尼帕病毒N基因的原核表达

目的利用尼帕病毒(NiV)的N基因进行原核表达,探讨NiV N蛋白作为检测NiV存在的抗原的可能性。方法利用pET-28a(+)作为表达载体,构建pET-NiV N重组质粒,通过IPTG诱导使其表达蛋白,并用Western blot方法进行原核表达NiV N蛋白的检测。结果通过PCR、酶切和连接反应,成功构建N蛋白的pET-NiV N重组质粒,大小为1596 bp;利用IPTG诱导pET-NiV N重组质粒在宿主菌中表达N蛋白,SDS-PAGE结果显示,55 k D有特异蛋白条带,与蛋白预计大小相符,经Bandscan软件扫描分析,重组蛋白量占菌体总蛋白量的12%;Western blot法检测显示,55 k D的条带显色良好,证明是本实验所需要得到的目的蛋白。结论使用原核表达系统成功表达了NiV的N蛋白,为其进一步的抗体制备、活性鉴定及研究应用奠定了基础。     

不同类型椎间盘退变动物模型的评价与比较

椎间盘退变发生机制以及再生和修复一直是脊柱外科研究的热点和重点,而作为重要研究载体的椎间盘退变动物模型承担着从基础理论到临床实践,从临床问题再到实验论证的不可或缺的重要角色。经过近80年来的不断研究,椎间盘退变动物模型已有数十种构建方法,主要分为生物力学改变、生物结构破坏、自发退变和全身疾病4大类型[1],每个类型又包含几种类似的造模方法。这些造模方式在模型设计、可靠性、操作性、重复性等方面各有优劣,     

健脾疏肝汤治疗慢性乙型肝炎218例

健脾疏肝汤是苏涟教授“福尔肝”系列方药之一,临床用于治疗慢性乙型肝炎肝郁脾虚证型患者。笔者自1994年6月～1997年6月随师门诊中,用该方为基础方辨证加减治疗慢性乙型肝炎218例,并追踪半年以上,现总结如下。 1 病例选择 根据辨病与辨症相结合的原则,按1990年上海病毒性肝炎会议修订的《病毒性肝炎防治方案》(试行)和1991年中国中医药学会内科肝病专业委员会     

市售炮制辅料醋中5-羟甲基糠醛含量的比较

目的 比较不同品种市售炮制辅料醋中5-羟甲基糠醛的含量。方法 采用高效液相色谱法测定5-羟甲基糠醛的含量,色谱条件为流动相甲醇-0.05%磷酸（8:92）,流速1.0 mL·min^-1,检测波长284 nm,进样量20 mL。结果 3批白醋中未检测到5-羟甲基糠醛,以黑糯米、小米等优质粮食为原料酿造的米醋中5-羟甲基糠醛含量相对较高,天立老醋、水塔老陈醋和恒顺镇江陈醋等有陈酿工艺的米醋中5-羟甲基糠醛含量高。结论 5-羟甲基糠醛含量的高低反映了米醋质量的优劣,5-羟甲基糠醛可作为米醋的质量控制指标。     

血栓形成易感基因芯片的研制及效果评价

目的：探讨血栓形成易感基因芯片的研制方法及初步临床验证,建立一种快速且高通量检测血栓形成易感基因突变的方法。方法：根据GenBank上已发表的血栓形成易感基因序列,将设计好的参照探针和特异性探针点置于醛基化处理的玻片上,经紫外交联后固定,制成血栓形成易感基因芯片。以阳性参考品（各检测位点突变型和正常型基因）和阴性参考品（双蒸水）为模板,经PCR反应后与芯片进行杂交,对基因芯片的有效性进行检测。以靶序列经过测序验证的人类基因组DNA为模板,经PCR反应后芯片进行杂交,检测基因芯片的特异度和灵敏度,并对来自吉林、河南和云南3个地区的健康受试者150人和有不明原因血栓性疾病家族史的血栓患者24例进行临床验证。分析指标为检测相应位点的杂交信号强度。结果：以阳性参考品和阴性参考品为模板进行杂交,相应位点出现特异性的杂交信号,说明基因芯片检测位点有效。用于检测选定突变位点的基因芯片均有特异性的杂交信号,说明基因芯片的特异性良好。标准基因组DNA逐级稀释后检测基因芯片的灵敏度为50~100 mg·L^-1。临床验证结果,在健康受试者150人中8人检出血栓形成易感基因突变,在有不明原因血栓性疾病家族史的血栓患者24例中20例检出血栓形成易感基因突变,该芯片对不明原因血栓性疾病家族史的血栓患者血栓形成易感基因突变检出率明显高于健康受试者（P<0.05）。结论：研制的血栓形成易感基因芯片具有良好的特异度和灵敏度,对血栓形成易感基因有较高的检出率,在血栓性疾病的早期诊断和易感风险评估中具有潜在价值。     

