的血流动力学参数 ,与对照组和 L RS组比较差异均有显著性 ( P均 <0 .0 5 ) ;小剂量 HES比大剂量 HES改善血流动力学参数的作用更平稳 ( P均 <0 .0 5 ) ,且较其他 3组能明显降低血乳酸浓度和动脉二氧化碳间隙 ,减轻 p Hi的降低 ( P均 <0 .0 5 ) ;而大剂量 HES对上述参数的影响不明显 ,并可见动物口鼻出血及死亡 ;小剂量或大剂量HES与其他两组比较均能使氧输送回升 ( P均 <0 .0 5 )。结     

Fxclass高通量血液透析器对尿毒症透析患者氧化应激反应影响的临床研究

目的 探讨Fxclass高通量血液透析器对尿毒症透析患者氧化应激反应的影响.方法 将60例血液透析患者按随机数字表法分成3组,每组20例.Fxclass 60高通量组采用Fxclass 60高通量血液透析器治疗;F60HPS高通量血液透析组采用F60HPS高通量血液透析器治疗;F6HPS低通量血液透析器组:采用F6HPS低通量血液透析器治疗;20名健康体检者为正常对照组.所有患者分别在治疗前,治疗第4、8、12周检测血浆晚期氧化蛋白产物、丙二醛水平以及谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化物歧化酶活力,检测治疗前及治疗12周后血清补体C3a及白细胞介素1受体拮抗剂的水平,通过检测结果来分析不同膜材料及超滤系数不同的透析器对维持性血液透析患者氧化应激水平的影响.结果 Fxclass 60高通量组、F60HPS高通量血液透析组、F6HPS低通量血液透析组患者治疗前血丙二醛、晚期氧化蛋白产物、补体C3a、白细胞介素1受体拮抗剂、过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平与正常对照组比较差异有统计学意义(P均＜ 0.01);各组患者血丙二醛、晚期氧化蛋白产物、补体C3a、白细胞介素1受体拮抗剂水平之间呈正相关(r =0.45,P＜ 0.05).与过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平之间呈负相关(r=0.38,P＜0.05).治疗4周后Fxclass 60高通量组、F60HPS高通量血液透析组患者血丙二醛、晚期氧化蛋白产物、过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.01);而F6HPS低通量血液透析组患者血丙二醛、晚期氧化蛋白产物、过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平与治疗前比较差异无统计学意义(P均＞0.05);治疗第8周时,Fx-class 60高通量组、F60HPS高通量血液透析组患者血丙二醛、晚期氧化蛋白产物、过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平与第4周时比较差异有统计学意义(P均＜0.05);而F6HPS低通量血液透析组患者血丙二醛、晚期氧化蛋白产物、过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平与治疗前及治疗第4周时比较差异无统计学意义(P均＞0.05);治疗第8周时,Fxclass 60高通量组和F60HPS高通量血液透析组患者血丙二醛、晚期氧化蛋白产物、过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平比较差异有统计学意义(P均＜0.05);而治疗第12周时,Fxclass 60高通量组患者血丙二醛、晚期氧化蛋白产物、过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平与第8周时比较差异有统计学意义(P均＜0.05);而F60HPS高通量血液透析组患者血丙二醛、晚期氧化蛋白产物、过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平与第8周时比较差异无统计学意义(P＞ 0.05);F6HPS低通量血液透析组患者血丙二醛、晚期氧化蛋白产物、过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平与治疗前及治疗第8周时比较差异无统计学意义(P＞0.05);治疗第12周时,Fxclass 60高通量组和F60HPS高通量血液透析组患者血丙二醛、晚期氧化蛋白产物、过氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平组间比较差异有统计学意义(P均＜0.05);治疗第12周时,Fxclass 60高通量组患者血清补体C3a、白细胞介素1受体拮抗剂水平与治疗前比较差异有统计学意义(P均＜0.01); F60HPS高通量血液透析组及F6HPS低通量血液透析组患者血清补体C3a、白细胞介素1受体拮抗剂水平与治疗前比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Fxclass高通量血液透析器可明显降低尿毒症透析患者的氧化应激反应.     

