阿糖胞苷对白血病细胞K562凋亡抑制基因Survivin的作用研究

目的 了解人类白血病细胞在化疗药物阿糖胞苷作用下的Survivin凋亡抑制基因表达情况,探讨阿糖胞苷治疗耐药的可能机制.方法 用MTT比色法检测K562细胞对阿糖胞苷的敏感性,以阿糖胞苷的IC50药物浓度处理K562细胞.应用RT-PCR和Western blotting的方法 检测各组细胞Survivin基因的mRNA表达情况和蛋白质的表达情况.结果 K562细胞经阿糖胞苷作用24、48 h后,细胞的Survivin mRNA表达较加药前分别增加1.92、3.38倍(P<0.05);24、48 h阿糖胞苷作用组细胞的Survivin的蛋白表达较对照组分别增加1.92、2.64倍(P<0.05).结论 阿糖胞苷作用白血病细胞后,细胞的Survivin基因mRNA和蛋白质表达升高,且具有时间效应.化疗药物作用后Survivin基因表达升高可能是白血病细胞治疗耐药的又一机制.     

调节破骨细胞分化的RANK特异性基序的再确认

目的： 进一步确认核转录因子NF-κB受体激动剂（RANK）蛋白中调节破骨细胞(OC)分化的特异性基序(motif),为阐明OC分化机制提供理论依据。方法: 分别突变RANK蛋白膜内部分第533-540之间的8个氨基酸（突变前氨基酸序列为DIIVVYVS,突变后氨基酸序列为ELLAAFAA）,用定点突变方法构建8个由肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)和RANK跨膜部分和膜内部分共同组成的TNFR1/RANK突变嵌合体(TNFR1/RANK-533-TNFR1/RANK-540),每1个突变体在其RANK膜内部分含1个突变氨基酸。用包装细胞plat E分别将各突变体包装成逆转录病毒,通过逆转录病毒感染分别将这些突变体转染到TNFR1/TNFR2基因敲除小鼠的骨髓巨噬细胞(BMM)中。用TNF-ɑ和单核细胞集落刺激因子（M-CSF）刺激、观察转染哪种突变体的BMM不能诱导OC形成,不能诱导OC形成的突变体所包含的突变前氨基酸就是RANK调节OC分化的关键氨基酸,多个关键氨基酸组成的片段就是RANK特异性motif。结果: 转染TNFR1/RANK-533、TNFR1/RANK-539和TNFR1/RANK-540的BMM均能分化成OC,表明氨基酸D533、V539、S540突变后对OC分化无影响;转染TNFR1/RANK-534的BMM有极少数能分化成OC,表明氨基酸I534突变后对OC分化有部分影响;而转染TNFR1/RANK-535、TNFR1/RANK-536、TNFR1/RANK-537和TNFR1/RANK-538的BMM均不能分化成OC,表明氨基酸I535、V536 、V537和Y538突变后对OC分化起关键影响。结论: I534、I535、V536 、V537和Y538这5个氨基酸组成的片段（534-IIVVY-538）可能就是RANK调节OC分化的特异性motif。     

试谈内消法在肿疡的应用

肿疡初起,尚未成脓,治疗上当以内消法为首要,是历代医家所提倡的“以消为贵”的大法。疮疡多见发于体表,但又与患者的脏腑、气血、经络有关。《外科启玄》云:“凡疮疡皆由五脏不和,六腑壅滞,则令经脉不通而生焉。”同样,体表疮疡的邪毒也可通过经脉,影响脏腑、气     

系统性红斑狼疮患者血清IgG对骨髓造血干/祖细胞抑制和凋亡的研究

目的：观察系统性红斑狼疮（SLE）患者血清IgG类抗体体外造血抑制活性及其与造血细胞过度凋亡的关系.方法：应用甲基纤维素集落培养法、原位末端标记及流式细胞术观察系统性红斑狼疮患者血清IgG在体外抑制正常骨髓造血干/祖细胞的增殖及促进正常CD34＋细胞的凋亡.结果：活动期SLE患者血清IgG体外可明显抑制正常骨髓粒-巨噬系祖细胞（CFU-GM）和红系祖细胞（CFU-E）的增殖.这种IgG可特异吸附于正常CD34＋细胞表面,加速CD34＋细胞凋亡,上调CD34＋细胞Fas抗原表达水平.结论：活动期SLE患者血清IgG在体外可抑制正常骨髓造血干/祖细胞的增殖.机制与其上调CD34＋ Fas抗原表达水平而促进CD34＋细胞凋亡有关.     

阿糖胞苷对白血病细胞K562凋亡抑制基因Survivin的作用研究

目的 了解人类白血病细胞在化疗药物阿糖胞苷作用下的Survivin凋亡抑制基因表达情况,探讨阿糖胞苷治疗耐药的可能机制.方法 用MTT比色法检测K562细胞对阿糖胞苷的敏感性,以阿糖胞苷的IC50药物浓度处理K562细胞.应用RT-PCR和Western blotting的方法 检测各组细胞Survivin基因的mRNA表达情况和蛋白质的表达情况.结果 K562细胞经阿糖胞苷作用24、48 h后,细胞的Survivin mRNA表达较加药前分别增加1.92、3.38倍(P<0.05);24、48 h阿糖胞苷作用组细胞的Survivin的蛋白表达较对照组分别增加1.92、2.64倍(P<0.05).结论 阿糖胞苷作用白血病细胞后,细胞的Survivin基因mRNA和蛋白质表达升高,且具有时间效应.化疗药物作用后Survivin基因表达升高可能是白血病细胞治疗耐药的又一机制.     

