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KLF4( Kruppel-like factor 4)是新发现的真核锌指蛋白转录因子,在细胞增殖和分化中发挥重要的生物学效应,其通过多种途径调节细胞的生长、分化、凋亡、增殖,被认为与肿瘤的发生、发展和转移密切相关。 KLF4主要在消化道和上皮细胞中表达,在口腔、食管、皮肤、睾丸、胸腺、角膜、淋巴细胞等处也有表达。 KLF4蛋白表达主要定位在细胞核。在检测过程中,按实验室常规免疫组化染色条件, KLF4不表达或多定位于细胞质,核表达率较低。本实验采用不同抗原修复方法比较KLF4在小鼠舌黏膜上皮的表达情况,以确定其免疫组化染色的最佳抗原修复条件,为进一步利用C57 BL/6 J小鼠口腔癌模型研究KLF4与口腔癌发生发展的关系提供技术帮助。 相似文献
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目的 建立人卵巢癌永生化细胞系,为卵巢癌体外研究提供实验模型。方法 利用基因重组技术构建猴肾病毒40(SV40)T抗原基因的高效真核表达载体pcD2-SV40。将其转染10例原代培养的早期传代细胞,经G418筛选,抗性克隆扩大培养,建立永生化细胞系。免疫组化检测细胞的上皮起源,用PCR、RT-PCR和Southern Blot方法鉴定SV40 T基因在转染细胞中的表达。观察所建立的永生化细胞系的染色体核型。结果 10例转染细胞中,6例筛选出抗性克隆。角蛋白免疫组化证实3例为上皮起源。其中2例上皮起源细胞得以扩大培养成系,长期稳定传代,分别命名为BUPH:OVSC-2和BUPH:OVCA-3。经鉴定两种细胞系中存在SV40 T在基因水平及转录水平的表达。其染色体核型均符合人体恶性细胞特征。结论 利用SV40T抗原基因进行人卵巢癌原代细胞的 生化是一种可行的、可重复的建系方法,可提高卵巢癌细胞成系机率。 相似文献
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目的 观察MMP-9抑制剂对人口腔鳞癌细胞系CAL27增殖和侵袭能力的影响。方法 选取人口腔鳞癌细胞系CAL27进行培养,用不同浓度的MMP-9抑制剂BB-94处理对数期CAL27细胞,通过RT-PCR检测BB-94在基因水平上对MMP-9的抑制效果。细胞免疫化学实验检测BB-94在蛋白水平上对MMP-9的抑制效果。MTT实验检测MMP-9抑制剂BB-94对人口腔鳞癌细胞增殖能力的影响。划痕实验检测MMP-9抑制剂BB-94对人口腔鳞癌细胞迁移能力的影响;Transwell实验检测MMP-9抑制剂BB-94对人口腔鳞癌细胞侵袭能力的影响。结果 MMP-9抑制剂能有效抑制人口腔鳞癌细胞CAL27的增殖、迁移和侵袭能力。结论 抑制MMP-9的表达可以抑制人口腔鳞癌细胞CAL27的增殖、迁移和侵袭等恶性生物学行为。 相似文献
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目的通过检测8-OHdG的含量,探讨DNA氧化损伤与酒精相关性口腔癌发生的相关性。方法将100只小鼠(B6.129SF2/J)分3组,阴性对照组不做任何处理;4NQO处理组饮用50μg/ml 4NQO水溶液16周,然后饮用纯净水8周;4NQO+酒精处理组,饮用50μg/ml 4NQO水溶液16周,然后饮用8%酒精溶液8周。实验第24周末处死全部动物,取舌组织行组织病理学观察和BrdU、8-OHdG免疫组化染色。结果阴性对照组未发现上皮异常增生或癌变;4NQO处理组和4NQO+酒精处理组小鼠口腔鳞癌发生率分别为22.7%和50.0%(P0.01)。在鳞癌的病变中,与4NQO处理组(13.46±6.11)%相比,4NQO+酒精处理组BrdU阳性率(18.65±10.50)%显著升高(P0.01)。在异常增生和癌组织中,4NQO+酒精处理组8-OHdG染色的IOD值均高于4NQO处理组(P0.05)。结论长期酒精摄入能够促进口腔癌的发生,其机制可能与在一定程度上引起DNA的氧化损伤有关。 相似文献