氧化应激所致C2C12肌源细胞核仁损伤的分子机制

目的探讨氧化应激诱导细胞核仁损伤的分子机制.方法向传代培养的C2C12肌源细胞中加入0.5mmol/L过氧化氢以模拟氧化应激.结果甲苯胺兰染色发现正常C2C12细胞可见一个位于中央的,浓染致密的核仁颗粒.过氧化氢处理后3h,可见明显的核仁分离,处理6h最为明显.细胞总蛋白质合成能力分析发现过氧化氢处理后6h细胞总蛋白质合成能力显著下降(与正常对照比P＜O.05),并持续至24h.免疫印迹检测核仁素(又称C23)发现,过氧化氢处理1h后可见-80kDa条带,而其110kDa主带明显减弱,过氧化氢处理6h和12h最为明显.用脂质体将核仁素反义核酸导入细胞后24h,免疫印迹发现核仁素表达明显被抑制,同时也可观察到细胞总蛋白合成能力下降及明显的核仁分离.结论氧化应激通过诱导核仁蛋白质核仁素的裂解并使其110kDa全长分子的量减少,而导致C2Cl2细胞核仁损伤.     

膜表面核仁素对内毒素所致THP-1细胞炎症介质表达的影响

目的探讨THP-1细胞膜定位核仁素作为寡糖链受体在脂多糖所致炎症反应中的作用。方法采用间接免疫荧光、流式细胞术以及细胞膜蛋白免疫印迹等技术证实核仁素在人THP-1细胞膜表面表达。以无血清状态下脂多糖刺激THP-1细胞为炎症细胞模型，采用逆转录聚合酶链反应及酶联免疫吸附测定法等检测核仁素抗体对炎症介质肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β的表达与分泌的影响。结果间接免疫荧光、流式细胞术以及免疫印迹证实核仁素可在人THP-1细胞膜表面表达。逆转录聚合酶链反应结果发现，在无血清条件下，500μg/L脂多糖刺激1h、2h、3h或4h后可以明显促进肿瘤坏死因子α和白细胞介素1βmRNA表达，而核仁素抗体处理1h后再用脂多糖刺激1h、2h、3h或4h，肿瘤坏死因子α和白细胞介素1βmRNA表达明显受到抑制。而先用正常IgG体处理1h后再用脂多糖刺激1h、2h、3h或4h，肿瘤坏死因子α和白细胞介素1βmRNA表达与单用脂多糖刺激水平相当。另外单用正常IgG或核仁素抗体处理1～4h，肿瘤坏死因子α和白细胞介素1βmRNA表达与对照组比较无差异。酶联免疫吸附测定法检测发现，核仁素抗体处理1h后能明显抑制脂多糖所致肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β的分泌，而IgG则没有这种作用。结论THP-1细胞膜表面核仁素参与了脂多糖所致炎症反应，提示核仁素可能是脂多糖的一种新受体。     

术前外周淋巴细胞和单核细胞比值在根治术后内分泌治疗前列腺癌患者预后评估中的研究

目的:探讨术前淋巴细胞和单核细胞比值(LMR)与前列腺癌根治性切除术(RP)后接受内分泌治疗的前列腺癌(PCa)患者生化复发及预后的关系。方法:采用回顾性研究分析2008年6月至2019年6月我院术后接受内分泌治疗的306例PCa患者的临床和随访资料。所有患者均行RP。观察终点为无生化复发生存期(RFS)。通过Kapl...     

正畸治疗诱导阻生上颌尖牙的自发萌出

目的 探讨阻生上颌尖牙正畸治疗诱导自发萌出的方法,总结合适的临床处理策略,为阻生尖牙的合理治疗提供依据.方法 选择13例恒牙列患者(男6例,女7例)的17颗阻生上颌尖牙,通过正畸治疗在相应牙弓位置为尖牙预留充足的间隙,待其自发萌出后直接粘结矫正装置排入牙列正常位置.结果 预留间隙2～24个月后阻生尖牙自发萌出,治疗后尖牙及邻牙牙周状况良好.结论 当阻生尖牙错位不严重,扩弓或减数拔牙即能为阻生尖牙提供足够萌出间隙,判断其能自行萌出时,可采取正畸诱导自萌的方法进行治疗.     

医院感染监控网络软件的应用

随着现代医学的发展,医院感染的重要性日益突出。许多从事医院感染管理的工作者都在寻求科学实用的该管量的监控网络软件。但是,该监控软件内容要涵盖医院消毒卫生学监测、感染病例监测、抗菌药物合理应用分析等多个方面,数据流程复杂,是一个亟待解决的跨学科、跨专业的难题。为此,我院成立了由医院感染管理者和计算机专业人员共同组成的课题小组,自行开发了一套医院感染监控网络软件,应用两年多来,效果良好。一、材料和方法医院感染监控网络软件:软件包括《医院消毒卫生学监测系统》、《医院感染病例监测系统》、《抗菌药物合理使用分析系…