慢性心力衰竭患者血清Copeptin水平及临床意义

目的:研究不同程度心力衰竭及不同性质心力衰竭患者血清和肽素(Copeptin)水平及临床意义。方法:同时测定80名健康者(健康对照组)和130例慢性心力衰竭(CHF)患者(CHF组)的血清Copeptin和N末端脑钠肽(NT-proBNP)水平,并检测左室射血分数(LVEF)和左室舒张末期内径(LVEDd)值、E/A值、E/e'值。CHF组患者再按不同左室射血分数及收缩性心力衰竭(SHF)和舒张性心力衰竭(DHF)分组,比较各组血清Copeptin和NT-proBNP水平。结果:CHF组患者血清Copeptin和NT-proBNP水平明显高于健康对照组(P0.01),不同程度CHF及不同性质的CHF患者其Copeptin之间比较有统计学意义。结论:Copeptin水平可作为心力衰竭患者临床诊断、评估病情的一个客观指标,有助于鉴别收缩性与舒张性心力衰竭。     

抗血管生成药物联合化疗治疗晚期复发性上皮性卵巢癌的研究进展

近年来,如何有效改善复发性上皮性卵巢癌（REOC）的预后已成为研究的重点。随着对于REOC发病机制的深入研究,已经研究或正在开发的许多抗血管生成药物,可作为晚期REOC患者的潜在治疗选择。国内外相关研究表明,以贝伐珠单抗为代表的抗血管生成药物联合化疗的治疗策略显示出协同抗肿瘤作用,可显著延长REOC患者的生存期。许多新兴的抗血管生成药物在治疗晚期REOC的疗效数据也已经公布。本文对抗血管生成药物联合化疗在REOC治疗中的疗效和安全性作一综述。     

牙源性干细胞的研究进展

牙齿再生是口腔领域的新挑战,牙源性干细胞的运用是牙齿再生的核心。目前已有一些牙源性和非牙源性干细胞及前体细胞被分离出来,并被用于牙齿再生方向的研究。这些干细胞有着不同的生物学特性及临床运用潜力,更好的了解这些干细胞各自特性和研究现状有助于对其进行深入研究和在牙齿再生中运用。本文重点就牙源性干细胞的研究进展情况进行综述。     

淫羊藿甙促进成骨细胞增殖与分化的作用及其机制

 目的 探讨淫羊藿甙对骨形态发生蛋白细胞信号通路Smad1、Smad5和Smad4表达的调节作用及促进成骨细胞增殖与分化的机制。方法 在体外分别用含淫羊藿甙0、10^-9、10^-8 和10^-7 mol/L的条件培养液干预MC3T3-E1细胞。给药后第1天、2天和3天,分别应用四甲基噻唑蓝法绘制细胞生长曲线并计算细胞群体倍增时间,用速率分光光度法测定碱性磷酸酶含量,用RT-PCR和Western blot技术检测Smad1、Smad5、Smad4及骨钙素、Runx2、骨形态发生蛋白-2、骨保护素mRNA的表达,于细胞生长的第21天观察钙结节数量。结果 淫羊藿甙含量为10-8 mol/L时,MC3T3-E1细胞增殖能力最强,碱性磷酸酶活性和钙结节数量明显增加;淫羊藿甙作用细胞第1天、2天和3天时,10-8 mol/L组细胞Smad1、Smad5和Smad4 mRNA的表达量始终保持较高水平,第3天时10^-9 mol/L和10^-7 mol/L组表达明显减少;第2天时,10^-8 mol/L组细胞Runx2、骨形态发生蛋白-2、骨保护素mRNA和骨钙素、Smad1、Smad5和Smad4蛋白表达明显增加。结论 淫羊藿甙通过直接刺激 MC3T3-E1细胞的骨形态发生蛋白-2、Runx2、Smad1、Smad5和Smad4的表达,且以表达水平同步增高的方式促进其成骨性分化。