急性白血病医院感染热带假丝酵母菌性败血症的临床特点及危险因素

目的探讨急性白血病患者医院感染热带假丝酵母菌性败血症的临床特点及危险因素。方法回顾分析1997年1月~2008年12月收治的经血培养证实27例急性白血病合并假丝酵母菌性败血症中23例热带假丝酵母菌性败血症的临床资料。结果27例急性白血病合并假丝酵母菌属性败血症,热带假丝酵母菌23例(85.2%),23例患者均有高热(100.0%),伴寒颤7例(30.4%),皮疹7例(30.4%),合并感染性休克5例(21.7%),肺部病变16例(69.6%),肺多发结节7例(30.4%),肝脾多发结节4例(17.4%),抗真菌治疗总有效率60.9%,两性霉素B、卡泊芬净有效率分别为71.4%与75.0%,感染相关死亡9例,死亡率为39.1%。结论急性白血病医院感染假丝酵母菌性败血症中热带假丝酵母菌是主要菌种,治疗首选两性霉素B、卡泊芬净。     

阿糖胞苷对白血病细胞K562凋亡抑制基因Survivin的作用研究

目的 了解人类白血病细胞在化疗药物阿糖胞苷作用下的Survivin凋亡抑制基因表达情况,探讨阿糖胞苷治疗耐药的可能机制.方法 用MTT比色法检测K562细胞对阿糖胞苷的敏感性,以阿糖胞苷的IC50药物浓度处理K562细胞.应用RT-PCR和Western blotting的方法 检测各组细胞Survivin基因的mRNA表达情况和蛋白质的表达情况.结果 K562细胞经阿糖胞苷作用24、48 h后,细胞的Survivin mRNA表达较加药前分别增加1.92、3.38倍(P<0.05);24、48 h阿糖胞苷作用组细胞的Survivin的蛋白表达较对照组分别增加1.92、2.64倍(P<0.05).结论 阿糖胞苷作用白血病细胞后,细胞的Survivin基因mRNA和蛋白质表达升高,且具有时间效应.化疗药物作用后Survivin基因表达升高可能是白血病细胞治疗耐药的又一机制.     

参芪扶正注射液对血液恶性肿瘤化疗患者造血功能和免疫功能的影响

目的 研究参芪扶正注射液对血液系统恶性肿瘤化疗患者造血功能和免疫功能的影响。 方法80例均处于初治诱导缓解治疗阶段的血液肿瘤患者,分为治疗组和对照组,治疗组在化疗的同时给予参芪扶正注射液250 mL/（g·d） ,共14天,对照组单用化疗,两组其他支持治疗相同。观察两组化疗后缓解率,化疗前后血常规、T淋巴细胞亚群（CD+3、CD+4、CD+4/CD+8）和B淋巴细胞（CD－3CD+19）的水平。 结果 化疗后缓解率治疗组［90.0%(36/40)］与对照组［82.5%(33/40)］比较,差异无统计学意义（P>0.05）;化疗后治疗组外周血白细胞计数和血红蛋白均高于对照组（P＜0.05）;CD+3、CD+4及CD+4/CD+8水平均明显高于对照组（P＜0.05）,CD－3CD+19 两组比较差异无统计学意义。 结论 参芪扶正注射液能减轻化疗对血液肿瘤患者骨髓造血功能的抑制,并能促进化疗患者骨髓造血功能的恢复;提高化疗患者的细胞免疫功能;改善血液肿瘤化疗患者的生活质量。     

白血病细胞间细胞隧道纳米管的观察

目的：探讨人髓系白血病细胞株K652细胞间是否存在细胞隧道纳米管（TNT）通讯。方法：取对数生长期K562细胞,运用过碘酸-雪夫染色及扫描电镜对K652细胞进行观察。结果：过碘酸-雪夫染色发现爬片培养的少量K652细胞间存在长约3～6μm的细丝状连接,管径为0．1～0．2μm。扫描电镜下观察发现K562细胞间有长度约为2～10μm长短不一的细胞间丝。结论：K562细胞间存在TNT通讯,这为从细胞通讯层面研究白血病的发生机制以及白血病的靶向治疗提供了基础。     

脐带间充质干细胞治疗难治性慢性移植物抗宿主病的疗效观察

目的 探讨脐带来源间充质干细胞(MSC)治疗异基因造血干细胞移植术后难治性慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的疗效及安全性。 方法 7例恶性血液病患者接受异基因造血干细胞移植术后出现cGVHD,常规免疫抑制剂治疗无效,在原有免疫抑制剂基础上给予脐带来源MSC治疗,细胞数1×10⁶/kg,每周1次,共4次。观察其疗效、安全性和患者存活情况。 结果 7例患者接受MSC输注后,2例获得完全缓解(CR),3例部分缓解(PR),总有效5例(5/7),2例无效(NR)。未发现输注相关不良反应,无患者出现原发病复发。1例患者部分缓解后继发巨细胞病毒肺炎,死于重症肺炎,其余病例均存活。 结论 脐带MSC对于治疗难治性cGVHD具有一定的疗效,且输注过程安全。