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目的 观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对RhoC稳定敲低的口腔鳞癌细胞系CAL27 RhoC/shRNA的影响。方法 选取口腔鳞癌细胞系CAL27 RhoC/shRNA进行培养,用不同浓度的SFN处理对数期CAL27RhoC/shRNA细胞,通过RT-PCR和western blot检测SFN对细胞中Nrf2 RNA和蛋白水平的影响。分别通过MTT实验、克隆形成实验和侵袭实验检测SFN对口腔鳞癌细胞增殖能力、克隆形成能力和侵袭能力的影响;PHOD染色检测SFN对口腔鳞癌细胞F-actin聚合能力的影响。结果 应用SFN能有效抑制口腔鳞癌细胞CAL27 RhoC/shRNA的增殖能力、克隆形成能力、侵袭能力和F-actin蛋白聚合能力。结论 SFN可减弱RhoC敲低的口腔鳞癌细胞的恶性能力。 相似文献
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目的 检测卵巢癌组织中人垂体肿瘤转化基因 1(hPTTG1)的表达。方法 将 4例卵巢癌组织用含 5 12条人类基因的基因表达谱芯片筛查卵巢癌相关基因。对上调基因hPTTG1在 39例卵巢癌组织及 18例正常卵巢组织中的表达情况用免疫组化方法进行检测。结果 hPTTG1在所有卵巢癌标本中均呈阳性表达 ,而在正常卵巢中无表达。免疫反应性的强弱与卵巢癌的病理类型、临床分期及组织学分级无显著相关性。结论 hPT TG1表达增高可能是卵巢癌的一个分子标志 ,有可能作为一个治疗靶点。 相似文献
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目的 检测Krüppel-like factor4 (KLF4)在小鼠舌黏膜癌变模型中的表达,探讨KLF4与口腔黏膜癌变的关系.方法 选用C57BL/6J小鼠75只,其中阴性对照组15只,饮用纯净水;实验组小鼠60只,饮用4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)水溶液(50μg/ml).实验组分别在第8、12、16、24周末各处死15只小鼠,取舌组织,观察并记录标本的大体损害,将其固定在10%中性福尔马林溶液中,用于HE染色及KLF4免疫组织化学染色.结果 在4NQO的诱导下,成功构建了小鼠舌黏膜癌变模型.HE染色结果显示,随着4NQO处理时间的延长,小鼠舌黏膜病变逐步加重,呈现出从单纯增生、异常增生到癌的变化.免疫组化结果显示,KLF4在口腔癌变过程中呈现动态变化,与正常口腔黏膜上皮相比,KLF4在单纯增生、异常增生上皮中的表达没有明显变化,但在鳞癌中,KLF4的表达量明显下降,具有显著性差异(P<0.01).结论 KLF4可能在口腔黏膜上皮癌变过程中发挥抑癌基因的作用. 相似文献
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mRNA差异显示方法筛选卵巢癌相关基因 总被引:1,自引:0,他引:1
人和动物肿瘤的发生发展就细胞而言,是由于原癌基因的激活和抑癌基因的失活而造成的,所以癌基因与抑癌基因的研究对探索肿瘤发病机理,寻找预防和治疗肿瘤的新措施都具有重要意义.卵巢癌在妇科恶性肿瘤中以难治著称,不易早期发现,且存活率低.目前人类对卵巢癌的遗传基础认识仍然不很清楚,许多研究表明卵巢癌的发生涉及一系列基因的变化,包括显性癌基因、错配修复基因和众多的肿瘤抑制基因.mRNA差异显示方法因其简单、敏感、高效、快速等 相似文献
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目的 研究HOXC9基因对口腔鳞癌细胞系CAL-27生物学行为的影响。方法 构建HOXC9过表达质粒载体,HOXC9过表达质粒转染CAL-27细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后细胞中HOXC9 mRNA表达水平,Western blotting检测转染后HOXC9蛋白表达水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测过表达HOXC9对细胞增殖能力的影响,克隆形成实验检测过表达HOXC9对细胞克隆形成能力的影响,划痕实验检测过表达HOXC9对细胞迁移能力的影响,Transwell实验检测过表达HOXC9对细胞侵袭能力的影响。结果与空载对照组相比,转染HOXC9过表达质粒后,细胞中HOXC9 mRNA表达水平明显升高(P<0.001)。实验组细胞中HOXC9蛋白表达明显升高,过表达HOXC9对CAL-27细胞的增殖能力无明显影响(P>0.05),过表达HOXC9可以促进CAL-27细胞的克隆形成能力(P<0.05),过表达HOXC9可以促进CAL-27细胞的迁移能力(P<0.05),过表达HOXC9可以促进CAL-27细胞的侵袭能力(P<0.001... 相似文献